ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣｔｔ ２０１０ＶＯＬ．２１ ＮＯ．】 的正性调节细胞因子、炎性介质以及自身抗体使自身组织受到攻 击，产生自身免疫’ 本研究通过体外实验观察到ｃＴ低浓度时 时珍国医国药２０１０年第２１卷第１期 表２ ＣＴ体外对ＣＩＡ大鼠ＣｏｎＡ诱导的胸腺细胞和ＬＰＳ诱导的 脾细胞增殖反应的影响（ｉ±ｓ） 对正常ＳＤ大鼠的淋巴细胞增殖反应具有促进作用，随着浓度的 升高开始出现抑制作用，表明ＣＴ对正常大鼠的免疫功能具有浓 度和机能依赖性的双向免疫调节作用。本研究表明，ＣＴ对ＣＩＡ 大鼠异常的免疫功能具有一定的改善作用，低浓度时（０．１ ｍ１）对ＣＩＡ大鼠ＣｏｎＡ诱导的胸腺细胞低下的免疫功能具有增强 作用，高浓度时（１００，１ ０００ ｇ／ｍ１）对ＬＰＳ诱导的脾细胞亢进的 与Ⅱ：常组比较，一Ｐ＜０ Ｏｌ；与模型组比较， Ｐ＜０ ０５， Ｐ＜０．０１；刺激剂：胸腺细 免疫功能具有抑制作用。提示ＣＴ可能通过改善ＣＩＡ大鼠异常 的免疫功能而治疗ＲＡ，其进一步的作用和机制有待深入研究。 表１ ＣＴ体外对正常大鼠ＣｏｎＡ诱导的胸腺细胞和Ｉ Ｐｓ诱导 的脾细胞增殖反应的影晌（ｉ±ｓ） 胞为ＣｏｎＡ（＋），脾细胞为ＬＰＳ（＋） 参考文献： ｌ ［２ 朱莆，魏伟，郑咏秋．白芍总苷对胶原性关节炎大鼠滑膜细胞 修．药理实验方法学，第３版［Ｍ］．北京：人 的作用及机制：Ｊ］．药学学报，２００６，４１（２）：１６６． 徐叔云，卞如濂，陈民卫生出版社，２００２：１４２６． ［３ ｊ Ｖａｎｄｅｒ Ｂ Ａ，Ｇｅｕｓｅｎｓ Ｐ，Ｒａｕｓ Ｊ，ｅｔ ａｌ Ｔｈｅ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅ— ｓｉｓ ｏｆ ｒｈｅｕｍａｔｉｏｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ－ｒｏｌｅ ｏｆ ａｕｔｏｒｅａｅｔｉｖｅ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ＩｌｅＷ ｉｍｍｕ— ｎｏｔｈｅｒａｐｉｅｓ［Ｊ］．Ｓｅｍｉｎ Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ，２００１，３１（３）：１６０． 正常组比较， Ｐ＜０ ０１；与ｃｏｎＡ或ＬＰＳ组比较， Ｐ＜０ ０５， Ｐ＜０ ０１；刺激 剂：胸腺细胞为ＣｏｎＡ（＋），脾细胞为ＬＰＳ（＋） 当归补血汤粗多糖补气生血作用 研究和组方合理性探讨 方晓艳，苗明三 （河南中医学院，河南郑州４５０００８） 摘要：目的探讨当归补血汤粗多糖补气生血作用机理和组方的合理性 方法用放血与环磷酰胺并用所致气血双虚模 型大鼠为研究对象，观察药物对血清白细胞介素一２（ＩＬ一２）、白细胞介素一６（ＩＬ一６）、促红细胞生成素（ＥＰＯ）水平的影 响。结果当归补血汤粗多糖及单味药多糖可不同程度提高放血与环磷酰胺并用致气血双虚模型大鼠血清ＩＬ一２、ＩＬ一 ６、ＥＰＯ的水平，以当归补血汤粗多糖的作用最好。结论当归补血汤粗多糖可提高机体的免疫功能和造血功能，全方组 方具有合理性 关键词：补气生血； 气血双虚；免疫功能；造血功能 中图分类号：Ｒ２８９．５ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００８－０８０５（２０１０）０１—００９３－０２ 当归补血汤多糖（Ｄａｎｇｇｕｉｈｕｘｕｅｔａｎｇ．ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ）为经典 １．２ 药品当归补血汤粗多糖，由河南中医学院药物化学学科提 名方当归补血汤（黄芪：当归＝５：１）的提取物，当归补血汤是 供；当归补血口服液，郑州市协和制药厂生产，批号０１０３０１；环磷 上海华联制药有限公司生产，批号０１０３１２；ＩＬ一１放免试剂 首补气生血方剂，主要治疗劳倦内伤、气弱血虚、阳浮外越等 酰胺，一证，在临床上的应用非常广泛。现代研究提示，当归补血汤对机 盒，由中国人民解放军总医院科技开发中心放免研究所提供，批 体的免疫功能和造血功能有促进作用 Ｊ，但对其补血作用的物 号０２０１２６；ＩＬ一６放免试剂盒，由中国人民解放军总医院科技开 质基础及机理研究还少见报道，我们先前的研究提示，当归补血 发中心放免研究所提供，批号０２０１２６；ＥＰＯ放免试剂盒，由中国 汤多糖有较好的免疫兴奋作用 。本文报道当归补血汤及单味 人民解放军总医院科技开发中心放免研究所提供，批号０２０１２６。 药粗多糖对血虚大鼠细胞因子的影响，探讨当归补血汤粗多糖的 １．３仪器ＦＴ一６１３自动计数 Ｉ放射免疫测量仪，北京核仪器 补气生血机理及组方的合理性。 １材料与仪器 厂生产。 ２方法 １．１ 动物大鼠，Ｗｉｓｔａｒ品种，由河南省医学实验动物中心提供。 ２．１分组与给药取大鼠５４只，体质量１８０～２００ ｇ，雌雄各半， 随机均分为９组，其中８组分别灌服大、中、小剂量的当归补血汤 粗多糖水溶液（２００，１００，５０ ＨＩｇ／ｋｇ），黄芪粗多糖水溶液（８５ ｍｇ／ ｋｇ），当归粗多糖水溶液（１５ ｍｇ／ｋｇ），芪归粗多糖水溶液（１００ ｍｇ／ 基金项目：河南省重点科技攻关项目（Ｎｏ．００１１７０７１６） 黄芪粗多糖：当归粗多糖＝５：１），当归补血口服液（３．３ｍｌ／ 作者简介：方晓艳（１９７４．），女（汉族），河南禹州人，现任河南中医学院讲 ｋｇ，师，北京中医药大学在读博士研究生，硕士学位，主要从事中药药理研究 ｋｇ），及同体积生理盐水，连续１４ ｄ。模型组及给药组大鼠于给药 工作． 的第１日，每鼠尾部放血约１ ｍｌ，隔日放血１次，连续放血５次， 收稿日期：２００８－０９—１９； 修订日期：２００９－０９．１６ 通讯作者简介：苗明三（１９６５一），男（汉族），河南新乡人，现任河南中医 模型组及给药组大鼠于给药的第２日，每鼠腹腔注射环磷酰胺 学院教授，博士学位，主要从事中药药理研究工作． ４０ ｍｇ／ｋｇ，隔日注射１次（以后的剂量为２０ ｒａｇ／ｋｇ），连续注射６ ・９３・ 时珍国医国药２０１０年第２１卷第１期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２０１０ＶＯＬ．２１ ＮＯ．１ 次。另设一完全空白对照组，灌服并注射同体积的生理盐水。于 明显降低（Ｐ＜０．０５），ＩＬ一６，ＥＰＯ水平显著降低（Ｐ＜０．０１），说明 最后１次给药后２ｈ，大鼠腹主动脉取血，离心，取血清，低温冰箱 造大鼠气血双虚模型成功。与模型组比较，当归补血汤粗多糖大剂量组和当归补血口服 保存，备测白细胞介素一２（ＩＬ一２）、白细胞介素一６（ＩＬ一６）、促 液组能显著升高气血双虚大鼠血清中的ＩＬ一２水平（尸＜０．０１）， 红细胞生成素（ＥＰＯ）。 ２．２统计学方法实验结果以ｉ± 表示，数据分析用ＳＰＳＳ１０．０ 黄芪多糖组能明显升高ＩＬ一２水平（Ｐ＜０．０５），其余各组对ＩＬ一 ｆ０ｒ ｗｉｎｄｏｗｓ统计软件，组间比较采用单因素方差分析。 ２水平的升高无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；除当归补血口服液组外， 其余各给药组均能显著升高气血双虚大鼠血清中的ＩＬ～６水平 ３结果 当归补血汤粗多糖及单味药粗多糖对大鼠气血双虚模型血 （Ｐ＜０．０１）；除当归补血汤粗多糖小剂量组能明显升高血清中 清中ＩＬ一２，ＩＬ一６，ＥＰＯ的影响见表１。 ＥＰＯ水平（Ｐ＜０．０５），其余各给药组均能显著升高血清中ＥＰＯ 结果表明，与空白对照组比较，模型组大鼠血清ＩＬ一２水平 水平（Ｐ＜０．０１）。 表】 当归补血汤粗多糖对大鼠气血双虚模型血清中ＩＬ一２、ＩＩ 一６、ＥＰＯ的影响（Ｘ±ｓ） 与空白对照组比较， Ｐ＜０．０１， Ｐ＜０．０５；与模型组比较， Ｐ＜０．０１， Ｐ＜０．０５；ｎ＝６ 糖能显著升高血虚大鼠血清中的ＥＰＯ水平，促进红细胞的生成， 现代医学认为中医理论所渭的“正气存内，邪不可干”是指 说明了古人组方的合理性，同时也体现了中医治疗疾病的特色； Ｌ一６ 机体的免疫功能良好，若气虚则机体免疫功能下降。中医理论认 而复方多糖组和单味药多糖组均能升高血虚大鼠血清中的Ｉ为“气为血之帅，血为气之母”，若气虚则血生化无源，骨髓造血 水平，以上结果说明复方多糖和单味药多糖促进造血功能的机理 功能减退，血细胞生成减少，表现为血虚证，与现代医学中“贫 不完全相同，即选择性的靶作用点可能不同。黄芪多糖组对各项 ４讨论 细胞因子的改善作用都比当归多糖组好，说明对于气血双虚模 故在治疗时，宜重用黄芪大补脾肺之气，以裕生血 ＩＬ一２是一种广谱的免疫增强剂，有抗肿瘤、抗微生物感染， 型，气随血脱，同时也印证了李东垣所谓的“血不自生，须得阳气之助，血 引起移植排斥及免疫调节等作用。ＩＬ一２最重要的作用是诱导Ｔ 之源，血”非常相似。 淋巴细胞增殖（从Ｇ 期进入Ｓ期）和分化。ＩＬ一６由多种细胞产 自旺矣”的理论，芪归多糖组对各项细胞因子的改善作用都没有 生，对免疫应答、急性期反应、造血和神经系统有多方面作用。由 当归补血汤粗多糖大剂量组好，说明当归补血汤粗多糖补气生血 更加证明了前 ＩＬ一６刺激产生的骨髓细胞集落容易在致死性放射线照射小鼠 作用的发挥不是黄芪多糖和当归多糖的简单相加， 中重建骨髓。目前，ＩＬ一６作为治疗血小板减少药物的Ⅲ期临床 人组方的科学性。实验正在进行。ＥＰＯ的作用是维持红细胞造血前体细胞的存活 并促进其分裂，诱导晚期爆式红系祖细胞（ＢＦＵ—Ｅ）和红系祖细 参考文献：胞（ＣＦＵ—Ｅ）生长成为成熟的红细胞，ＥＰＯ对红细胞的血红素化 ［１］ 高建．当归补血汤正丁醇部位对小鼠免疫功能的影响［Ｊ］．中药 很重要，输入ＥＰＯ可增加正常小鼠、贫血小鼠和红细胞增多症小 药理与临床，２００７，２３（５）：２４ 危建安，黄兆胜，吴利当归补血汤功效及其物质基础研究［Ｊ］． 鼠的红细胞压积，ＥＰＯ能使未成熟骨髓网织红细胞在成熟前释 ［２］中药药理与临床，２００３，Ｉ９（２）：８． 放，进一步增加血液中的红细胞 。故检测这些细胞因子的水平 吴岩，祝彼得．“当归补血汤”在体外对小鼠骨髓造血细胞增殖 可用来解释药物对机体免疫系统和血液系统的作用机制，探讨药 ［３］和分化作用影响的研究［Ｊ］．解剖科学进展，２００４，１０（８）：５７． 物的补气生血作用机制。 实验结果提示，当归补血汤粗多糖大剂量组和黄芪多糖组能 ［４］ 苗明三，方晓艳，张丽萍当归补血汤粗多糖对正常小鼠免疫功能 的影响［Ｊ１．中华实用中西医杂志，２００３，１６（１）：１０６ 升高血虚大鼠血清中的ＩＬ一２水平（Ｐ＜０．０１），即提高了机体的 免疫功能，其他给药组仅有升高ＩＬ一２水平的趋势，这可能是当 药药理与ｌ临床，２００５，２１（１）：６０． 归补血汤多糖大补元气，增强机体抗御外邪能力的机理之一，同 ［６］孙卫民，王惠琴．细胞因子研究方法学［Ｍ］．北京：人民卫生出版 时也说明了黄芪为补气之要药，证明了传统医学中的“补气”与 社，１９９９：３８９，４４６，６５４． 现代医学的提高免疫力的统一性；当归补血汤粗多糖比单味药多 ［５］ 苗明三，顾丽亚，方晓艳，等．大鼠气血双虚动物模型的复制［Ｊ］．中 ・９４・