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液体摇瓶培养鸡腿菇菌种的生理与应用研究

来源:一二三四网
维普资讯 http://www.cqvip.com etn6£es 2oo2/9. 蔬 菜 蜜 窗 傩摇 塘 腿 的 理 厕 蒋国建 姚建华 采用摇瓶液体培养食用菌菌种,具有生产条件稳 2.培养基 定、菌丝体的菌龄整齐一致、生产周期短、产量高、成 (1)固体培养基马铃薯黄豆芽葡萄糖琼脂斜面培 本低、污染少等优点,是食用菌业实现机械化、自动化 养基,用于母种保藏。棉籽壳培养基:棉籽壳92%、麸 的基本保证,是食用菌行业规模化和产业化生产的发展 皮5%、蔗糖1%、碳酸钙2%,先将干物质拌匀后,再 方向。 加入洁净无污染的井水,充分拌匀,覆膜堆闷5~6h,料 鸡腿菇是继平菇之后,在全国范围内商业化栽培的 水比为1:1.25,用45cm×22cm聚丙烯塑料袋或500mL 又一个食用菌品种。目前鸡腿菇菌种的生产主要采用聚 广口瓶装料,按常规方法灭菌后接种。 丙烯塑料袋装人固体基质培养,由于菌丝吃料速度较 (2)液体培养基采用半合成液体培养基,麸皮3%、 慢,从接种到满袋约需要28~35天,周期长,无形中 玉米粉1%、黄豆粉0.5%、KH2PO4 O.15%、MgSO4・7H O 增加了菌种的污染率,且袋口与袋底菌龄相差2O多天, O.1%,以蔗糖作碳源,改变其在培养基中的含量,构成 影响了菌种的质量。而鸡腿菇液体菌种具有周期短,菌 不同的碳氮比,浓度分别为1.0g/mL、1.Sg/mL、2.0g/mL、 龄整齐一致的优点,但是又存在保存期短的不足。笔者 2.5g/mL、3.0g/mL和3.Sg/mL。 近几年来一直在摸索将固体菌种和液体菌种的优点结合 3.培养方法和条件 在一起的方法,使其技术优势和经济优势显现出来。本 (1)液体摇瓶培养在250mL三角瓶中,装液体培 试验对液体摇瓶培养鸡腿菇菌种的部分生理和栽培生产 养基50mL,在1.1×105 Pa压力下灭菌30min,接人 运用进行了研究。 活化的斜面母种0.5cm2见方,置于摇床上,于25"C条 一、材料与方法 件下培养6天备用。用MP250.1(感量0.01g)电子天 1.供试蕾种鸡腿菇品种Cc168,由湖北华中食用 平,按配方准确配制碳氮比不同的培养液,用PHS.29A 菌栽培研究所提供。 型酸度计测培养液酸碱度,用0.1N HC1和NaOH调节 蒋国建,新疆博州科技开发中心,833400, pH值,用移液管吸取100mL培养液到500mLZ角瓶中, 姚建华,通讯地址同第l作者 灭菌后每瓶接人lmL已培养好的液体菌种,用黑色、白 高时,栽培过程中不需要再施钾肥,而当土壤中KO处 当镁含量处于很低和低等级时,蔬菜即出现缺镁症状。 于中、低等级时,除需补充当季蔬菜需钾量外,还要根 从表4可看出:土壤越粘重含镁量越丰富,而当土 据土壤质地的不同,多施人4O~75kg/hm 的氧化钾,以 壤中镁含量处于高和很高等级时,也不用再施镁肥,而 弥补土壤缺钾状况,做到用地养地相结合。 处于很低和低等级时,每hm 应施人5O~100kg MgO。 四,土壤中镁的丰缺指标 补充镁肥时配合施人有机肥效果会更好,同时过量使用 蔬菜吸收的镁主要是水溶性和交换性镁,而水溶性 石灰与钾肥时也易发生缺镁症状。 镁含量很低,所以交换性镁是衡量镁水平的重要指标, 表4土壤中镁含量指标及施肥量 , 酸 维普资讯 http://www.cqvip.com 逡 色布套分别套在三角瓶上,控制不同的光照强度,放入 25℃条件下培养6天,收获菌丝球。 (2)测试方法将培养液经6O目尼龙筛网过滤,菌 丝球用蒸馏水冲洗数次后,在7O℃下烘干至恒重,称 e 咖 s 2002/9 表2鸡腿菇菌丝生长过程中对糖的消耗单位:g/100mL 糖消耗(%) 自动显示振荡频率的HZO.XL型恒温振荡培养箱中,在 处理(培养前含糖度)菌丝干重培养后含糖度100mE液体培养液中的菌丝干重( 100mL)。 (3)分组对比将前述灭菌后装棉籽壳培养料的袋 和瓶放入接种室。500mL广口瓶制作原种,塑料袋作出 菇袋,分别装入液体菌种(试验组)和固体菌种(对照 3.菌丝生长过程中培养液pH值的变化配制不同梯 组)。液体菌种接入量:将前述制作好的液体菌种分别 度pH值的培养液,摇瓶培养鸡腿菇菌丝,测定培养前 接入广口瓶和出菇袋,接入量为原种5mL/瓶,出菇袋 后培养液pH值,考察鸡腿菇生长过程中pH值的变化, 25mL/袋。固体菌种:每支母种接5瓶原种,原种满瓶 结果见表3。 后,每瓶原种接15只出菇袋,每个处理为一组,每组 1O个重复,然后放置在25 ̄C恒温条件下培养。 4.测试与观察 表3鸡腿菇生长过程中培养液pH值变化单位:g/100mL (1)用酸度计测培养液pH值变化,用糖度计测培 养液总含糖量的变化。 (2)测鸡腿菇菌丝每天生长的长度,记录从接种的 当天到长满的天数,以菌丝在瓶或袋内全部盖住棉籽壳 培养基为标准。 (3)观察菌丝球的形状和数量、培养液的色泽、菌 丝球的形成、培养液的气味和清澈度。 二.结果与讨论 1.理化因子对菌丝生长的影响(见表1) 表1 理化因子对鸡腿菇菌丝生长的影响 结果表明:培养液pH值对菌丝生长影响很大,对 比接种培养前后培养液pH值的变化情况,发现鸡腿菇 接种在不同pH值梯度的培养液中培养,最后都将培养 液pH值调至6.5左右,说明鸡腿菇菌丝具有调整pH值 的功能,pH值3~8都能生长,最适pH值5~6。 4.液体茵种在围体基质上的生长按前述每组1O次 重复,菌丝长满时间,取1O次重复的平均值,按天计 注:每4"7g平重复3次。 算,结果见表4。 表4液体菌种在固体基质上的生长速度单位:天 从表1看,振荡频率对液体摇瓶培养鸡腿菇菌丝生 长的影响最大,振荡频率7O次/min时,菌丝体形成菌 丝球,菌丝生长良好;在9O次/min时,菌丝分散,不 能形成菌丝球,生长明显减少。光照强度对菌丝生长影 响很小,室内散射光就能满足菌丝生长要求。 2.菌丝生长过程中糖的消耗与作用配制含不同糖 观察液体菌种在固体基质上的生长情况,与对照单 一度的培养液,接种前后测定培养液的糖度,考察鸡腿菇 生长过程中糖的消耗规律,结果见表2。 在接种口萌发菌种相比较,液体菌种在固体基质上能 多点萌发,菌丝向多方向延伸,生长均匀,早8~1O天 结果表明,接种前后培养液的糖度变化均在3%左 满瓶(袋),可见使用液体菌种接种固体基质进行制种, 右,说明鸡腿菇菌丝生长过程中对糖的消耗很少。 能兼具液体菌种和固体菌种的优点。 

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