药物分析教案

第一章 绪论

第一节 药物分析的性质和任务

一、 药物分析在实际生活中应用广泛：

车祸→油漆→红外检测→罪犯

体育比赛→兴奋剂检查→质谱检查物质中的碎片机构→百万分之一 梅花K胶囊→杂质检查→差向四环素含量超标

药物分析定义：研究鉴定药物的化学组成和测定药物组分含量的原理和方法的一门应用科

学。

药物：化学结构已经明确的天然药物、合成药物及制剂，合成药物的原料、中间体和副产

品，以及制剂的赋形剂和附加剂，药物的降解产物和体内代谢产物等。

药物→制剂的赋形剂、附加剂→制剂→体内→降解产物、体内代谢物

原料→中间体

副产品

分析：药物的真伪

真：药物的化学组成→真：多少，药物的含量 伪：药物的杂质 →伪：多少，杂质的限量

举例：阿莫西林药物

药物分析的内容：

检测药物的性状→鉴定药物的化学组成→检查药物的杂质限量→测定药物的含量。

药物分析的任务：

根据药品质量标准的规定及药品生产质量管理规范的有关规定，全面控制药品质量，保证用药安全。

第三节 药品检验工作的依据和程序

一、药品检验工作的依据：

1、三级标准：中国药典、部颁标准、地方标准

2、生产企业：为了提高和保证产品质量，自订内控质量标准

3、医疗单位自制的制剂：卫生行政部门批准的质量标准进行检验。 4、进出口药品：由口岸药检所按有关质量标准或合同规定检验。

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二、药品检验工作的程序：

程序：取样→外观性状观测→鉴别→检查→含量测定→写出检验结果和检验报告书

操作方法：按《中华人民共和国专业标准药品检验操作标准汇编》

1、取样→少量、代表性、均匀

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2、性状观察：观色、嗅、味、物理常数→初步判定真伪

观察：色、嗅、味、外观 如：维生素C变黄失效 测定：物理常数（熔点、沸点、比重、折光率等） 3、鉴别

原则：鉴别方法必须准确，灵敏、简便、快速→判别药物真伪 4、检查

杂质检查（纯度检查）→检查所含杂质是否低于最大允许量（不测定准确含量） 5、含量测定

测出含量是否符合药典、部颁标准、地方标准 6、填写检验报告书

检验记录：真实、完整、科学（实验记录）

检验报告：记录内容，检测结果，结论，处理意见→实验报告

如：葡萄糖检验：

经检验乙醇溶液的澄清度不符合规定

处理意见：可用做口服葡萄糖，不得供制备注射液

第二章 药品质量标准

一、药品质量的特性 1、疗效确切

2、使用安全，毒副作用小 3、稳定性好，有效期长 4、给药方便→剂型

5、包装适当→便于储存、运输和使用 6、价格便宜

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二、药品质量标准

定义：把反映药品质量特性的技术参数、指标明确规定下来，形成技术文件，规定药品质

量规格及检验方法

中国药典 中华人民共和国卫生部药品标准 地方标准

国家标准 经整理可上升为部颁标准 中国药典

修订后 部颁标准 地方标准 整理后可上升

第二节 现行药典和部标准

一、中国药典

英文全称：PHARMACOPOEIA OF THE PEOPLES‘S REPUBLIC OF CHINA 中文全称：中华人民共和国药典 缩写： CHP.（2000）

世界上第一本药典《唐朝的新修本草》→解放前沿用国外药典→1953年药典→1963年药典→文革→1977年药典→1985年药典→1990年药典→1995年药典→2000年药典 现行药典增加了和修订了最多的是：

1、抗生素

2、生化及生测药品 新增了技术

1、毛细管电泳法 2、热分析法

3、X-射线粉末衍射法等三种仪器分析方法 三、正确阅读、理解和执行药典内容

1、凡例：对药典的总说明，记载了药典中各种术语的含义及其使用时应注意的事项。 例：正文中的醋酸，凡例中规定为浓度为36%-37%C2H4O2的浓度，而不是使用冰醋酸 如4%（g/ml）醋酸溶液1000ml的正确方法是：取醋酸（36%—37%）105ml，加水稀释至1000ml，摇匀。

规定取用量为“约”若干时，系指取用量不得超过规定量的±10% 精密称定时，指称量应准确至所取重量的千分之一。

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如：取阿司匹林约0.4g，精密称定。

取用量不得超过0.4g±10%*0.4 即 0.44g-0.36g → 0.42g → 精密称定 → 0.4g * 1/1000 = 0.0004g → 0.4212g 热水： 系指70℃—80℃ 冷库：〈8℃ 阴凉库：〈20℃ 室温：25℃

2、品名目次

按笔形排列，即目录 3、正文 如青霉素G

结构式： 类别：

分子量和分子式：

来源： → 合成或天然 性状： → 如白色粉末 鉴别：

纯度检查： → 杂质限量控制 含量测定： 类别： 剂量： 规格： 贮藏： 制剂：

4、附录：

在正文中用到的通用试剂、通用方法：

1、通用试剂的配法，如酸性氯化亚锡

2、通用物理常数测定法： 如熔点、折光率、电导度等 3、通用试验法：如分光光度法、电位滴定法、永停滴定法等

5、索引

中国药典列有汉语拼音索引和英文名称索引，其按字母顺序排列，检索药典正文品种。 6、国外药典

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USP. 美国药典 BP. 英国药典 JP. 日本药局方

第三节 药品质量标准的制订

制订原则：保证用药安全有效，同时利于促进生产 →

标准太低，难以保证用药安全，药品标准太高，不利于药品生产 一般情况下：

注射药〉口服药〉外用药

国家标准由卫生部药典委员会组织制订和修订

除法定标准外，药品生产企业也可以制订内部质量标准，用于控制药品质量。

企业内部标准和国家标准的区别在于企业标准没有法定作用。 企业内部标准的质量指标和检测项目，通常比法定质量标准高。

第三章 药物的鉴别

第一节 常用鉴别方法

一、药物鉴别的目的和特点 1、药物鉴别的目的

鉴别定义：就是依据药物的组成、结构与性质通过化学反应、仪器分析或测定物理常数，

来判断药物的真伪。

鉴别试验仅使用于鉴别药品的真伪

对于原料药还应结合外观和物理常数进行确认 2、特点

A、 为已知物的确证试验------供试品为已知物，鉴别的目的是确证供试品的真伪 B、 鉴别试验为个别分析，非系统分析------一般只作一、二或三、四项试验 C、 通常采用不同方法鉴别，综合分析

D、 鉴别制剂，要注意辅料干扰，鉴别复方制剂，注意各成分干扰 二、化学鉴别法

定义：根据药物与化学试剂在一定条件下发生离子反应或官能团反应产生不同颜色，生

成不同沉淀，放出不同气体，呈现不同荧光，从而作出定性分析结论。

药物+化学试剂—→反应—→不同颜色

—→不同沉淀—→分析—→结论 —→不同气体

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—→不同荧光

化学鉴别法：专属性强、灵敏度高

这里对无机药物的鉴别不作叙述，只对有机药物做阐述

三、紫外-可见分光光度法 1、 基本概念

紫外区：含有芳环或共轭双键的药物有特征吸收 可见光区：含有生色团和助色团的药物有特征吸收

举例：化装品中的防晒霜中含有吸光物质。

2、 具体方法

A、 对比吸收曲线的一致性

按药品质量标准将供试品和对照品用规定溶剂分别配成一定浓度的溶液，在规定波长区内绘制吸收曲线，供试品和对照品的图谱一致。 一致：吸收曲线的峰位、峰形和相对强度一致 举例： 供试品

药品质量标准 + 规定溶剂—→溶液—→测定吸收曲线—→比较图谱 对照品

B、 对比最大吸收波长和相应吸收度的一致性 供试品

药品质量标准 + 规定溶剂—→溶液—→测定吸收曲线—→比较图谱 对照品

λmax Amax

C、 对比最大吸收和最小吸收波长的一致性 λmax λmin

D、 对比最大、最小吸收波长和相应吸收度比值的一致性 Amax/Amin

举例：说明解释

四、红外光谱法

有机药物在红外光区有特征吸收

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讲解红外吸收的原理 简单介绍电子跳跃是红外吸收的主要因数 具有专属性强 准确度高的特点 方法：

1、 供试品的红外光谱与相应的标准红外光谱直接比较，核对----中国药典有专用红外

光谱集

2、 供试品的红外光谱与对照品的红外光谱比较，核对

讨论：方法简单，但无法消除不同仪器、不同操作人员造成的差异

对照品不容易得到。

五、熔点测定法

熔点：指一种物质照药典方法测定时，

由固体熔化成液体的温度， 或熔融同时分解的温度

或在熔化时自初熔至全熔的一段温度 熔点：可鉴别药物的真伪和纯度

六、薄层色谱法 举例：

中药中使用较多、特殊杂质的检查

第二节一般鉴别试验

一、 芳香第一胺类鉴别反应

芳伯胺基 + 亚硝酸钠---→重氮盐 + 碱性B萘酚试剂 → 橙色 猩红色

RNH2+HNO2H+RN+OH+NNaOHNNOHR

二、 茚三酮反应

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OCC(OH)2CO茚三酮

三、 加碱加热后放出氨或胺的反应

ORCNH2或

O+NaOHRCONa+NH3

RNH2.HX+NaOHRNH2

酰胺、内酰胺、磺酰胺和胺类等能与酸生成盐的药物，在过量碱作用下水解，受热时放出胺或氨，有氨或胺臭，并可使红色石蕊试纸变蓝

四、 高锰酸钾褪色反应

含不饱和双键或含有侧链芳烃的药物，在酸性溶液中与高锰酸钾试液作用，可将高锰酸钾还原，使紫色消退。

五、 托烷生物碱类鉴别反应 专属性反应

山莨菪碱、东莨菪碱、阿托品等剂型药物结构中含有莨菪酸。 反应条件：发烟硝酸、醇制氢氧化钾，颜色显示深紫色

COOHCHCH2OHHNO3O2NCOOHCHCH2OHNO2KOHO2NCHCH2OHNO2NO2O六、 枸橼酸盐鉴别反应

枸橼酸+高锰酸钾 → 硫酸汞 → 白色沉淀

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NOK

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→ 溴水 → 白色沉淀

CH2COOHC(OH)COOHCH2COOHKMnO4CH2COOHCOCH2COOHHgSO4OOOSOHgOCOCH2OHgOCCH2COBr2CHBr2COCBr3

白色 白色 七、 乳酸盐鉴别反应

乳酸 + 溴 → 亚硝基铁氰化钠 → 暗绿色

CH3CH(OH)

COOHCH3CHO[Fe(CN)5NO]2-[Fe(CN)5ON=CHCHO]4-

第四章 药物检查法

第一节 概述

主要内容：主要讲授药物的一般杂质检查和特殊杂质检查，并介绍固体制剂的含量均匀度

检查法和溶出度测定法。

杂质定义：是指药物中存在的无治疗作用或影响疗效，甚至对人体健康有害的物质。 杂质分类：分为一般杂质和特殊杂质

一般杂质：指自然界中分布较广，容易引入的杂质，如酸、碱、水分，重金属等。 检查方法：一般在药典附录中。

特殊杂质：在个别药物生产，贮存过程中引入的，如阿司匹林中的水杨酸。 检查方法：一般放在药典的正文中。

杂质检查的意义：

药物中含有杂质是影响药物纯度的主要因素，杂质增多，不但可以使药物含量和活性降低，毒副作用增加，而且还可能使药物发生理化常数，外观性状的变化，因此有必要对杂质做检查。

但杂质检查要求不能太高，要求太高，会增加生产成本，同时我们讲要求也不能太低，

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太低，会影响药物的疗效，影响健康，人就不安全了。

所以杂质检查必须在有利于生产的前提下，不影响疗效，不影响健康，制订恰当的检查项目 和限度。

明确应该检查什么？量是多少？

药物中的杂质是影响药物纯度的因素，所以我们讲杂质检查，也叫纯度检查。

第二节 药物中杂质的来源和杂质限量计算

一、 药物中杂质的来源 1、生产过程中引入

A、 原料不纯

B、 有一部分原料没有反应完全

C、 反应中间产物和副产物在精制时没有除净 D、 与生产器皿接触均会不同程度地引入杂质

例：用水杨酸为原料合成阿司匹林，由于反应不完全，可能引入水杨酸杂质，或者反应中间产物，使用金属器皿，可引入铁、铜、锌等金属杂质。

2、贮存过程中引入

药物在贮存过程中受温度、湿度、日光、空气、微生物等外界条件的影响，发生水解、氧化、分解、聚合、并异构化、发霉等变化，产生杂质。 例：阿司匹林水解产生水杨酸

维生素C见光 → 氧化 → 颜色变黄

麻醉用乙醚 → 日光 → 氧化 → 有毒的过氧化物

四环素 → 酸性条件下 → 发生差向异构化，毒性增高，如梅花K胶囊事件

微生物污染 → 发霉 → 引起内毒素，如输液反应？上海某厂生产的输液，细菌无处

不在。

二、杂质限量

药物中只要不对人体有害，不会影响疗效和药物的稳定性，允许有一定量的杂质存在。 一般我们不测定其准确含量（到底有多少量）

我们只测定其最大允许量（有没有超过最大允许量）→所以杂质检查，我们也称为限度检查。 杂质限量

定义：是指药物中所含杂质的最大允许量，通常用大于、小于或等于百分之几或百万分之

几表示，% PPM

操作：取一定量待检杂质的纯品或对照品（中国生物制品检定所提供）配成标准溶液，同

时取一定量供试品配成供试品溶液，经同样处理后，比较结果。 注意：同样处理是指加同样的溶剂，同样量的溶剂稀释到同一容量等。

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供试品

同样处理后

标准品（纯品或对照品）

杂质限量计算：

杂质限量 % = 允许杂质存在的最大限量/供试品的量100% 杂质限量 % = 允许杂质存在的最大限量/供试品量106 供试品中杂质限量=标准溶液体积标准溶液浓度

杂质限量用L表示；体积用V表示；浓度用C表示； 则公式为：

沉淀 颜色 斑点 . . . 等等

比浊法 比色法 大小比较颜色深浅比较

V.C100% MsV.C或L%106

MsL%（1）药品中杂质限量的计算 L

举例 1：检查对乙酰氨基酚中的氯化物，取对乙酰氨基酚2.0g，加水100ml，加热溶解，冷却，滤过，取滤液25ml，依法检查氯化物，所产生的浑浊与标准氯化钠溶液5.0ml（每1ml相当于10ug的Cl-）制成的对照液比较，不得更浓，问氯化物的限量？

V.C5.0ml10ug/ml106L%100%100%0.01%

Ms2.0g/100ml2.5ml（2）标准溶液体积的计算 V

举例2：检查葡萄糖中的重金属，取葡萄糖4.0g，加水23ml溶解，加醋酸盐缓冲液（PH3.5）2ml，依法检查重金属，含重金属不得超过百万分之无，问应取标准铅溶液（每1ml含铅10ug）多少毫升？

L.S51064.0gV2ml

C10106g/ml（3）供试品克数的计算 S

举例3：中国药典规定检查砷盐时，应取标准砷溶液2.0ml（每1ml相当于1ug的AS）制备的标准砷斑，今依法检查溴化钠中的砷盐，规定含砷量不得超过0.0004%，问应取供试品多少克？

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C.V1106g/ml2.0mlS0.5g

L4106（4）标准溶液浓度的计算 C

举例4：精密称取三氧化二砷0.1320g，置1000ml容量瓶中，加NaOH溶液（1→5）5ml，溶解，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液，临用前，精密量取贮备液10.00ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，即配成标准砷溶液，求砷贮备液的浓度和标准砷溶液的浓度（ug/ml）？ 讲解：NaOH溶液（1→5）：NaOH1.0g加水使成5ml的溶液。 乙醇-水（1：5）：乙醇和水混合，以1：5体积比混合。

0.1320106ug砷贮备液浓度=

2AsAs2O31000ml100ug/ml

标准砷溶液的浓度=

10ml100ug/ml1ug/ml

1000ml

要求：复杂计算

举例：今取溴化钠0.5g，检查砷盐，与标准砷溶液2.0ml制备的标准砷斑比较，不得超过规定限量（0.0004%）。

CL.S0.5g0.0004%1ug/ml V2.0ml（5）特殊杂质限量计算

举例5：取磷酸可待因0.10g，按中国药典（1995）检查吗啡限量的比色法配成供试品溶液，用无水吗啡2mg，加盐酸（9→100）配成100ml标准溶液，取此标准溶液5.0ml，按同一方法制成对照液检查结果，供试品溶液与对照品溶液比较，不得更深，求磷酸可待因中吗啡的限量是多少？

2mg5.0mlC.V100mlL100%0.10%

S0.10103mg

第三节 一般杂质的检查

定义：一般杂质是指在自然界中分布比较广泛，在多种药物的生产或贮存过程中容易引入

的杂质。

检查方法：一般在药典的附录中加以规定。

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一般杂质的检查项目有：PH值，溶液的澄清毒，颜色、氯化物、硫酸盐、重金属等……

本章主要掌握各杂质检查的方法、原理、反应条件及试验注意点等！！！

一、氯化物检查法 1、检查意义

氯化物极易引入，虽然微量氯化物对人体无害，但检查氯化物含量，可以考察药品的纯杂程度，也就是说，控制氯化物的量，可以提高或保证药品的纯度，因此，我们认为氯化物是一种“指示性杂质”。 2、检查原理和反应条件

原理：Cl-+Ag+硝酸AgCl白色沉淀 方法：

供试品标准氯化钠溶液+硝酸AgNO3氯化银沉淀

黑色背景下，垂直向下观察，比浊

讲解：纳氏管（介绍）

加硝酸作用：

为什么加硝酸，不加盐酸、硫酸或其他酸？

1、 可消除SO32-、CO32-、PO43-、C2O42-、BO2- 等杂质离子的干扰； 2、 可加速氯化银沉淀的生成；

3、 可改善氯化银浑浊的均一性，提高检查准确毒。

在50ml溶液中以含硝酸10ml为宜，过多会增大氯化银的溶解度而降低反应灵敏度。 试验注意点：

1、 为了控制氯化银见光分解，应在暗处放置5min； 2、 如供试品是碱性，应先中和为中性，再作检查； 3、 如供试品中含I-、Br-，应先除去I-、Br-；

I-Cl-++Ag+Ag+AgIAgCl

碘化银沉淀不溶于稀氨水，而氯化银沉淀可溶于稀氨水，然后可用碱恢复，再按常规检查氯化物；

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Br-离子则可加入H2O2，氧化成Br2，然后蒸除。 4、 如供试品中有KMnO4，加乙醇脱色后检查； 5、 供试品如有颜色，则采用内消色法

+Ag+供试品Cl-分两份过滤滤液加入标准氯化钠溶液Ag+比浊

如糖浆、中药制剂等

二、硫酸盐检查法 1、检查原理

SO42-+Ba2+酸性BaSO4 白色浑浊

试剂：BaCl2

标准溶液：K2SO4溶液 酸：HCl，盐酸

检查中所产生的浑浊程度与硫酸盐杂质的含量，硫酸钡微粒大小有关，所以应严格控制试验条件：

1、酸度：规定50ml溶液中加入稀盐酸2ml，PH 1 2、BaCl2浓度：25%BaCl2试液，产生的浑浊度较稳定

3、标准K2SO4溶液用量：以1.0~5.0ml为宜，供试品取用量应相匹配 4、加入BaCl2试液后，应立即摇匀； 5、黑色背景下，从上而下观察。

三、硫化物检查法 1、检查原理

供试品中的硫化物与稀盐酸在80~90℃作用10min，生成硫化氢气体，与醋酸铅试纸作用生成黑色的硫化铅斑点，称为硫斑。 与标准硫化钠溶液比较，Na2S

S2+H2S

++2H+Pb2+H2SPbS+2H+ 14

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2、仪器装置

D旋塞、E盖子之间有醋酸铅试纸 颈长：18CM 3、试剂配制

醋酸铅试纸制备：

取醋酸铅10g → 加新煮沸过的冷水溶解→ 加醋酸溶解→ 加新沸冷水至100ml → 滤纸条浸湿后取出 → 100℃干燥，即得

新煮沸冷水：为了防止水中少量的CO2、S等。

标准硫化钠溶液制备：

Na2S 1g → 加水200ml → 测定后 → 稀释每1ml含硫5ug的标准溶液 为什么要测定后稀释：因硫化钠易潮解，→ 所以要测定其实际含量

4、检查操作

供试品1ml放入A瓶中标准氯化钠溶液2-

→ 加水10ml、稀盐酸10ml → 迅速装好导气管C

→ 80~90℃水浴10min → 比较硫斑颜色

注意：试验前导气管应事先装好醋酸铅试纸。

四、硒盐检查法 1、检查原理

有机药物 → 有机破坏 → 硝酸溶液吸收 → 盐酸羟胺还原 （氧瓶燃烧）

SeO3+H2OH2SeO4H2SeO3H2SeO4

+2NH2OH+N2+3H2O 15

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H2SeO3Na2SeO3标准亚硒 酸钠PH2±0.2二氨基萘反 应10min4.5-苯并 苯硒 二唑环 己烷 提 取紫外扫描波 长378nm测 定 吸 收度A

比较A供〈 A标

试验注意点：

1、 有机破坏完全，否则影响试验结果 2、 显色剂二氨基萘易氧化，以新配制为宜 3、 PH严格控制在2±0.2以内 4、 反应时间应为100min

5、 提取溶剂环己烷量必须一致

五、氰化物检查法

氰化物有剧毒，所以甲丙氨酯、苯妥英钠等药物应检查氰化物限量 检查方法有二种：

第一方法：改进普鲁士蓝法

仪器装置如硫化物检查装置，不同之处在于将醋酸铅试纸改为碱性硫酸亚铁试纸

检查原理：

CN-+H+HCN 酸为弱酸：酒石酸

Fe2++6HCN+6OH-[Fe（CN）6]4-+6H2O 亚铁氰根 取下试纸，加FeCl3+HCl，5min内不显绿色或蓝色

3[Fe（CN）6]4-+4Fe3+H+Fe4[Fe(CN)6]3

普鲁士蓝 如：供试品中CN- 〉5ug，就会出现绿色或蓝色。

试验注意点：

1、 反应条件应为弱酸性，一般用酒石酸 2、 小火加热微沸1min，保证HCN向上挥发

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3、 供试品如能分解产生CN-，则不能使用此法，如硝普钠

第二法：气体扩散—三硝基苯酚锂法 仪器装置如P39 4-3 检查原理：

CN-+6H2OHCN+OH- H反应在室温下暗处放置过夜

OLiO2NNO2OONNCNO2NO2+Li+ONH+2HCN+CO32-O+CNHCO3-+OH-

异红紫酸锂，在500nm波长处有最大吸收 与标准KCN溶液比较 试验注意点；

1、 溶液PH值应为2.45~8.40 → 不影响HCN的生成和扩散 2、 溶液体积应为5ml

3、 反应温度应为25℃，反应时间应为15小时

4、 三硝基苯酚锂试液应为1ml，反应完全后，加水2ml稀释 5、 做空白试验

六、铁盐检查法 1、检查原理

采用硫氰酸盐检查铁盐

Fe3++nSCN-酸性[Fe(SCN)n]+3-nn=1～6 红色可溶性硫氰酸铁配位化合物 标准铁盐溶液：硫酸铁铵 FeNH4（SO4）2.12H2O

2、反应条件 （1）、用稀盐酸调节酸性

在中性或碱性溶液中，三价铁离子易发生水解

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Fe3+++H2O水解[Fe（H2O）5OH]2++H+ 棕色水合羟基铁离子 或

Fe3+3H2O水解Fe（OH）3+3H+ 红棕色氢氧化铁沉淀 所以要调节酸性

一般：50ml溶液中加稀盐酸4ml为宜

注意：调节酸性可以使用其他酸，但不能使用氧化性酸，如HNO3，如果必须使用，则在使用后将硝酸除净。 原因：

1、因为硝酸可以破坏显色剂SCN-

13NO3-+SCN-3SCN-+H+10H+3SO42-+ 3CO2+16NO+5H2O 2、亚硝酸与SCN-生成红色的亚硝酰硫氰化物（NOSCN），对结果测定有影响

HNO2+++NO.SCN+H2O（2）、加过量显色剂

Fe3+nSCN-酸性[Fe(SCN)n]+3-nn=1～6 此络合反应为可逆反应

加入过量显色剂，有利于反应完全，并且能消除Cl-干扰 一般：50ml溶液中加3ml（1→100）显色剂 （3）、加氧化剂，过硫酸铵 （NH4）2S2O8 作用：1、氧化Fe2+ → Fe3+

2、防止光线使硫氰酸铁还原或分解

2Fe2++(NH4)2S2O8H+2Fe3++(NH4)2SO4+SO42- （4）、Fe3+含10~50ug含量为宜 太深、太浅都不能用肉眼观察比较 （5）提取比色

供试管、标准管色调不同时，可采用提取比色，用正丁醇或异戊醇提取络合物，比色。

如：检查枸橼酸钠中铁盐，为避免枸橼酸钠的干扰，加盐酸3ml使酸度提高，但酸度增加使硫氰酸铁所呈颜色变浅，故用正丁醇提取后比色，而枸橼酸钠则留在水层中不影响。

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七、砷盐检查法

中国药典中砷检查法有二种

第一种：古蔡氏法（药典中均用此法），第二种：二乙基二硫代氨基甲酸银法（附录中收载，但不使用）

二种方法所采用的还原剂一样，反应时间、反应温度（25~40℃），45min都一样 区别在于显色剂使用不一样，结果比较方法也就不同。 一、古蔡氏法 1、仪器装置

仪器如硫化物检查法装置

不同点：1、用溴化汞试纸代替醋酸铅试纸

2、导气管中加塞醋酸铅棉花（高度60~80mm）

2、检查原理

金属Zn与酸作用生成新生态的氢，与药物中的微量砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢

AsO33-+++3Zn+9H+AsH3+3Zn2++ 3H2O AsH3遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑

AsH32HgBr22HBr++AsH（HgBr）2 黄色砷斑

AsH33HgBr23HBrAs（HgBr）3 棕色砷斑

5价砷也能被金属Zn还原为砷化氢，但生成AsH3的速度较3价砷慢，所以，在反应液中加入碘化钾、酸性氯化亚锡来还原五价砷为三价砷。

AsO43-AsO43-++2I-Sn2+++2H+2H+AsO33-AsO33-++I2Sn4+++H2OH2O 生成I2被氧化：

I24I-++Sn2+Zn2+2I-ZnI42-+Sn4+

在形成络合物的同时，消耗Zn2+，有利于AsH3反应不断进行 总结：

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加KI的作用

1、 还原五价砷为三价砷

2、 和Zn2+络合，有利于AsH3的生成 3、 抑制锑化氢生成 加酸性SnCl2的作用 1、 还原五价砷为三价砷

2、 与Zn生成锌锡齐，从而使氢气均匀连续发生 3、 抑制锑化氢生成

锑化氢可以和溴化汞试纸作用生成锑斑，影响试验结果。

SbH3+HgBr2SbH2（HgBr）?+HBr

在试验条件下，由于加了KI、SnCl2，供试品中有100ug的锑存在也不会干扰测定结果

醋酸铅棉花的作用：

如果供试品中含有少量硫化物，则会产生H2S气体，干扰试验结果

S2-H2S+++2H+HgBr2H2SHgS+PbS2HBr 所以，加入醋酸铅棉花来吸收硫化氢气体

H2SPb（Ac）2+2HAc 醋酸铅棉花用量多或塞得过紧会影响AsH3的通过，用的少或塞得松，则不能完全吸收H2S气体；

中国药典规定：醋酸铅棉花用量60mg重量，高度大约60~80mm，来控制松紧度，这样即使供试品中有1000ug S2-存在也不干扰测定结果。

3、反应条件

反应液酸度、酸性氯化亚锡试液用量，锌粒大小与用量、反应温度都会影响氢气发生速度，从而影响砷化氢气体的产生 （1）、反应酸度：相当于盐酸液2mol/l （2）、KI浓度：2.5%；SnCl2浓度：0.3% （3）Zn粒大小：60目，用量2g （4）反应温度：25~40℃水浴 （5）反应时间：1小时

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药物分析教案

4、试验中注意点：

（1）溴化汞试纸与砷化氢作用灵敏，但形成的砷斑不稳定，所以在反应中应保持干燥和避光，试验结束后立即与标准砷斑比较，否则时间长，砷斑会褪色。

（2）如供试品为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等，则在酸性溶液中容易生成H2S或SO2气体，可与HgBr2作用生成HgS或金属Hg，干扰检查，应在检查前加入HNO3处理，氧化成硫酸盐，再做检查。

S2-SO32-S2O32-HNO3SO42-

（3）如供试品为含锑药物，如葡萄糖酸锑钠，则不能采用此方法，而改用白田道夫法 白田道夫法：

2As3++3SnCl2+6HCl2As+3SnCl4+6H+

二、二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法） 1、检查原理

砷化氢生成的原理同古蔡氏法，

AsH3+6Ag(DDC)3NAsAg3.3Ag(DDC)As(DDC)3+3HDDC6Ag+3N.HDDC

AsAg3.3Ag(DDC)++由于吡啶有恶臭，因此中国药典改用1.8%三乙胺的氯仿溶液 2、仪器装置 P50 图4-7

采用平底玻璃管5.0ml溶液接受砷化氢气体

将AsH3气体导入盛有Ag（DDC）溶液5.0ml的D管内 反应时间：45min 反应温度：25~40℃水浴

试验结束后，添加氯仿至5.0ml，在白色背景下，从上而下观察比色

本法用于硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐以及含锑药物，都不产生干扰，但灵敏度较低。

八、重金属检查法

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重金属系指在实验条件下能与显色剂作用显色的金属杂质 常用的显色剂：H2S（有恶臭，现已不用）、硫代乙酰胺（CH3CSNH2）、硫化钠（Na2S） 金属杂质：银、铅、汞、铜、镉、铋、砷、锑、锡、锌、钴、镍等

由于在药品生产过程中遇到铅的机会较多，同时铅在体内又易积蓄中毒，故检查重金属时以铅为代表检查。

（一）、硫代乙酰胺法 1、检查原理

CH3CSNH2+H2OPH=3.5CH3CONH2+H2S H2S+Pb2+PbS+2H+ 2、操作 纳氏管2支 供试品溶液PH3.5醋酸缓冲液标准铅 溶液硫代乙酰胺白纸上，自上而下透视

溶液PH值对于金属离子与H2S呈色影响较大 在PH3~3.5，硫化铅（PbS）沉淀较完全

酸度增大，硫化铅沉淀颜色变浅，甚至不显色，因此，供试品如用强酸处理过，应在加硫代乙酰胺前用氨水调PH值。

3、实验注意点

（1）供试品如有颜色，可采用A、外消色法（加稀焦糖溶液或无干扰的有色溶液）调颜色一致。B、内消色法

一份供试品分两份一份PH3.5醋酸缓冲液过滤滤液加入标准铅溶液硫代乙酰胺硫代乙酰胺比浊

（2）、供试品中若有微量高铁盐（Fe3+），在弱酸性溶液中氧化H2S而析出S，产生浑浊，影响比色。

3H2S+2Fe3+Vit CS+2FeS+6H+ 所以，应在检查前先加入抗坏血酸（Vit C）或盐酸羟胺，还原高铁离子。

Fe3+ Fe2+ 22

药物分析教案

（3）多数药物在酸性条件下检查重金属，一些溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中产生沉淀的药物，如磺胺类，巴比妥类药物，均在碱性溶液中溶解，因此检查重金属，显色剂不能用硫代乙酰胺，而改用硫化钠：Na2S

（4）供试品如为铁盐，如枸橼酸铁铵，则应将铁离子先除去，再检查。

Fe3++HCl比重1.103-1.105HFeCl62-用乙醚提取

水层加氨试液呈碱性加KCN去除微量Fe3+Na2S检查 （5）含芳环或杂环的有机药物，如甲硝唑，应先行炽灼破坏，使与有机分子结合的重金属流离，再检查。

炽灼温度一般控制在500~600℃

温度过高，重金属损失，如铅在700℃经6小时炽灼，损失68%。

炽灼残渣加硝酸加热处理，使有机物进一步破坏完全，但必须蒸干除尽氧化氮，否则亚硝酸可氧化硫化氢为硫，影响比色，然后再加盐酸，成铅离子后，再作检查。

（二）、微孔滤膜法

-6

当供试品中重金属量低于2-5×10时，用目视比色法观察较困难，改用微孔滤膜法，使重金属硫化物富集于滤膜上，提高检查灵敏度。 1、仪器 P43 图 4-5 2、操作

供试品溶液稀释10ml标准铅 溶液PH3.5醋酸缓冲液2ml硫代乙酰胺1.0ml放置10分钟50ml注射器压滤取下滤膜、干燥、比较

如果供试品溶液浑浊，应先预滤，然后再用微孔滤膜法检查。

九、氧瓶燃烧法

有些有机药物中含卤素、硫、硒等元素，它们以共价键形式与碳原子结合，不能检出，需经有机破坏后才能检出。

有机破坏有许多种，氧瓶燃烧是其中一种。 氧瓶燃烧法定义：

氧瓶燃烧法是将有机药物在充满氧气的燃烧瓶中进行燃烧。

有机药物→ 燃烧→ 用规定的吸收液吸收 → 分析检查

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1、仪器装置

燃烧瓶有500ml、1000ml、2000ml规格的硬质锥形瓶 瓶塞上有一根铂丝（直径1mm），成网状或螺旋状 铂丝作用：A、本身性质较稳定，不易燃烧

B、具有催化作用

2、操作

固体供试品包裹法：

50

7

30

固体 30

液体供试品包裹法：

液体

20 13

16×6 6 25

6×35

实验操作前：用少量水封闭瓶口

实验操作时：按紧瓶塞，以免气体逸出

实验操作后：充分振摇，完全吸收，注意瓶口洗涤

实验中燃烧不完全的原因： 1、 通氧气不足 2、 供试品受潮

3、 供试品包得过紧或过松

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药物分析教案

4、 燃烧瓶不严密，有氧气逸出

十、酸碱度检查法 药典中规定：

用碱液进行滴定或规定的PH值低于7.0，称为“酸度” 用酸液进行滴定或规定的PH值大于7.0，称为“碱度”

用酸或碱液分别滴定者或规定的PH值跨越7.0上下两侧的称为“酸碱度”

检查时，一般以新煮沸放冷的蒸馏水（除去CO2，有弱酸性）为溶剂，不溶于水的药物，用中性乙醇等有机溶剂溶解。

常用的检查方法： （一）、酸碱滴定法

在一定指示液条件下，用酸或碱滴定液滴定供试品溶液中碱性或酸性杂质，以消耗一定体积的酸或碱滴定液来控制药物中所含酸性或碱性杂质的杂质的限量

供试液（一定体积）加入指示剂用酸或碱滴定液滴定 如：检查氯化钠中的酸碱度

取供试品5g，加新沸冷水50ml溶解，加溴麝香草酚蓝指示液（PH6.0~7.6，黄~蓝）2滴， 如显黄色（示为酸性），加NaOH（0.02mol/l）0.1ml应变蓝色，即5g NaCl中酸性杂质应为0.002mmol NaOH 中和，也即在100g NaCl 中允许的酸性杂质限量应为0.04mmol。 如显蓝色或绿色（示为碱性），加盐酸（0.02mol/l）0.2ml 应变为黄色，同理，在100g NaCl 中允许碱性杂质限量为0.08mmol。 （二）、指示剂法

在一定量的供试品中加入规定的指示液，根据指示液的颜色变化来控制酸碱性杂质的限量。 如：

检查蒸馏水中的酸碱度

取蒸馏水10ml，加甲基红指示液2滴，不得显红色；

另取蒸馏水10ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。 甲基红 PH 4.2~6.3 红→ 黄

溴麝香草酚蓝 PH 6.0~7.6 黄→ 蓝 ——→蒸馏水的PH 4.2~7.6 （三）、PH值测定法

用电位法测定药物供试液中所含酸、碱杂质的氢离子浓度，较其他二种方法准确，直观。 准确：用PH计直接测定 直观：数字直接显示

十一、溶液澄清度检查

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药物中有不溶性杂质，影响药物的溶液澄清度，所以应作澄清度检查。

检查原理：

供试品溶液与标准浊液比较

标准浊液制备：

乌洛托品+肼

(CH2)6N4HCHO+NH2-NH2络合物白色

乌洛托品结构：

NNNN能在水中分解产生甲醛，甲醛和肼反应产生白色沉淀

1.0%硫酸肼水溶液 + 10.0%乌洛托品水溶液（等量混合）→ 24小时避光放置，白色混悬液→ 作标准贮备液 → 取标准贮备液15.0ml → 稀释1000ml → 成浊度标准原液 → 按表中数据配制标准浊液（分级）。 共分5个级别：

级别号：0.5、1、2、3、4

供试品溶液配制后和标准级别的浊液比较，决定供试品溶液的澄清度。 检查时：

供试品溶液标准 浊液比浊用玻璃管中，40mm高度 → 黑色背景，从上而下观察比较，或垂

直伞棚灯，照度1000Lx，水平方向比较。

药典中规定：

澄清：供试品溶液的澄清度相当于所用溶剂，或未超过0.5号浊度标准液。

检查：

如葡萄糖中检查糠醛（不溶性）

十二、溶液颜色检查法

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药物分析教案

有些药物在制备过程中有色杂质未除净，或在贮存过程中新生成有色杂质，都会使溶液呈现颜色。 （一）、比色法 标准色液：

重铬酸钾溶液（橙色） 硫酸铜溶液（蓝色） 氯化钴溶液（红色）

配成黄绿、黄、橙黄、橙红、棕红五种贮备液颜色 分别调和成10种颜色 检查时：

供试品溶液与标准颜色的溶液比较 （二）、紫外分光光度法

通过吸收度控制有色杂质的限量 如：

Vit C 50mg/ml 测定440nm、420nm波长处的吸收度，规定A分别小于0.07和0.06。

十三、干燥失重测定法

定义：指药物在规定条件下，经干燥后，所减少的重量，主要指水分，也包括其他挥发性物质如乙醇等。

常用测定方法（根据干燥方法不同分为） （一）、常压恒温干燥法

称量瓶 → 烘箱内，规定温度干燥 → 从减失的重量计算干燥失重 要求：

1、 适用于受热较稳定的药物

2、 干燥温度一般为105℃，除规定外 3、 干燥时间一般2~4小时，除规定外

4、 供试品厚度不超过5mm，疏松物质厚度不超过10mm →为使水分及挥发性物质易于挥

散。

5、 供试品为大颗粒结晶，必须研细至粒度2mm。 （二）、减压干燥法

在减压条件下，可降低干燥温度和缩短干燥时间，故适用于熔点低，受热不稳定及难赶除水分的药物，如肾上腺素 （三）干燥剂干燥法

适用于不论常压或减压条件下加热烘干均容易分解、升华、挥发的药物。 常用干燥剂：五氧化二磷、硫酸、硅胶

P2O5：吸水效力、吸水容量、吸水速度均较好，但价格较贵，并且不能反复使用。

H2SO4：吸水效力、吸水速度次于五氧化二磷，但吸水容量较五氧化二磷好，用后加热除水

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分后可重复使用。

硅胶：吸水效力、吸水速度均次于五氧化二磷、硫酸，但使用方便，价廉，可反复使用。 变色硅胶：加Co2+，变色 1g 硅胶吸水20mg后就开始变色→ 150℃干燥

十四、易炭化物检查 检查药物中的有机杂质

有机物遇浓硫酸 → 发生炭化或氧化 → 呈色 → 比色法检查 与标准比色液比较：

标准比色液（氯化钴溶液、重铬酸钾溶液、硫酸铜溶液）不同比例配制

例：检查阿司匹林中的易炭化物 取比色管两支

甲：5ml（氯化钴0.25ml、重铬酸钾0.25ml、硫酸铜0.4ml、水4.1ml） 乙：硫酸5ml，加入阿司匹林0.5g

甲溶液乙 溶液15 min后白色 背景 乙 管不得比甲管深侧面 透视

十五、炽灼残渣检查法 主要检查无机杂质

炽灼残渣：取一定量供试品经缓缓炽灼至完全炭化 → 放冷，加H2SO4 0.5~1ml → 除

硫酸后 → 高温700~800℃完全炭化 → 残留不挥发性硫酸盐即为炽灼残渣 → 称重确定限量

加硫酸目的：使有机物完全炭化或灰化

如要作重金属检查：炽灼温度在500~600℃

第四节 特殊杂质的检查

（略）

第五节 含量均匀度检查法和溶出度测定法

固体制剂检查要求 （一）、含量均匀度检查法 1、检查目的： 含量均匀度定义：

含量均匀度系指小剂量片剂、膜剂、胶囊剂或注射用灭菌粉末等制剂中的每片（个）含量偏离标示量的程度。

检查目的：保证用药安全和有效 2、检查原则：

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药物分析教案

符合下述原则的固体制剂应检查含量均匀度： （1）、单剂含量小的品种 （2）、单剂中主药含量少，辅料多的品种 （3）、急救、毒剧药物或安全范围小的品种 （4）剂型以口服固体制剂为主 3、检查

初试：取10片（个）→ 测定每片含量 → 计算相对标示量百分含量（X %）→ 计算平均值（X）

计算偏离量：A100X

计算标准差：S(XX)n12

判断：以含量差异限度为±15%举例

（1）如果 A1.80S15.0 供试品含量均匀度符合规定 （2）如果AS15.0 供试品含量均匀度不符合规定

（3）如果A1.80S15.0 同时 AS15.0 则必须复试（另取20片复试） 复试结果：

计算30片偏离量：A100X

计算30片标准差：S(XX)n12 n=30

（1）如果A1.45S15.0 供试品含量均匀度符合规定 （2）如果A1.45S15.0 供试品含量均匀度不符合规定

如果差异限度为±10%或±20%

则15.0改为10.0或20.0 就可以了

（二）、溶出度测定法 1、测定目的 溶出度定义：

溶出度系指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。 药物只有溶出后，才被机体吸收

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检测目的：控制固体制剂质量 2、收载原则

（1）非易溶药物或治疗量与中毒量接近的口服固体制剂 （2）控制药物缓慢释放的制剂品种

（3）因制剂工艺造成溶出差异，临床疗效不稳定的口服制剂

测定溶剂以水、缓冲液、稀酸、稀碱为主

3、测定方法 （1）、第一法----转蓝法 杯 1000ml 仪器 P81 b

测定法：除另有规定外

一般：溶剂900ml，加温37±0.5℃（体温） 取片剂6片

→ 45min后，取样点取样（液面下10mm） →0.8um滤膜滤过（30S内完成） 计算溶出量：

溶出量，% = 溶出质量/标示量×100% （2）桨法

同转蓝法 杯 1000ml

胶囊上浮，用耐腐蚀金属轻绕外壳 （3）小杯法

杯容量 100~250ml 4、结果判断

（1）6片溶出量均不低于规定限度（Q），除另规定，Q=为标示量70% → 合格 （2）1~2片低于Q，但不低于Q-10%，并且平均溶出量不低于规定限度Q → 合格 （3）1片低于Q-10%，另取6片复试

复试结果，12片中1~2片低于Q-10%，且平均溶出量不低于规定限度 → 结果合格

举例：书中例子

第五章 芳酸类药物的分析

第一节 概述

一、芳酸类药物分类

（1）水杨酸及其衍生物 阿司匹林为代表

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药物分析教案

（2）苯甲酸及其衍生物 丙磺舒为代表 （3）布洛芬类 布洛芬为代表 （4）其他类 萘普生 二、含量测定

1、直接酸碱滴定法

含有流离羧基的药物 如：水杨酸、苯甲酸、阿司匹林、丙磺舒等

2、用非水酸碱滴定或双相滴定法 如芳酸盐类，水杨酸钠、苯甲酸钠盐 3、水解后剩余滴定法 加入碱液使酯键水解，用酸回滴剩余碱 如 芳酸酯类，阿司匹林等 4、亚硝酸钠滴定法（重氮化）

含有氨基的芳酸衍生物，如对氨基水杨酸钠

5、紫外分光光度法、高效液相色谱法（HPLC）

第二节 水杨酸类药物分析

药物：水杨酸及其钠盐， 阿司匹林、对氨基水杨酸钠 1、鉴别 （1）显色法

水杨酸水溶液 + FeCl3 → 紫堇色 水杨酸钠 → 酸化后呈同样颜色反应

COOHOH3COO-+中性FeCl3OH3Fe31+3HCl

红色 三水杨酸络铁酸

COO-COOHOH6O+4FeCl3弱酸性FeFe23+12HCl

紫堇色 二水杨酸络铁酸铁

阿司匹林加水煮沸水解后呈色

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COOHOCOCH3COOH+H2OOHFeCl3呈色

（2）红外光谱法

水杨酸红外光谱 P88 （3）熔点测定法

水杨酸熔点 mp 158~161℃ 2、检查

水杨酸中检查苯酚，还有一般杂质，如重金属等

阿司匹林中检查，一般杂质、重金属、溶液澄清度等 特殊杂质：水杨酸、乙酰水杨酸酐（ASAN）、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA）

这些都为过敏杂质，可引起寻麻疹，支气管哮喘等过敏反应

OCOCH3COOCOCH3OCOCOOHOCOOCOCH3

ASAN ASSA

COOHOCOOH

SSA

（1）苯酚检查 限量0.10%

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药物分析教案

OHO0.1g供试品K3[Fe(CN)6]铁氰化钾4-氨基氨替比林标准苯酚溶液0.1mgOH3CNH3CNONO氯仿提取，比色有色化合物（2）阿司匹林检查水杨酸 A、原料带来 B、水解产生

限量  0.1%

COOHOH0.1g供试品硫酸铁铵显色比色

标准水杨酸溶液0.1mg（3）阿司匹林片剂作溶出度检查

P92 转蓝法 30min Q=80% 3、含量测定

（1）直接酸碱滴定

COOHOH+NaOHCOONaOH+H2OCOOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O

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溶剂：中性乙醇 指示剂：酚酞指示剂

滴定液：0.1mol/ml NaOH滴定液

计算公式： 阿司匹林 %T.F.V100% MsT----滴定度，每1ml滴定液相当于多少克数 每1ml NaOH 滴定液相当于阿司匹林18.02mg

1ml0.1mol/ml180.16g/mol18.016mg18.02mg

V---滴定液体积数 Ms---供试品克数 F----浓度校正因子 如：

P91 例子5-1 F0.1008mol/l1.008

0.1mol/l0.1015mol/l1.015

0.1mol/l

阿司匹林百分含量=99.71%

（2）非水滴定（碱量法） 适用于原料药

非水环境下滴定（一般滴定为水溶液） 溶剂：如冰醋酸 指示剂：结晶紫

滴定液：0.1mol/l 高氯酸滴定液

（3）双相滴定法

水杨酸钠一方面碱性较弱，在水中直接用酸滴定，反应不完全，另一方面，中和产物水杨酸微溶于水，滴定过程中易析出沉淀产生浑浊，干扰测定。 因此采用双相滴定法。 双相滴定法定义：

在水和不溶于水的有机溶剂两相中进行酸碱滴定法，叫双相滴定法或两相滴定法。 一般适用于芳酸类水溶性盐的含量测定。

如：水杨酸钠片中加乙醚用0.1mol/l HCl滴定 指示剂：甲基橙

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药物分析教案

终点：出现红色

HCl 乙醚

水层

（4）两步滴定法

阿司匹林片剂在制备过程中加入枸橼酸或酒石酸作稳定剂，另外在贮存过程中水解产生水杨酸和醋酸。

由于这些杂酸的存在，直接用标准碱液滴定会消耗部分滴定液体积，使测定结果偏高。 第一步：中和

供试品（10片 M总→Ms） → 中性乙醇溶解 → 酚酞指示剂 → NaOH 滴定液滴定 → 中性（酚酞粉红色 15S）

酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒+NaOH酒

COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3

第二步 水解

上述供试品 → 加一定体积过量NaOH （0.1mol/L） → 水浴加热15min → 放冷，用硫酸滴定液（0.05mol/L）回滴多余NaOH

空白试验：加热时NaOH 易吸收空气中CO2，降低浓度影响结果，应在同样条件下做空白试验。

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COONaOCOCH3+NaOH酒酒酒酒COONaOH+CH3COONa2NaOH酒酒酒酒+H2SO4Na2SO4+2H2O

设：空白试验消耗硫酸液 V空白 ml

供试品消耗硫酸液 V供试品 ml 则 每片百分含量

阿司匹林%T.F.VMs18.02mg(V空V供)Ms(g)CH2SO420.1

标示量 % = 每片实际测定含量（g）/每片标示量（g）

= 每片百分含量（%）×平均片重（g）/每片标示量（g）

18.02mg(V空V供) = 举例： P94

CH2SO420.1Ms(g)每片表示量(g)M(g)10

18.02mg(39.88ml23.84ml)阿司匹林 %0.05015mol/l23.584g0.1mol/l10

0.3484g0.3g99.41%

第三节 苯甲酸类药物分析

药物：

苯甲酸及其钠盐 丙磺舒 泛影酸 氨甲苯酸

一、苯甲酸的分析 1、鉴别

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药物分析教案

苯甲酸 + FeCl3 → 赫色沉淀（苯甲酸二羟六苯甲酸络铁） 丙磺舒 + FeCl3 → 米黄色铁盐沉淀 2、含量测定

苯甲酸 → 含流离羧基 → 直接酸碱滴定法 苯甲酸钠 → 双相滴定法 二、氨甲苯酸 结构

NH2CH2COOH

由于分子中同时氨基和羧基，因此以两性离子状态存在

[H3N+CH2COO-]

由于氨基离子酸性弱，PKa 〉9，因此不能用碱直接滴定

在滴定前必须用HCHO（甲醛）将氨基固定，使羧基流离，酸性增强，然后用碱滴定

HCHO+H3N+CH2COO-H2C=NCH2NaOHCOOHH2C=N

CH2COONa

第六章 芳胺及芳烃胺类药物分析

第一节 概述

本类药物具有芳胺或芳烃胺结构 1、酰苯胺类，如对乙酰氨基酚

2、对氨基苯甲酸酯类，如盐酸普鲁卡因 3、苯乙胺类，如盐酸去氧肾上腺素

1、鉴别 （1）、药物中含有酚羟基或水解后能产生酚羟基者，可与三氯化铁作用呈现特殊颜色反应。

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紫堇色 → 褐色

如：对乙酰氨基酚 → 蓝紫色 （2）、芳伯胺基的药物可用芳伯胺的颜色反应进行鉴别

芳伯胺 + 亚硝酸钠 → 重氮盐 → 碱性B-萘酚 → 显色（红色→ 紫红色） （3）、苯乙胺类

拟肾上腺素药物容易被氧化而呈色 因此可用碘、过氧化氢等氧化显色。 （4）紫外分光光度法、红外分光光度法 2、含量测定

（1）含有氨基呈碱性，因此可用非水滴定法测定含量， 如：利多卡因、肾上腺素

（2）含有芳伯胺基，可用永停滴定法（亚硝酸钠滴定法） （3）有些药物有紫外吸收，可用紫外分光光度法。

第二节 酰苯胺类药物的分析

主要药物：对乙酰氨基酚，贝诺酯，利多卡因，布比卡因 基本结构

R3R1R4NHCOR2

贝诺酯：对乙酰氨基酚 + 乙酰水杨酸

一、对乙酰氨基酚 1、结构

OH N-（4-羟基苯基）乙酰胺

MF C8H9NO2 151.16 2、鉴别

（1）含酚羟基

+ FeCl3 → 呈现蓝紫色

38

NHCOCH3药物分析教案

[Fe酒CHCONH3O生成络离子

酒]3-

（2） + 稀HCl 水解→ 流离芳伯胺基结构→加亚硝酸钠、盐酸→生成重氮盐→加碱性

B-萘酚→红色偶氮化合物

OHHCl酒NHCOCH3NH2OHNaNO2HClNNOH+OH.ClOHHONNNaOH

（3）紫外吸收

酸性甲醇溶液 249nm波长处，有最大吸收， E1%=880

3、检查

主要检查酸度、溶液澄清度、氯化物、硫酸盐等 （1）酸度

A、生产过程中可能引进酸性杂质 B、也可能在贮存过程中水解产生醋酸 中国药典规定：

1%水溶液， PH应控制在 5.5~6.5 （2）对氨基酚 A、原料中带入 B、水解产生

对氨基酚有毒（粒细胞障碍）、并且使产品颜色加深（对氨基酚不稳定，易变色）， 应严格控制 检查原理：

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OH+Na2[Fe(CN)5NO]NH2 蓝绿色络合物

OH-Na2[Fe(CN)5HONH2]

酒酒酒1.0g酒酒酒酒50ug酒酒酒20ml酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒1ml酒30min限量酒酒酒酒

50ug0.005% 1.0g（3）有关杂质 对氯乙酰苯胺

酒酒酒1.0g酒酒酒酒酒酒50ug/ml酒酒5ml200ul40ul酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒限量酒酒酒

50ug/ml40ul0.005%

1.0g/5ml200ul4、含量测定

紫外分光光度法 P120

取本品约40mg→0.4% NaOH 50ml溶解→ 稀释至250ml→取5ml→加0.4% NaOH 10ml → 稀释至100ml→ 257nm波长测定吸收度A。

1%

吸收系数E=715 含量 98.0~102.0% 举例：6-1

40

药物分析教案

供试品量42mg A=0.5942 计算对乙酰氨基酚百分含量？

0.5942100ml1%(g/ml)250ml7155ml100% 对乙酰氨基酚 %42mg98.93%片剂：计算相对标示量百分含量

相对标示量百分含量=百分含量×平均片重/标示量 举例：6-2

标示量 0.3g 平均片重=3.366g/10

0.583100ml1%(g/ml)250ml3.3667155mlg1044.9mg相对标示量百分含量 % 100%0.3g101.87768%101.9%5、片剂溶出度

取本品，采用转蓝法 1000ml稀酸溶剂，30min → 取5ml → 过滤 → 取滤液1ml → 加0.04% NaOH 稀释至50ml → 257nm波长测定吸收度A 限度为标示量的80% ------合格 举例：6-3

A50ml1%(g/ml)1000ml1ml100% 溶出量，%E表示量本试验结果：80.4%、81.1%、81.8%、69.2%、82.5%、83.7% 平均值：79.8%，低于规定限度80%， 并且有一片低于Q-10%（70%）为69.2% 所以，本批药品溶出度不合格。

二、利多卡因 1、结构

CH3NHCOCH2CH3

NC2H5C2H5.HCl

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2、鉴别

（1）加三硝基苯酚

利多卡因 + 三硝基苯酚 → 黄色沉淀↓ mp. 228~232℃ （2）加硫酸铜试液

利多卡因 + 硫酸铜试液 → 深蓝色络合物 络合物结构：

H3CC2H5C2H5NCH2CONH3CCH3CuNC2H5C2H5

NCOCH2CH3（3）加CoCl2或Co(NO3)2

利多卡因 + CoCl2 → 蓝绿色沉淀↓

（4）由于2个甲基空间位阻的影响，酰胺结构不易发生水解，生成芳伯胺 因此，无芳伯胺显色反应 即：加亚硝酸钠，加ß-萘酚无反应

第三节 对氨基苯甲酸酯类药物分析

药物：苯佐卡因、普鲁卡因、丁卡因 基本结构：对氨基苯甲酸酯

HNR2

一、普鲁卡因 1、结构

COOR1

H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2

42

药物分析教案

2、鉴别

（1）芳伯胺基团 → 芳伯胺反应

在酸性条件下加亚硝酸钠，生成重氮盐，再加ß-萘酚，生成有色偶氮化合物 芳伯胺 + NaNO2→重氮盐→碱性ß-萘酚→有色偶氮化合物 （2）酯键 → 加碱水解

NH2COOCH2CH2N(C2H5)2NaOHNH2HClHOCH2CH2N(C2H5)2酒酒酒酒COONa酒酒酒酒酒酒酒酒酒NH2酒酒COOH

（3）如为盐酸盐 → 氯化物鉴别反应

Cl-+Ag+AgCl酒酒

3、检查

对氨基苯甲酸 → 来源于原料或分解产物

酒酒酒2.5mg/ml酒酒酒酒酒酒酒酒酒30ug/ml10ul10ul酒酒

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展开剂 苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：4） 限度 1.2% 4、含量测定

亚硝酸钠滴定法 → 芳伯胺

NH2COOCH2CH2N(C2H5)2+NaNO2+2HCl[NN+重氮化反应历程：

COOCH2CH2N(C2H5)2].Cl-

NaNO2+HClHNO2ArNH2+HClNoCl酒ArHNO2NoClNHNO+NaCl+H2OArN+NOHN

ArN-Cl第一步为慢反应，整个反应取决于第一步 （1）加KBr，使反应速度加快

KBrH+HBrNOBr+H2O

HNO2+HBr由于NOBr生成的速度比NOCl生成的速度快300倍，所以使NO+的浓度增大，加速反应 （2）加HCl

盐酸盐较硫酸盐溶解度大，反应速度也较快，因此多采用盐酸 理论上芳伯胺和盐酸的比例为1：2，但实际使用更多 原因：

A、强酸性介质中，可加速反应 B、重氮化合物在酸性溶液中较稳定 C、防止生成偶氮氨基化合物

44

药物分析教案

ArN-Cl+N+ArNH2Ar-N=N-NH-Ar+HCl

芳伯胺成盐酸盐，此反应就不会进行了

但酸度过大，可阻碍芳伯胺基流离，影响重氮化反应， 所以，一般比例：

芳伯胺：盐酸=1：2.5~6 （3）反应温度

温度高，反应速度就快，但温度高，使亚硝酸挥发，重氮盐分解。 所以，测定一般在低温下进行，15~25℃

为了使亚硝酸不分解挥发，滴定管管尖应插入液面底下2/3处，将大部分滴定液滴入反应，然后再提取处管尖，再滴定到终点

第四节 苯乙胺类药物分析

一、鉴别

此类药物大多有酚羟基 1、加三氯化铁显色 P131 2、易被氧化剂氧化显色

常用氧化剂，碘、过氧化氢、铁氰化钾

I2HOHOCHCH2NHCH3OH酒H2O2OOCHCH2NHCH3OH

肾上腺素红 在酸性条件下，去甲肾上腺素较稳定，不被碘氧化

酒酒酒酒酒酒酒酒I2酒酒酒酒酒酒酒酒酒PH3.56Na2S2O3酒I2酒酒酒酒酒酒

3、络合反应

去氧肾上腺素 + CuSO4 → 紫色络合物（氨基醇反应）

第七章 巴比妥类药物的分析

第一节 概述

巴比妥类药物是丙二酰脲（巴比妥酸）5位次甲基上的2个氢原子被烃基取代后的产物，为

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环状酰脲类镇静催眠药。 结构：

OCNHCCOR2CNHR1O

具有1，3-二酰亚胺基团，能发生酮式-烯醇式互变

OCNHCCOR2CNHR1O酒酒R1OCNHCCOH酒酒酒R2CNOOHR1R2CNCCNO烯醇式结构可电离出氢离子，因此，具有弱酸性

巴比妥类药物具有两步电离，因此如二元酸：PH 8 一钠盐 PH12 二钠盐

COH酒酒酒 46

药物分析教案

OCNHCCOHR2CNR1OPH 8NaOHR1OCNHCCONaR2CNONaOHPH 12ONaR1R2CNCCNO

CONa巴比妥类药物性质：

（1）、酸性溶液中不溶，易溶于乙醚、氯仿等有机溶剂中 （2）、钠盐易溶于水，不溶于有机溶剂中 （3）、钠盐加酸，析出巴比妥类药物 （4）、巴比妥类药物本身没有紫外吸收，但一钠盐或二钠盐有紫外吸收 PH 10 240nm 一钠盐 PH 13 255nm 二钠盐

240 255

（5）具有酰亚胺结构，与碱溶液共沸即水解发生氨气 可使红色石蕊试纸变蓝

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OCNHCCOR2CNHR1O

NaOHR1R2CHCOONa+2NH3+2Na2CO3

第二节 鉴别和检查

一、鉴别 （一）、丙二酰脲类的鉴别反应 1、与硝酸银作用生成白色沉淀

OCNHCCOR2CNHR1OOCNHCCOAgR2CNR1O酒酒酒酒酒酒AgNO3R1R2Na2CO3R1OCNHAgNO3CCONaR2CNOOAgCNCCNO酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒COAg

加入硝酸银出现白色沉淀振摇溶解 加入硝酸银出现沉淀振摇不溶解 2、与铜吡啶试液作用显紫色或产生紫色沉淀

48

药物分析教案

CuSO4+2[NCuNN]2+SO42-OOR1CNHCCONR1CNHRCCOH2CNHR2CNOOOR1CNHCCOR2CNNOOCuCNHNR1CCOR2CNO

紫色络合物

举例：取巴比妥0.05g → 加吡啶溶液5ml，溶解 → 加硫酸铜试液0.3ml 沉淀 → 加氯仿5ml → 氯仿层显紫色

5位取代基亲脂性越强，生成的沉淀越易溶于氯仿

3、与钴盐反应，生成紫堇色配位化合物

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→ 紫色浙江医药高等专科学校

OCNHCCO+Co2++4(CH3)2CHNH22R2CNHOOR1CNHCCOR2CNNH2CH(CH3)2R1OOR1R2CNCCOCNHO反应条件：

在无水条件下反应比较灵敏，因此所用试剂均不应含水分 常用溶剂：无水乙醇、甲醇 试剂：醋酸钴、硝酸钴或氧化钴 碱：异丙胺

4、与汞盐反应生成白色沉淀 Hg（NO3）2、HgCl2

生成的沉淀能溶与氨试液中

CoNH2CH(CH3)2 50

药物分析教案

OCNHHg(NO3)2CCOR2CNHR1OR1OCNHCCOR2CNOHgNO3OR1R2CNCCNOHgOHCONH4-+ONH3R1R2CNCCNOHgNO3酒酒酒酒

COH沉淀溶解

5、与香草醛反应

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OCNHCCOR2CNHR1OOCNHCCOR2CNR1OCHO+CHOH2SO4OCH3OHONHCCNCO酒酒酒OCH3OH96%酒酒ONCOHOHCCNOCHNCO酒酒酒OCH3OH

CR2R1OR1R2CNCCCR2R1举例：戊巴比妥10mg和香草醛10mg → 瓷盘上 → 加浓硫酸0.15ml → 水浴上加热30秒 → 产生棕红色 → 放冷后加96%乙醇0.5ml → 颜色转为暗绿色

（二）钠盐鉴别

如为钠盐，加酸析出巴比妥类药物，依法进行鉴别

52

药物分析教案

OCNHCCONaR2CNR1O（三）、取代基鉴别反应

1、不饱和烃取代基，如司可巴比妥 （1）、使碘试液或溴试液褪色

OH+CNHCCOR2CNHR1O

OCH2CNHCCO+Br2CH3(CH2)2CHCNHCH3OCHCH2BrCH2BrCHCH2OCNHCCOCH3(CH2)2CHCNHCH3O

（2）使高锰酸钾溶液褪色

OCH2CNHCCOCH3(CH2)2CHCNHCH3OCHCH2KMnO4OHCH2OHCHCH2OCNHCCOCH3(CH2)2CHCNHCH3O

2、芳环取代基反应 苯巴比妥 （1）硝化反应

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与硝酸钾、硫酸加热 → 生成黄色硝基化合物

OCNHCCO+2KNO3C2H5CNHONO2+H2SO4NO2OCNHCCOC2H5CNHO黄色化合物

（2）亚硝化反应

与亚硝酸钠、硫酸反应生成桔黄色产物

OCNHCCO+2NaNO2+H2SO4C2H5CNHONONOOCNHCCOC2H5CNHO桔黄色产物

（3）与甲醛-硫酸反应 → 生成玫瑰红色产物

举例：中国药典

苯巴比妥50mg → 放置试管中 →加甲醛试液1ml →加热煮沸 →冷却 →沿管壁缓缓加硫酸0.5ml →两层 →水浴加热 →界面显玫瑰红色

二、检查

中国药典规定检查

苯巴比妥中检查苯基丙二酰脲及酸性杂质 苯巴比妥钠中检查流离苯巴比妥

54

药物分析教案

检查方法：

（1）吸收系数法 测定吸收度 →吸收系数 （2）薄层层析法

将供试品配成1.0%、0.005%两种浓度的溶液，薄层展开

1.0%0.005%

0.005%溶液中的杂质斑点不得比1.0%溶液中的主斑点颜色深

第三节 含量测定

一、银量法

OCNHCCONaR2CNR1OAgNO3OCNHCCOAgR2CNR1OAgNO3R1R2COAgCNCOAgCNO

操作：

取本品约0.2g，精密称定 →加甲醇40ml溶解 →加新鲜配制的3%无水碳酸钠溶液15ml（时间长，有二氧化碳吸收，碱度降低 NaHCO3）→用AgNO3滴定液（0.1mol/l）滴定 →出现白色浑浊 →终点 实际上终点较难观察：滴加AgNO3出现白色沉淀 →振摇 →溶解 →生成一银盐 →此时滴加硝酸银，在一银盐生成速度减慢，同时二银盐也生成，终点观察不易。

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现采用电位法指示终点，一般采用电位滴定仪或酸度计 银-玻璃电极（银电极指示电极、玻璃电极为参比电极） 终点判断方法：

滴定体积和电位做曲线，前面间隔可大点，接近终点时间隔小点。

E（mv） V（ml） 终点 做两条与滴定曲线成45度的切线，两切线间做一垂直线，通过垂直线中点，做一条与切线平行的直线，该直线与滴定曲线的交点即为滴定终点。 或采用如下图方法 ΔE：间隔两次的电位差

ΔV：间隔两次的加入滴定液的体积差 ΔE/ΔV V（ml） 终点 二、溴量法 司可巴比妥

56

药物分析教案

OCH2CNHCCO+Br2CH3(CH2)2CHCNHCH3OCHCH2BrCH2BrCHCH2OCNHCCOCH3(CH2)2CHCNHCH3O

反应结束后，多余的Br2

Br2I2++2KI2Na2S2O3I2+2KBr

2NaI+Na2S4O6具体操作： 取本品约0.1g，精密称定 →放入250ml碘瓶中 →加水10ml →精密加入溴液（0.1mol/L）25ml →加HCl 5ml →振摇后，反应15min →微开瓶塞（防止溴挥发），加KI试液10ml，立即密塞 →用Na2S2O3（0.1mol/l）滴定液滴定，指示剂：淀粉，终点：蓝色消失 每1mlBr2（0.1mol/l）相当于13.01mg司可巴比妥钠

三、中和法

巴比妥药物呈弱酸性，可用标准NaOH直接滴定 或在非水溶液中，用标准甲醇钠滴定

四、紫外分光光度法

巴比妥类药物在酸性溶液中无紫外吸收 在碱性溶液中有紫外吸收 PH 10 240nm

PH 13 255nm 最大吸收

如：苯巴比妥在PH 9.6的硼酸缓冲溶液中 最大吸收波长为240nm，吸收系数为E1%=431 A=ECL → C=A/E 或与标准品对照

A供/C供=A标/C标 →C供= A供/ A标* C标

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五、色谱法 一般用气相色谱

第八章 磺胺类和喹诺酮类药物的分析

第一节 概述

磺胺类药物是对氨基苯磺酰胺取代物

H2NN4SO2NH2N1

N1取代物，如：磺胺二甲嘧啶，磺胺嘧啶、磺胺异恶唑、磺胺甲恶唑 这类取代物供药用者最多

N4-芳伯胺基 →进行化学鉴别和含量测定 N4取代物，这类取代物供药用者很少，临床上基本没有 N1和N4取代物，2种

酞磺胺噻唑

柳氮磺吡啶 →用于结肠炎，肠道中不吸收 磺胺药的发展：从染料中发展，百浪多息

第二节 磺胺类药物的化学鉴别法

N1 磺酰亚胺基 N4 芳伯胺基 根据性质鉴别

一、重氮化-偶合反应 芳伯胺基

58

药物分析教案

H2NSO2NHR+NaNO2+2HCl[NN+SO2NHR].Cl-NaOHOHN=NOHSO2NHR

偶合产物颜色：橙黄色 →猩红色

此类药物有磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲恶唑 二、铜盐反应

N1，磺酰亚胺基呈酸性（磺酰基强吸电子性），能与NaOH试液作用生成易溶于水的钠盐。

H2NSO2NHR+NaOHCuSO4H2NSO2NRNa酒酒酒酒H2NSO2NRCuH2NSO2NR

铜盐沉淀颜色随N1取代基不同，颜色也不一样 P159 表8-4

如：磺胺甲恶唑 →草绿色沉淀

磺胺间甲氧嘧啶 →黄绿色沉淀

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磺胺对甲氧嘧啶 →淡咖啡色沉淀 →放置后变紫红色沉淀 鉴别操作：

取磺胺药0.1g →加水和NaOH（0.1mol/l）各3ml →溶解 →过滤，取滤液 → 加CuSO4试液 →根据颜色变化鉴别

注：NaOH用量不可过量，因为过量NaOH在滤液中和CuSO4反应生成蓝绿色沉淀 →进一步氧化为CuO，红色沉淀，干扰试验鉴别反应

2NaOH+CuSO4Cu(OH)2+Na2SO4CuO

如果，只加NaOH和CuSO4反应不明显时，可改用正丁胺或吡啶和硫酸铜

磺胺药0.01~0.02g →加正丁胺或吡啶1ml →CuSO4试液2滴 →加水3ml，氯仿5ml →观察氯仿层颜色，鉴别

三、个别磺胺药的鉴别反应 1、磺胺醋酰钠

磺胺醋酰钠 + 醋酸 →乙酰磺胺 →测定熔点

H2NSO2NCOCH3+HAcNaH2NSO2NCOCH3H

2、磺胺噻唑

60

药物分析教案

COOHNCONHSO2NHSOH2SO4COOHCOCOOHOCOHNaONaOHOCOCOONaCOOH2SO4OHOH+H2OH2SO4COOH酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒-OHH+酒酒酒酒另一部分，磺胺噻唑 →测定熔点

3、磺胺脒 加热分解

61

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NHH2NSO2NHCNH2+3NaOHH2NNH+2NH3OONaS+Na2CO3

氨气使红色石蕊试纸变蓝

第三节 磺胺类药物的红外光谱识别法

磺胺类药物化学鉴别法专属性不强，还必须用红外光谱配合进行鉴别 简单讲解红外光谱中的振动形式： 伸缩振动 摇摆振动 对称伸缩振动 不对称伸缩振动等

一、磺胺类药物的特征吸收

1、磺酰基：-SO2- 1370~1300cm-1 ，不对称伸缩振动 1180~1140cm-1 ，对称伸缩振动 峰强

2、苯环骨架：-C=C- 1610~1480 cm-1 ，

3、伯胺基：

HNHSO2 3500~3140 cm-1 ，

酰胺基：

HNR

讲解：磺胺甲恶唑光谱 P162，表8-6

二、磺胺类药物的红外光谱识别法

鉴别：要求供试品的红外光谱吸收图谱与标准对照图谱一致， 具体操作

1、拿到一张红外图谱，首先判断有无磺胺类药物的基本结构 →也就是说供试品是否是磺胺类药物 可参照表8-6

62

药物分析教案

2、从波数400 cm-1 开始，逐个查看供试品图谱与对照图谱吸收峰的峰位，峰形，强弱，相对大小是否一致。

400 cm-1 ~2000 cm-1 ，波数读数误差允许在±10 cm-1 ， 2000 cm-1 ~4000 cm-1 ，波数读数误差允许在±20cm-1 ， 在400 cm-1 ~2000 cm-1 由于峰较多，所以误差不能太大。

但由于晶型不同，仪器性能不同，试样制备时研磨的差异或吸水程度不同等原因，会影响光谱的性状 →图形直接比较往往很难，如P163，P165的磺胺甲恶唑的两张图谱比较有所不同。

所以采用谱线检索表

三、红外光吸收图谱的谱线检索表 又称最强峰峰位分组索引

表中只列出吸收度大于0.2（透光率小于60%）的吸收峰。 1、列出最强吸收峰的峰位（波数）

2、400 cm-1 ~2000 cm-1 ，每隔100 cm-1 划一个区，共17区，每个区中列出最强峰位（不论多少，只列出一个，一位数表示），读数误差在±10 cm-1 ，

3、2000~4000 cm-1 ，每隔200 cm-1 划一个区，共10区，每个区列出最强的吸收峰峰位（一位数表示大于本区栏数，二位数表示小于本区栏数），误差±20 cm-1 。 4、将27区填满，P164，图8-2

5、供试品图谱的谱线检索表与对照图谱的谱线检索表《药品红外光谱集》比较。

如果：最强吸收峰峰位27个区域数字基本一致 → 初步认定为同一药物 → 再比较图谱，各峰的峰位，峰形，相对吸收强度 → 最后确认

第四节 磺胺类药物的含量测定

磺胺类药物以N1取代最多，所以游离氨基（芳伯胺）可以用于含量测定 含量测定方法：亚硝酸钠法 一、反应原理

H2NSO2NHR+NaNO2+2HCl[NN+SO2NHR.Cl-+NaCl+2HO2

]二、反应条件 1、酸度：

A、酸性介质中可加速反应

63

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B、重氮盐在酸性介质中稳定 C、防止生成偶氮化合物

酸度：芳伯胺：酸比值为1：2.5~6 2、温度

温度过高可使重氮盐分解，亚硝酸逸失，一般温度控制在15~20℃ 滴定管管尖插入液面下2/3处，大部分滴定液滴入后再缓滴。 3、为加速反应，加入KBr作催化剂

NOBr溴化亚酰，增加NO+亚硝酰阳离子浓度

三、终点确定 1、外指示剂法

采用碘化钾-淀粉试纸

2NaNO2+2KI+4HClNO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O

使淀粉显蓝色

近终点时，用玻棒蘸少许液体点在试纸上 →如出现蓝色，表示已到终点。

2、内指示剂法

0.5%中性红作指示剂（紫红→蓝色）

采用内指示剂法，方法简便，但如重氮盐有色时，特别是颜色较深时，就不太适合。

3、永停法

采用铂-铂电极，采用如图电路。

Pt电极

试验刚开始，线路中无电流或电流很小；

终点：多余NaNO2使电极去极化 →电流通过 →电流计突然偏转 →不回复。

64

药物分析教案

试验图如下：

（ImA） V（ml）终点

具体做法：

供试品 →加水40ml，HCl（1→2）15ml →电磁搅拌 →加KBr 2g →插入电极 →将滴定管管尖端插入液面下2/3处 →迅速，大部分滴入NaNO2滴定液 →近终点时 →提出液面，淋洗管尖 →继续滴定 →当电流计发生偏转，并不再回复，此为终点。

举例：取磺胺甲恶唑0.5132g，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/l）滴定，用去20.18ml，求磺胺甲恶唑含量？

滴定度：每1ml亚硝酸钠滴定液相当于磺胺甲恶唑25.33mg

1ml0.1mol/l253.3g/mol25.33mg

T.F.V100%磺胺甲恶唑 % ms0.1mol/l 25.33mg20.18ml0.1mol/l 100%0.5132g

99.6%

四、片剂溶出度测定 1、磺胺二甲恶唑 采用转蓝法

HCl（9→1000）900ml溶剂 →转速100rpm →溶出时间45min →取溶液10ml滤过 →取滤液2ml →用HCl（9→1000）稀释至100ml →243nm波长处测定吸收度A值。

1%

已知：E=536，溶出限度Q=70%

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酒酒酒 %=A1%×酒 酒酒酒酒100ml/2ml酒×酒酒酒酒900ml酒E×酒酒酒×100%

举例：8-2

标示量=0.5g

每片都高于规定限度 →该批产品溶出度合格

2、磺胺嘧啶片 采用桨法

HCl（9→1000）1000ml溶剂 →转速100rpm →溶出时间60min →取溶液5ml过滤 →取滤液1ml →用0.01mol/l NaOH稀释到50ml →在254nm波长测定吸收度A

1%

已知：E=866，溶出限度Q=70%

酒酒 酒 %=A1%×酒 酒酒酒酒50ml/2ml酒×酒酒酒酒1000ml酒E××100%酒酒酒

举例：8-3

标示量=0.5g

平均溶出量69.6%〈70%限度 →该批溶出度不符合规定，不合格。

第五节 氟喹诺酮类抗菌药的分析

喹诺酮类药物是一类化学合成抗菌药，由于具有抗菌谱广，抗菌作用强，使用安全，易于制造等优点，迅速发展。 第一代：吡酮酸类

含有1.4-二氢-4-氧-吡啶-3-羧酸基本结构

NCOOHO

第二代：喹诺酮类

含有1.4-二氢-4-氧代喹啉

ON

66

药物分析教案

第三代：氟喹诺酮类

含有6-氟-4氧-喹诺酮-3-羧酸结构

OFCOOHN

此类药物作用更佳，临床上使用较多（各种沙星类药物） 性质：

1、含有羧基和碱性氮原子，故显酸碱两性，易溶于酸和碱 2、具有共轭体系，紫外区有特征吸收

一、诺氟沙星 1、结构：

OFCOOHHNNNC2H5

1-乙基-6-氟-4-氧代-1.4-二氢-7-（1-哌嗪基）-3-喹啉羧酸 两性化合物 2、鉴别 （1）、含有叔胺基，与丙二酸、醋酐共热显红棕色 （2）、有机氟化物的鉴别反应

有机物 →有机破坏 →F- →加茜素氟蓝试液、硝酸亚铈试液 （3）、紫外吸收：在273nm波长处有最大吸收

二、环丙沙星 1、结构

67

→显蓝色 浙江医药高等专科学校

OFHNNNCOOH

1-环丙基-6-氟-1.4-二氢-4-氧-7-（1-哌嗪基）-3-喹啉羧酸 2、鉴别 （1）、红外鉴别

供试品红外图谱与标准品红外图谱一致 （2）、薄层层析

供试品与标准品的斑点颜色，位置一致

酒酒酒

酒酒酒

第九章 杂环类药物的分析

杂环类药物的定义：

夹杂有非碳原子的环状化合物称为杂环化合物 杂环种类比较多，我们只讲解四种： 1、吡唑酮类 2、吡啶类 3、苯并噻嗪类 4、苯并二氮卓类

第一节 吡唑酮类药物的分析

68

药物分析教案

此类药物主要有：安乃近的各种剂型，副作用大 1、结构

CH3CH3NNC6H5CH3NCHSONa23O

[（1，5-二甲基-2-苯基-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基）甲氨基]甲烷磺酸钠 2、鉴别 （1）、显色法

安乃近加盐酸水解成甲氨基安替比林，用次氯酸钠氧化，产生蓝色产物，加热煮沸蓝色消失，变为黄色。

CH3CH3NNC6H5CH3NCHSONa23OHClCH3CH3NNC6H5CH3CH3NHONaClOCH3CH3CH3NNC6H5酒酒酒酒NCH2OCH3NONNCH3C6H5CH3CH3NNC6H5NOONNCH3CH3CH3C6H5酒酒酒酒

（2）在酸性溶液中加热分解产生二氧化硫和甲醛臭气

69

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CH3CH3NNC6H5CH3NCHSONa23OHClCH3CH3NNC6H5HClCH3CH3NNC6H5CH3NCHOH2O+SO2CH3NHO+HCHO

（3）焰色反应

显钠盐的火焰反应 → 黄色

3、检查

（1）酸度：控制酸碱杂质 →用酸碱度检查法 （2）溶液澄清度与颜色 →与标准溶液对比 控制4-甲氨基安替比林和一些有色杂质 （3）甲醇溶液澄清度

检查NaHSO3，HOCH2SO3HNa（甲醛亚硫酸氢钠）

这些杂质不溶于甲醇，检查方法与一般澄清度检查一致 （4）干燥失重

105℃恒温干燥，减失重量不超过5.5% 安乃近一分子结晶水理论含水量为5.13% （5）重金属检查

2+

炽灼残渣，检查Pb →对比硫斑 （6）4-N-去甲基安乃近 供试品： 标准品：

70

药物分析教案

CH3CH3NNC6H5OCH3HOHNCHSONa23OHClCH3CH3NNC6H5NH2OOCH3CH3CHONCHNNC6H5OOHH+CH3

限量：0.2%（注射剂），0.7%（口服剂型）

4、含量测定 直接碘量法

CH3CH3NNC6H5CH3CH3NNC6H5CH3NCHSONa23O+I2+2H2OCH3NCHOH2O+2HI+NaHSO4CH3CH3NNC6H5CH3NHO+HCHO

+4价硫被碘氧化成硫酸盐

71

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滴定条件：

（1）溶液 PH 〉2.3

PH〈 1.5 安乃近发生分解放出SO2

（2）滴定速度每分钟3~5ml →控制反应

（3）碘液自身作指示剂 →终点溶液显浅黄色 （4）如果有抗氧剂，如焦亚硫酸钠（NaS2O5），应加入甲醛溶液掩蔽

Na2S2O5+H2O2NaHSO3HOCH2SO3Na

NaHSO3+HCHO

第二节 吡啶类药物的分析

异烟肼 1、结构

NCONHNH2

2、鉴别

（1）测定衍生物的熔点

OCH3+CONHNH2OHCOHCONHN=CHNOCH3OHN

异烟腙 黄色结晶 mp. 228~231℃ （2）银镜反应

分子中肼基具有还原性，与氨制硝酸银试液作用，被氧化为氮气和异烟酸铵，硝酸银被还原为黑色银而使溶液变浑浊，并在试管上生成银镜。

N+CONHNH2

72

N4[Ag(NH3)2]OH+N2+4AgCOONH4

药物分析教案

（3）沉淀反应

CONHNH2CONHNH22N+HgCl2N2.HgCl2

3、检查

（1）酸碱度 PH 6.0~8.0 （2）溶液的澄清度与颜色

本品1.0g，加水10ml溶解，与I号浊度标准液比较不得更浓

颜色与标准对照液比较（重铬酸钾3.0ml，硫酸铜0.1ml，→250ml）比较不得更深 主要检查双异烟酰肼：

NNCONHNHOC（3）游离肼

酒酒酒50mg/ml 10ul酒酒酒酒酒50ug/ml 2ul异丙醇-丙酮3：2展开

显色剂：对二甲氨基苯甲醛 在供试品主斑点前方与硫酸肼斑点相应的位置上，不得显黄色斑点

酒酒限度50ug/ml2ul100%0.02%

50mg/ml10ul（4）溶出度测定 转蓝法：

溶剂：水，用量1000ml

要求：30min，限量为60% →符合规定

73

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4、含量测定 氧化还原法：

CONHNH2COOHH+3N+2kBrO33N+3N2+KBr+3H2O

指示剂：甲基橙 终点：粉红色消失

微过量的溴酸钾可将粉红色的氧化还原指示剂甲基橙氧化褪色 滴定条件：

（1）甲基橙为不可逆的氧化还原指示剂，为防止溶液中局部过浓的溴酸钾破坏指示剂，提前到达终点，应在18~25℃温度下，充分搅拌，缓慢滴定。

（2）加水量多少影响指示剂褪色时间，因此应严格按药典规定条件操作。

第三节 苯并噻嗪类药物的分析

基本结构

67895SN10R4321R

2，10位取代，如氯丙嗪，异丙嗪，奋乃静等

吩噻嗪母核位共轭三环系统，有紫外特征吸收，一般在205nm，254nm，300nm处有最大吸收，常见一般最强吸收为254nm波长，2，10位取代基不同，吸收峰略有变化。

盐酸氯丙嗪

S.HClNCl

CH2CH2CH2N(CH3)21、鉴别

（1）氧化显色

本品加硝酸显红色，逐渐变为淡黄色

74

药物分析教案

OS+NO.NO3Cl

CH2CH2CH2N(CH3)23-吩噻嗪酮-5-亚砜 （2）紫外特征

本品，加盐酸溶液（9→1000）制成5ug/ml溶液，→分光光度法测定，→254nm，306nm有最大吸收，并且A254=0.46

A

254 306 （3）氯化物鉴别反应

—

因含Cl，所以有氯化物鉴别反应

Cl-+Ag+硝酸AgCl白色沉淀 2、检查

（1）有关杂质

氯丙嗪亚砜（见光氧化），避光操作 供试品和标准品溶液同作薄层层析 比较斑点 （2）溶出度 采用转蓝法

溶剂：水，用量1000ml；转速：100rpm，溶出时间：30min

1%

取溶液10ml，过滤，取滤液5ml，稀释至25ml，在254nm波长处测定吸收度A，已知：E=915，Q=70%

A25ml1%1000ml5ml溶出量E100% 表示量

75

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3、含量测定 （1）原料药 非水碱量法 溶剂：醋酐，

指示剂：橙黄IV，

滴定液：0.1mol/l高氯酸滴定液， 终点：溶液显玫瑰红色

在滴定前加醋酸汞[Hg（Ac）2]试液5ml消除干扰 （2）制剂 分光光度法

254nm E1%=915 306nm E1%=115

酒酒酒酒=

A/E×1%×酒 酒酒酒×酒 酒 酒酒酒酒酒酒×100%

第四节 苯并二氮杂卓类药物的分析

一、概述 1、结构

98761N23N45

目前临床上常用的苯并二氮杂卓类药物为催眠药，镇静药，都具有这样的结构 如：安定，硝基安定，氯硝安定，佳乐安定等 具有苯并二氮杂卓-2-酮的结构

H98761N2O35N4

76

药物分析教案

2、紫外特征吸收

分子中存有共轭系统，在紫外区有特征吸收

例如：安定0.5%硫酸-甲醇溶液，在242，284，366nm波长处有最大吸收。 3、碱性

二氮杂卓中的氮原子呈碱性，所以可用强酸进行滴定，如在非水环境中，用高氯酸直接滴定。

4、酮式-烯醇式互变异构 例如：硝基安定

HNNOHNNOHNO2NO2酒酒酒酒 酒NaOHHNNONaNO2酒

酮式转换为烯醇式后，共轭体系增加，紫外吸收波长有所变化。 5、水解开环

此类药物在强酸性溶液中水解开环，生成芳伯胺 → 呈现芳伯胺鉴别反应

HNNOH+NH2O

77

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二、安定 1、结构

CH3NClNO

2、鉴别

（1）荧光反应

原料药 + 硫酸 → 紫外灯下，黄绿色荧光

片剂 + 丙酮提取 →提取液蒸干后 + 硫酸 →黄色荧光 （2）氯化物鉴别反应

安定中含有氯原子，经氧瓶燃烧后（有机破坏），用5%NaOH溶液吸收，转化为无机氯离子，在硝酸存在的酸性条件下，与AgNO3反应，产生白色AgCl沉淀。 （3）紫外特征吸收

安定 + 0.5%硫酸-甲醇溶液溶解，原料药制成5ug/ml，片剂制成10ug/ml溶液，在242，284，366nm波长处有最大吸收。 （4）红外光谱

供试品安定红外光谱和标准品（对照品）红外光谱对比，一致。 3、检查

（1）检查有关杂质

1氨基酮 安定分解产物 ○

2去甲安定 制备过程中甲基化不完全中间体 ○

3环化副产物 六元环而非七元环 ○

100mg/ml酒酒酒酒酒酒酒酒酒0.3mg/ml酒酒酒酒酒酒酒酒酒100mg/ml0.3mg/ml

78

药物分析教案

如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。

限量0.3mg/mlv100%0.3%

100mg/mlv（2）安定片剂含量均匀度的检查

供试品用0.5%硫酸-甲醇溶液溶解成100ml，过滤后，取滤液10ml，稀释成25ml，在284nm波长处测定吸收度A，已知E1%=454

A/E×1%×酒 酒酒酒酒25ml/10ml酒×酒酒 酒 酒酒100ml酒酒 酒 酒酒酒酒酒酒酒=×100%酒酒酒

（3）安定片剂溶出度测定 采用转蓝法

采用盐酸溶液HCl（9→1000）800ml，转速100rpm，溶出时间：20min 过滤后取滤液10ml，在242nm测定吸收度A，已知E1%=1018,Q=75%

酒酒酒=A/E×1%×酒酒 酒 酒酒800ml酒酒酒酒×100%

（4）安定注射液的颜色检查

安定受热、光作用分解氨基酮和去甲氨基酮，为黄绿色颜色， 为了控制杂质，与黄绿色9号标准比色液比较，不得更深。 4、含量测定

（1）原料药含量测定

用非水碱量法（分子中含有碱性氮原子） 溶剂：冰醋酸－醋酐 指示剂：结晶紫

滴定液：0.1mol/l高氯酸滴定液 终点：溶液显绿色

CTFV100% MsT=28.47mg

（2）片剂的含量测定 紫外分光光度法

取20片片剂，研细，称约10mg，用0.5％硫酸－甲醇溶液溶解，稀释成100ml，过滤，取滤液10ml，稀释成100ml，在284nm波长处测定吸收度A，已知E1%=454。

酒 酒 酒酒酒酒=A/E×1%×酒 酒酒酒酒100ml/10ml酒×酒酒 酒 酒酒100ml酒酒酒酒酒×100%

（3）注射液的含量测定 用高效液相色谱法（HPLC）

79

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1H标/C标＝H样/C样 ○

2校正因子，内标法 ○

第十章 生物碱类药物的分析

第一节 概述

1、定义

生物碱是一类含氮的碱性有机化合物

绝大部分存在于植物体内，有明显生理活性或毒性， 如：利血平→抗高血压药物

阿片→镇痛→存在于罂粟

莨菪碱→解痉→存在于颠茄植物中 麻黄碱→缩血管→存在于麻黄植物中 黄连素→抗菌→存在于小檗碱植物中 2、生物碱地通性

（1）分子中都含有氮原子 （2）显碱性，能和酸成盐

（3）碱性，季铵结构>叔胺>环酰胺

脂肪胺、脂环胺>芳香胺

（4）如分子中同时含有酚羟基或羧基，则具有两性性质 （5）生物碱不溶于水，易溶于有机溶剂中 生物碱盐则不溶于有机溶剂，易溶于水。 3、生物碱鉴别 （1）化学鉴别法 1沉淀反应 ○

和生物碱沉淀试剂反应

生物碱沉淀试剂：如碘化汞钾，碘化铋钾，碘－碘化钾，氯化汞等 形成难溶于水的沉淀，沉淀有不同颜色，可用于鉴别。 如：加兰他敏

加碘化汞钾→黄白色沉淀 加碘化铋钾→橙红色沉淀

2生物碱显色反应 ○

与生物碱显色试剂反应，生成不同颜色

80

药物分析教案

生物碱显色试剂：

对二甲氨基苯甲醛、香草醛、甲醛硫酸、氧化性试剂(硝酸、溴、氯酸钾等)、三氯化铁 3专属性鉴别反应 ○

托烷类生物碱鉴别反应：加发烟硝酸，醇制KOH，产生深紫色 如：阿托品，山莨菪碱、东莨菪碱 举例：P212,表10－3 （2）熔点测定法 测定生物碱熔点

测定生物碱盐熔点,如形成碘化汞钾、碘化铋钾等不溶性盐，测定熔点 （3）紫外特征吸收

如分子中含有双键或共轭系统，有紫外吸收特征

如硝酸一叶秋碱：7ug/ml水溶液，在256nm波长处有最大吸收 （4）红外光谱

供试品光谱与标准品光谱对照，一致 4、生物碱类药物的检查 （1）杂质检查

生物碱类药物一般都从植物中提取或是半合成的，因此有许多杂质， 检查方法： 1薄层层析法 ○

供试品溶液和标准杂质品作薄层层析，对照

酒酒酒酒

2化学方法 ○

如磷酸可待因中检查吗啡

可待因无酚羟基，而吗啡有酚羟基，因此可用三氯化铁试液检查 3高效液相色谱法 ○

抗肿瘤药物长春新碱用高效液相色谱检查杂质 （2）制剂含量均匀度和溶出度测定 （3）溶剂残留量与含醇量的检查

许多生物碱存在于植物体内，用溶剂提取，（有些溶剂有毒，如甲醇，氯仿等），因此必须做检查。

81

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第二节 生物碱类药物的含量测定

含量测定方法较多 一、非水碱量法

本类药物含有氮原子显碱性，在冰醋酸－醋酐溶液中可用高氯酸直接滴定。 指示剂：结晶紫

B.HX+HClO4B.HClO4+HX

实际上是一个置换滴定，强酸置换出弱酸 在冰醋酸中，酸性大小：

_

HClO4>HBr>H2SO4>HCl>HSO4>HNO3>有机酸

HBr、HCl酸性虽不及HClO4，但也是一个较强酸，滴定时，容易使终点提前，结果偏低。 所以，在滴定前应加入醋酸汞[Hg(Ac)2]使生成在冰醋酸中难以解离的卤化汞，消除影响。

2B.HX+Hg(Ac)22B.HAc+HgX2

试验注意点：

（1）一般生物碱都为一元酸盐，所以滴定比例为1：1

（2）如为生物碱的硫酸盐，硫酸为二元酸，在滴定过程中只能滴定到硫酸氢盐阶段，所以，硫酸盐的生物碱滴定比例为1：1

(BH+)2.SO4+HClO4(BH+).ClO4+(BH+).HSO4-

如：硫酸阿托品药物

（3）硫酸奎宁、硫酸奎尼丁中含有4个氮原子，但只有2个氮原子和硫酸成盐。 因此，用高氯酸滴定的比例为1：3

OHCHN+H.SO4+3HClO4CHCH2OHCHCHCH2NH+-HSO4-NOHCHN+HNH+ClO4OHCHCHCH2CHCH2NHClO4+-

(4)硝酸在冰醋酸中为弱酸，但具有氧化性，影响指示剂变色，所以硝酸生物碱盐用电位法指示终点，而不用指示剂指示终点。 二、水溶液中容量分析法

82

NNHClO4+-药物分析教案

1、提取中和法

基本原理：根据生物碱盐可以溶解在水中，而游离生物碱溶解于有机溶剂中，而不溶于水中的性质。

B.HX+NH3(酒NaOH)酒酒酒B酒酒酒酒 酒 酒

1用有机溶剂提取游离碱，蒸干溶剂，加中性乙醇溶解，用酸标准液直接滴定； ○

2用有机溶剂提取游离碱，加入酸成盐，蒸干溶剂，用非水碱量法滴定； ○

3用有机溶剂提取游离碱，加入过量定量的酸成盐，多余的酸用氢氧化钠回滴。 ○

如：阿片中含有吗啡，那可汀，可待因，罂粟碱。主要测定吗啡的含量 分离测定见下图：

阿片

Ca(OH)研磨、过滤

滤渣，罂粟碱、可待因，不溶性钙盐 滤液（吗啡，那可汀盐）

MgSO,Ca(OH)树脂 滤液（盐）

乙醇、乙醚、NH4Cl

吗啡结晶，不溶于乙醚 溶液

测定

2、直接中和法

氨茶碱由茶碱和乙二胺组成

氨茶碱加硫酸成茶碱，加硝酸银溶液，生成银盐沉淀和硝酸，生成的硝酸用氢氧化钠滴定。 3、双相滴定

盐溶于水，游离生物碱不溶于水

B.HNO3酒酒酒

+NaOHB+ NaNO3 + H2O

酒酒酒酒 酒酒83

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三、酸性染料比色法

+

在适当的PH介质中，有机碱（B）可与氢离子结合成盐（BH）,一些酸性染料（如溴麝香草

-酚蓝、溴甲酚绿）在此条件下解离为阴离子（In）。则阳离子和阴离子可以结合成络合离子。

BH++In-BH+In-

形成有色配位化合物，溶解在有机溶剂中，提取后，测定吸收度，计算含量。 由于所用试剂为酸性染料，所以叫酸性染料比色法。 试验条件： 1、适当PH值

PH过小：有利于阳离子生成，不利于阴离子生成； PH过大：有利于阴离子生成，不利于阳离子生成。 2、适当有机溶剂和酸性染料

有机溶剂必须提取率高，选择性好， 常用溶剂：氯仿、二氯甲烷

由于氯仿在水中的溶解度小，所以是最常用的提取溶剂。 常用酸性染料：溴麝香草酚蓝、溴甲酚绿。 3、水分的影响

用有机溶剂提取离子对时，应严防混入水份，否则微量的水份可以使有机溶剂（如氯仿）发生浑浊，影响比色。

一般加脱水剂（如无水硫酸钠）或经滤纸虑过后除去。

第三节 咖啡因的分析

咖啡因为中枢兴奋药，常见于复方阿司匹林等各种感冒药中。 1、结构

OCH3ONNCH3CH3NNC8H10N4O2 M.F.=194.2

1.3.7－三甲基黄嘌呤 2、鉴别

（1）紫脲酸铵反应（生物碱显色反应）

在酸性溶液中咖啡因可被氯酸钾氧化为阿马林酸，再与氨作用生成四甲基紫脲酸铵而显紫色，加入氢氧化钠，则紫色消失。

84

药物分析教案

OCH3ONNCH3OCH3ONNCH3CH3NNKClKClO3CH3ONOOHOHOOONCH3NCH3OONNCH3NCH3O

NH3NCH3ONOOHNCH3NCH3ONH3CH3ONONCH3OONH4(2)、沉淀反应

咖啡因和碘－碘化钾试液作用，生成红棕色的复合物沉淀。

B + KI + 2I2 + HClB.HI.2I2+ KCl

该沉淀与氢氧化钠试液作用发生分解，颜色消失

B.HI.2I2+ NaOHB + 3NaI +2NaIO +3H2O

3、含量测定

采用非水碱量法

溶剂：醋酐：冰醋酸＝5：1 指示剂：结晶紫

滴定液：0.1mol/l高氯酸滴定液 终点：溶液显黄色

滴定度：T，每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/l）相当于19.42mg的C8H10N4O2。

1ml0.1mol/l194.2g/mol19.42mg

第四节 盐酸麻黄碱的分析

盐酸麻黄碱具有2个手性碳原子，因此有旋光性，比旋度为－33～－35.5，左旋。

。

。

OHNHCH3CCCH3.HCl

85

HH

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C10H15NO.HCl M.F.=210.70 一、鉴别 络合显色

在碱性条件下与硫酸铜作用生成蓝紫色络合物，该络合物溶于乙醚呈紫红色，水层则为蓝色。

络合物结构：

HCH3CCuOCHNHCH3CHCH3HCNHCH3O

二、含量测定

1、原料药、注射液 采用非水碱量法 注射液在水浴上蒸干

因为是盐酸盐，所以在滴定前必须加入醋酸汞 溶剂：冰醋酸 指示剂：结晶紫

滴定液：0.1mol/l高氯酸滴定液 终点：显翠绿色 2、片剂 采用银量法

B.HCl + AgNO3

B.HNO3 + AgCl

第五节 盐酸小檗碱的分析

略讲

第十章 甾体激素类药物的分析

第一节 概述

一、定义和分类

定义：甾体激素类药物是指具有甾体结构的激素类药物，主要包括肾上腺皮质激素和性激素。 分类：

86

药物分析教案

酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒 酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒 酒酒酒酒酒 酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒 酒酒酒酒酒 酒酒酒 酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒 酒 酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒 酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒

二、结构特征

甾体激素类药物的母体结构为环戊烷多氢菲，共有A、B、C、D四个环。

1112A34109B5612C131417D161587

10、13位有甲基，为雄甾烷，雄激素母体

1819AB

13位有甲基，为同化激素母体

CD18CAB

10、13位有甲基，17位有乙基（二个碳原子），为孕甾烷，孕激素母体

87

D浙江医药高等专科学校

211819AB

A环位苯环，13位有甲基，为雌甾烷，雌激素母体

20DC18CAB

1、糖皮质激素结构特征

D酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒12O1196CH2OHCOOH16酒酒酒酒酒酒酒酒

1、2位引入双键，如泼尼松，氢化泼尼松，氟轻松，地塞米松等； 9位引入氟：如氟轻松，地塞米松，倍他米松等；

11位引入羟基或羰基：如泼尼松→氢化泼尼松，可的松→氢化可的松；

16位引入甲基或羟基：如引入甲基,地塞米松，倍他米松；引入羟基，曲安萘德； 这些结构改变，引出一大类糖皮质激素类药物。 结构特征：

1A环3位羰基，4，5位双键，形成共轭体系，Δ4－3－酮； ○

2C环11位上有扬原子，羰基或羟基（β－用实线表示）○；

3D环17位上有α－羟基（用虚线表示）○； 4D环17位上有α－醇酮基（O=C-CH2OH）○，醇有时成酯形式存在，以醋酸酯较常见。

88

药物分析教案

56，9位可以有氟原子。 ○

总之，可供分析用的主要基团有：Δ4－3－酮，17－α－醇酮基，有机氟，酯类结构。 2、雄激素和蛋白同化激素 结构特征：

1A环，Δ4－3－酮 ○

217位β-OH ○

3雄激素：10，13位有甲基，同化激素：10位无甲基 ○

3、雌激素和孕激素 雌激素结构特征： 1A环为苯环 ○

23位为酚羟基 ○

317位β－OH或有乙炔基 ○

410无甲基 ○

孕激素结构特征： 1A环，Δ4－3－酮 ○

217位有羟基（黄体酮除外） ○

317位甲基酮 17－CO-CH3 ○

410位有些有甲基，有些无甲基。 ○

综上所述，可用于分析签定用的基团：

1、Δ4－3－酮；2、C17位 α－醇酮基，羟基，乙炔基，甲基酮；3、A环酚羟基；4、酯基及有机氟

三、鉴别

1、红外光谱法

供试品红外图谱与标准图谱比较。一致 P241～257，各种甾体激素的红外图谱。 2、显色反应

1与强酸的呈色反应 ○

许多甾体激素能与硫酸、磷酸、高氯酸、盐酸等反应呈色。 其中以与硫酸的呈色反应应用较广，呈现一定的颜色或荧光。 如醋酸可的松 →呈现黄色 氢化可的松 →呈现绿色荧光

P263，表11－9，部分甾体激素类药物与硫酸反应的现象

此外，尚有硫酸加各种溶剂作为显色剂，如：硫酸－甲醇，硫酸－乙醇 中国药典中甲睾酮，甲羟孕酮就用此法鉴别。 2某些官能团的呈色反应 ○

A、C3－酮基，C20-酮基

能与一般羰基试剂反应，呈现各种颜色。

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羰基试剂：2.4－二硝基苯肼；异烟肼，羟胺，氨基脲 如2.4－二硝基苯肼和黄体酮反应呈现黄色。 B、A环为苯酚结构

用FeCl3显色；和重氮盐反应，生成有色偶氮化合物 C、17位甲基酮 17－CO-CH3

能与亚硝基铁氰化钠反应呈现各种颜色。

如：黄体酮和亚硝基铁氰化钠反应，现蓝紫色，为黄体酮的特征反应，其他甾体激素则显橙色或无色。

D、α－醇酮 17－CO-CH2OH

具有还原性，能与许多氧化剂反应，如氨制硝酸银，斐林试剂，四氮唑盐等。 其中以四氮唑盐反应最常用。常见的有氯化三苯四氮唑和四氮唑蓝。 氯化三苯四氮唑：

NNNN-Cl酒酒四氮唑蓝

NNNN-Cl酒酒+酒 酒+NNHNN酒酒酒酒酒酒 酒酒

NNNN-ClOCH3+酒 酒NNHNNOCH3酒 酒NHNNNOCH3OCH3

E、17－乙炔基，和硝酸银反应形成沉淀 如：炔诺酮，炔雌醇

CCHOH+ AgNO3CCAgOH

3、薄层层析鉴别法

供试品和标准品溶液做薄层层析

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药物分析教案

酒 酒 酒 酒

如为同一物质，应在同一位置出现，如果不在同一位置出现，则可能非同一物质（Rf值不同）。 四、检查

甾体激素类药物多由其他甾体化合物或结构类似的其他甾体激素经结构改造而来的，因而可能会带来原料、中间体、异构体、降解产物以及试剂和溶剂等许多杂质。 1、游离磷酸盐

如:倍他米松磷酸钠中检查磷酸盐

酒酒酒 25mg酒H3PO4)酒酒酒酒0.0036酒W/V KH酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒2PO4)+ H2SO4酒 酒酒酒 酒730nm酒 酒 酒 A酒酒A酒2、甲醇和丙酮

如：地塞米松磷酸钠中检查甲醇和丙酮

采用气相色谱法：要求，丙酮含量不超过5.0％，不得含有甲醇。 3、雌酮

如：炔雌醇中检查雌酮

CCHOHO酒酒酒酒酒

加间二硝基苯，能在雌酮16位上加成

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酒酒酒 5mg酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒KOH酒酒酒酒酒 酒 酒

酒酒酒酒酒<酒酒酒酒酒 4、其他甾体

薄层层析，采用自身对照法检查

将供试品配成高浓度和低浓度两种溶液，在薄层上展开 如：氢化可的松的检查

供试品配成：3.0mg/ml和60ug/ml

酒 酒 酒 酒酒 酒酒酒 酒酒

要求：高浓度杂质斑点数不超过规定量（如氢化可的松杂质斑点数不超过3个），高浓度杂质斑点的颜色、大小不能深于低浓度的主斑点。

举例：P267－表11－11 部分甾体激素类药物的其他甾体检查法

五、含量测定

甾体激素类药物含量测定方法很多，可用容量法（乙炔基用硝酸银滴定）、比色法（各种颜色，如和四氮唑盐反应）、紫外分光光度法（分子中有共轭体系）、荧光法（有些激素反应后有荧光产生）、气相色谱法、高效液相色谱法等。 主要讲解紫外分光光度法测定甾体激素类药物：

由于甾体激素类药物中有许多含有Δ4－3－酮、Δ4.1－3－酮、苯环等，都具有共轭体系，在紫外区有特征吸收。

我们可以通过测定吸收度值A来计算甾体激素的含量：

CA1% EE1%可以查表，P272表11－14 部分甾体激素的紫外分光光度测定条件

第十二章 维生素类药物的分析

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概述

维生素是维持人体正常代谢和机能所必需的生物活性物质，一般不能在人体内合成，而主要必须从外界摄取。

维生素类药物主要用于治疗维生素缺乏症和营养补充。 市场上有许多复方制剂：21金维他、黄金搭档等 补钙时用→VD 夜盲症补充→VA

维生素主要有二大类：

脂溶性维生素：VA、VD、VE、VK；

水溶性维生素：VB、VC、烟酸、泛酸、叶酸 一、维生素E 1、结构

CH3CH3CH3COOCH3α－生育酚醋酸酯 可作为脂溶性抗氧剂 2、鉴别 （1）、氧化显色

OCH3C16H33酒酒酒酒 酒酒酒EH+酒酒酒HNO3酒酒酒酒酒酒 酒酒酒酒酒酒酒酒

2、络合显色

酒酒酒EKOH酒酒酒酒酒酒酒酒 酒酒酒Fe3+FeCl3酒酒酒酒酒(酒 酒酒Fe2+2.2酒酒酒酒酒 酒

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2+NFeN

二、维生素C 1、结构

3红色三联吡啶络亚铁离子

CH2OHHCOHOOHOHOH L-构型

分子中有共轭体系，有紫外吸收特征

分子中含有二烯醇结构，具有酸性，并有很强的还原性，能和氧化剂发生反应 作水溶性抗氧剂 2、鉴别 （1）、还原硝酸银

酒酒酒C酒 2 AgNO32Ag酒酒酒酒

（2）、还原二氯靛酚

Cl酒酒酒CONClONaHOHNClONaCl

蓝色 无色 醌型结构 酚型结构 共轭体系 非连续共轭体系 3、含量测定

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直接碘量法

维生素C具有还原性，能和碘发生氧化还原反应

CH2OHHCOHOOHOHOH+ I2H+HOOCH2OHHCOHOO+2HI

维生素C被氧化成去氢抗坏血酸，碘被还原成碘化氢 指示剂：淀粉

终点：微过量碘可使淀粉指示剂变蓝

T=8.806mg 每1ml碘滴定液（0.1mol/l）相当于8.806mg维生素C

维生素C注射液中加入稳定剂焦亚硫酸钠，具有强还原性，因此对碘量法有干扰，应加入丙酮，消除干扰。

Na2S2O5NaHSO3++H2OCH3CH3O2NaHSO3CH3CH3COHSO3Na

第十三章 抗生素类药物的分析

概述

抗生素是一类重要的药物，临床上应用最多的是抗生素，在药品使用中占地份额最大，一般都在40％以上。 举例：

临床上应用的抗生素大都有生物合成的，经过发酵、提纯制得，因此，药物中就会有许多杂质，引起过敏反应等。

所以为了保证用药的安全与有效，抗生素常规检验应包括： （1）、鉴别试验 用化学方法或生物学方法证明是何种抗生素 （2）、异常毒性试验 限制产品种的毒性杂质 （3）、无菌试验 检查药品是否无菌 （4）、水份测定 限制过高水份，以免影响产品的稳定性 （5）、热原试验 检查药品中的致热物质

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（6）、溶液澄清度检查 限制不溶性杂质 （7）、酸碱度测定 （8）、降压试验 检查降压物质 （9）、含量测定或效价测定 确定含量或效价

抗生素含量或效价测定主要有：物理化学测定法和微生物检定法

微生物检定法：是以抗生素抑制细菌生长能力或杀菌能力作为衡量标准。 优点：方法灵敏度高，用量少，与临床较接近，更符合实际； 缺点：测定时间长，误差大，重复性差。 物理化学测定法：常规药物分析方法，

根据抗生素的化学结构特点，利用物理性质或化学反应来测定。 优点：操作简单，省时，准确

缺点：不一定符合实际抑菌或杀菌能力。

第一节 β－内酰胺类抗生素

一、结构特征

β－内酰胺类：青霉素类和头孢菌素 分子中都含有β－内酰胺环 青霉素类：

RCONH7O65N14S3CH3CH32COOH

头孢菌素类：

RCONH765SNO8143

青霉素类的结构是由侧链RCO及母核6－氨基青霉烷酸（6-APA），母核由β－内酰胺环与氢化噻唑环并合而成的。

头孢菌素类的结构是由侧链RCO及母核7－氨基头孢菌烷酸（7-ACA）组成母核是由β－内酰胺环与氢化噻嗪环组合而成的。

β－内酰胺环为四元环，具有较大张力，因此容易发生开环反应。

二、化学性质

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CH2R2COOH药物分析教案

1、酸性

分子中具有羧基，因此具有酸性，能和碱（无机碱或有机碱）成盐。 如青霉素钠、钾盐等 2、旋光性

青霉素含有3个手性碳原子：C2、C5、C6 头孢菌素含有2个手性碳原子：C6、C7 所以具有旋光性 3、紫外吸收特征

青霉素母核无紫外吸收，因为母核没有共轭系统 但其侧链如有苯环等共轭系统，则有紫外吸收 如：青霉素 R:

CH2CONH

则在257nm、264nm波长处有吸收峰

头孢菌素：母核中具有O=C-N-C=C结构，因此有紫外吸收特征 吸收波长在260nm，这是7-ACA母核的特征吸收峰。

4、β－内酰胺环的不稳定性

干燥纯净的青霉素很稳定，对热也稳定，如：结晶青霉素钾盐，在105℃加热1.5小时，效价也不降低，基本无变化，但青霉素水溶液很不稳定，水溶液在30℃放置24小时，则效价下降56％。

这主要是由于β－内酰胺环不稳定引起的，β－内酰胺环容易受酸碱、重金属、青霉素酶、羟胺等影响发生环的破裂而失去抗菌作用，甚至引起过敏反应。 举例：青霉素尽量不用葡萄糖水化（PH4.1左右），化完药后应立即静滴，静滴时间不宜过长。

相对来说，头孢菌素也会发生β－内酰胺环开裂，但相对稳定性要高一点。

举例：医院中要求青霉素类药物，不管静滴用还是口服用，都必须做皮试，头孢菌素则要求静滴药物作皮试。

三、鉴别试验 1、羟戊酸铁反应

3+

青霉素与羟胺作用生成羟戊酸衍生物，在中性溶液中与Fe作用生成红色配位化合物。

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RCONHNOSCH3CH3COOHNH2OHRCONHONHOHNHSCH3CH3COOHFe3+RCONHOFe/3NHONHSCH3CH3COOH

红色 2、焰色反应

钠盐 黄色火焰 钾盐 紫色火焰 3、有机胺盐的特殊反应

青霉素可以和有机碱成盐，如普鲁卡因青霉素，酸化后可析出普鲁卡因，因具有芳伯胺基，有重氮化－偶合反应。

4、与硫酸及硫酸－甲醛试剂呈色反应

多数青霉素和头孢菌素遇硫酸在冷时和加热时都无变化，而遇硫酸－甲醛试剂有较显著的颜色变化，可供鉴别。 如： H2SO4 H2SO4100℃加热1分钟 无色 无色 无色 淡黄色 H2SO4-甲醛 H2SO4-甲醛100℃加热1分钟 暗黄 暗黄 棕红色 黄色 羟氨苄青霉素 氨苄青霉素 普鲁卡因青霉素 头孢氨苄 无色 无色 无色 无色 无色 无色 无色 淡黄色 5、红外光谱法

抗生素红外吸收图谱与对照图谱比较，一致

四、检查

检查内容较多，溶液澄清度，颜色，酸碱度，水份，异常毒性，热源，降压物质等。

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五、含量测定 微生物测定法

物理化学测定法：主讲，文献报道较多 如：紫外分光光度法（氨苄西林钠）、酸碱滴定法、碘量法（头孢氨苄）、高效液相色谱法（头孢拉定）、汞量法（青霉素钠）。 青霉素钠――硝酸汞电位滴定法 原理：

酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒PH4.6酒酒酒酒酒CH3CH3+Hg(NO3)2酒酒酒PH 4.6Hg(NO)2酒 酒HS酒酒酒 酒酒

HSCH3CH3NH2+CO

酒酒PH 4.6HgONH2COOH2HNO3 青霉胺 青霉胺络汞 分二次测定：

第一次，是青霉素水解后滴定，测出总青霉素含量； 第二次，不经水解直接滴定，测出降解物百分含量； 二者之差即为青霉素百分含量。

第二节 氨基糖甙类抗生素的分析

本类抗生素是以氨基环醇与氨基糖缩合而成，故称为氨基糖甙类抗生素，目前临床上使用有：链霉素、庆大霉素、卡那霉素、丁安卡那霉素、新霉素等 硫酸链霉素 一、化学结构

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NHNH酒酒酒 酒NH2CNHOHOHOHOCH3CHOOHOHCH2OHCH3NHOHON-酒酒酒L-酒酒酒酒OO酒酒酒.3/2 H2SO4酒酒酒酒酒NHCNH2酒酒酒酒酒酒

二、化学性质

1、3个碱性中心，能和酸成盐

2、具有甙键，能发生水解，水解成各部分单元

3、链霉糖部分有醛基，能和各种氧化剂（KMnO4、KClO4、H2O）羰基试剂、羟胺、半胱胺酸等反应。

4、水解后链霉糖能发生重排生成麦芽酚。 三、鉴别

1、茚三酮反应

由于链霉素具有氨基糖甙结构，具有羟基胺类和α－氨基酸的性质 链霉素 ＋ 茚三酮 →蓝紫色

2、N－甲基葡萄糖胺反应（Elson-Morgan）反应

链霉素水解后产生N－甲基葡萄糖胺，加乙酰丙酮，对二甲氨基苯甲醛，产生红色 3、麦芽酚反应（Maltol）

本品水溶液，加NaOH，水浴加热后，加硫酸铁铵溶液即显紫红色，为链霉素特有反应。

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R1OOCH3酒酒酒OR2OHCHONaOH酒酒酒酒OOHOCH3Fe3+OFe/3OOCH3酒酒酒酒 酒酒酒酒酒 酒酒酒 酒

4、坂口反应（Sakayuchi）

酒酒酒8酒酒酒酒 酒酒酒 酒

链霉素上链霉胍的特有反应 5、硫酸盐鉴别

Ba2+ + SO42-四、含量测定 采用微生物测定法

链霉素一般用国际单位表示

BaSO4

第三节 四环素类抗生素

本类抗生素分子中都含有4个环，故称为四环类抗生素 盐酸四环素 一、结构

78910OHCH3611OHH54121OHOHON(CH3)23OH2CONH2

.HClOH二、化学性质

1、手性碳原子，具有旋光性，比旋度为－240～－258 2、含有酚羟基（10位），烯醇型羟基（3、12位），因而显弱酸性。能和碱成盐。 3、含有二甲氨基（－N(CH3)2）和酰胺基（-CONH2），因而显碱性，能和酸成盐。 4、四环素是两性化合物，遇酸或碱均能成盐。

5、易发生差向异构化反应，形成无抗菌作用的差向异构体（ETC）。

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78910OHCH3611OH5H4121OHOHON(CH3)23OH2CONH289OH(CH3)2NOHCH3H5H73OH4621012111CONH2OHOHOOHO

ETC

6、在加热情况下，易形成脱水四环素（ATC），脱水四环素易发生差向异构化,形成差向脱水四环素（EATC）。

710OHCH3611OH5H4121OHOHON(CH3)23OH2CONH27-H2O8910OHCH3611OHH5H412O1OHON(CH3)23OH2CONH2

OH ATC

710OHCH3611OHH5H4121OHOON(CH3)23OH2CONH2710OHCH3611OH(CH3)2NH5H3OH42121CONH2OHOO

ATC EATC

7、在碱性溶液中四环素的碳环容易破裂，生成无活性的异四环素。

78910OHCH3611OH5H4121OHOHON(CH3)23OH2CONH27OH-CH3O11O6H5H4121OHOHO8910OHN(CH3)23OH2CONH2

OH8、与金属离子形成配位化合物

脱水四环素（ATC）、4－差向脱水四环素（EATC）、细胞毒性比四环素大250倍，4－差向四环素的细胞毒性比四环素大70倍，所以，四环素药物中必须控制这些杂质。

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药物分析教案

举例：梅花K胶囊

四环素外观色泽变深往往是脱水杂质含量较高。

三、鉴别 1、显色反应

四环素与硫酸作用，生成脱水四环素，溶液显深紫色，再加三氯化铁试液后，生成脱水四环素铁络合物，溶液显红棕色。

CH3HHN(CH3)2OHCONH2OHOFe/3OHOO络合物结构

2、氯化物鉴别

为盐酸盐，所以具有氯化物鉴别反应。 3、薄层层析

酒 酒 酒 酒0.5mg/ml酒酒酒酒酒酒酒酒酒 酒酒酒酒酒酒酒供试品斑点颜色，位置与对照品斑点相同。

四、检查

有关杂质：ETC、ATC、EATC、CTC(金霉素) 采用薄层层析

酒

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123456

1．5mg/ml供试品 2．0.2mg/ml差向四环素 3．0.025mg/ml脱水四环素 4．0.025mg/ml差向脱水四环素 5．0.1mg/ml金霉素

6．0.05mg/ml四环素、0.1mg/ml金霉素、0.025mg/ml差向脱水四环素、0.025mg/ml脱水四环素、0.2mg/ml差向四环素

第十四章 制剂分析

第一节 概述

为了防治与诊断疾病的需要，更好地发挥药物的分析，降低毒性，减少副作用，便于患者服用，便于储藏与运输，根据药典、部标准或其他法定处方，需将原料药和辅料等经过加工制成各种制剂。

常用的剂型有：片剂、注射剂、酊剂、栓剂、胶囊剂等

根据制剂中含有有效成分的种类，又可将制剂分为单方制剂和复方制剂。 一、制剂分析的特点

制剂分析：是对各种制剂，应用物理、化学或生物测定的方法进行分析，检验其是否符合质量标准规定。 特点：

1、消除辅料的干扰

稀释剂、赋形剂、附加剂会影响鉴别、检查和含量测定，所以首先要消除这些干扰。 如：维生素C中稳定剂，焦亚硫酸钠 → 干扰碘量法

阿司匹林片剂中酒石酸、枸橼酸，影响酸碱滴定 →两步滴定法 2、消除共存药物的干扰 复方制剂、特别是含量测定

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3、根据制剂生产中可能引入的杂质确定检查项目和限度要求

制剂的杂质检查，主要是检验制剂在制备过程中或贮存过程中所产生的杂质。 原料药不再检验，因为投料前已检验合格。 4、含量限度比原料药宽

如：原料药磺胺嘧啶 含量不得少于99.0％，磺胺嘧啶片应为标示量95.0～105.0％，允许±5.0％。

二、制剂分析的指导原则 1、鉴别

A、为消除共存药物和辅料的干扰，应通过溶剂溶解而分离；B、多采用紫外分光光度法鉴别（规定吸收波长或不同波长吸收度的比值）；C、当主药含量低微时，可采用灵敏度高、专属性强的方法，如薄层层析、高效液相色谱法；D、必要时可增加与同类药物相区别的鉴别试验（如磺胺类测定提取物的熔点）。 2、杂质检查

A、制剂的杂质检查一般首选薄层色谱法，如不能解决，再选用高效液相色谱法；B、除检查生产工艺中可能带入的有关杂质外，主要控制降解产物；C、当紫外分光光度法用于杂质检查时，应选用主药无吸收的波长或杂质有吸收的波长处规定吸收值限量，用以控制杂质的限量。 3、含量测定

A、可能时应选用与原料药相同的测定方法；B、共存药物、辅料、附加剂有干扰时，可考虑增加预处理或改进方法，排除干扰后用原料药的测定方法；C、降解产物有干扰时，可选用专属性较高的方法；D、主药含量很小的制剂可选用灵敏度较高的方法，常用紫外分光光度法。但应注意避免溶剂或降解产物的干扰，选用的波长应具有合适的峰形和吸收，E1%在100以上，应尽量减少使用有机溶剂，尤其避免使用有毒作用的溶剂；E、含量测定法应能适用于含量均匀度和溶出度的共同应用，三种测定尽可能用相同的溶剂；F、复方制剂的含量测定，若不能直接采用吸收系数法，而又无其它适宜方法时，也可用合适的计算分光光度法，对于含三个或三个以上组分的制品不宜选用此法；G、对于所含杂质或赋形剂干扰含量测定，需先经繁杂的分离才能测定，或各成分间互相干扰的制剂或复方制剂，可选用高效液相色谱法。

第二节 片剂分析

片剂系指药物与适宜的辅料通过制剂技术制成片状或异性片状的制剂，主要供口服应用。 一、片剂组成

片剂除主要成分之外，还有一些辅料（赋形剂）。一般是淀粉、糖粉、碳酸钙、硫酸钙以及少量的硬脂酸镁、滑石粉等。由于辅料存在，常干扰主药的含量测定，但主要含量大时，可以采用直接测定法，因它不受辅料影响，或影响可以忽略不计。

例如：药典中，中和法测定阿司匹林、谷氨酸，碘量法测定安乃近片，亚硝酸钠测定磺胺类药物的片剂，都不需要分离辅料，而直接进行滴定。 二、片剂的分析步骤

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1、外观观察：包括外观色泽、臭、味等物理性状； 2、鉴别：鉴别药品的真伪；

3、检查：检查片剂在生产过程和贮藏过程中的杂质检查、常规片剂剂型检查（如硬度等）、

微生物检查（如细菌、霉菌数及活螨检查）。 5、 含量测定：判断是否符合药品质量标准 三、鉴别

片剂的鉴别是已知物的确证试验。一般选用专属性强、附加成分无干扰或易于消除干扰的化学鉴别试验。

利用化学反应的外部特征（溶液颜色的改变，沉淀的生成或溶解，产生气体或荧光等）做鉴别试验。

片剂鉴别一般不采用红外吸收图谱法，是因为片剂中提纯主药比较复杂。但也有例外，棕榈酸氯霉素、螺内酯片等。

1、附加成分无干扰，直接鉴别；

2、将片剂中的不溶性辅料虑过或离心沉淀，取滤液或上清夜进行鉴别； 3、用有机溶剂提取主药后进行鉴别； 四、检查 （一）、片剂的常规检查

片剂的常规检查包括重量差异试验、崩解时限试验、片剂的厚度与直径均匀度试验、硬度试验、含量均匀度试验和溶出度检查 1、重量差异检查法：

重量差异定义：系指以称重法测定每片的片重与平均片重之间的差异程度。 片剂重量差异的限度，应符合下列有关规定： 平均重量 重量差异限度 0.30g以下 ±7.5％ 0.30g或0.30g以上 ±5.0％ 检查方法：

取药片20片，精密称定总重量，求平均片重，再分别称定各片的重量，每片重量与平均片重相比较（凡无含量测定的片剂，每片重量与标示片重比较），超出重量差异限度的药片不得多于2片，并不得有1片超出限度的1倍。 操作注意事项： （1）、操作时，应戴手套或指套，勿用手直接接触供试品，应用平头镊子拿取片剂； （2）、易吸潮的供试品须放置在密闭的称量瓶，尽快称量； （3）、凡规定检查含量均匀度的片剂，可不进行重量差异的检查。 2、崩解时限检查法

崩解定义：系指固体制剂在检查时限内全部崩解溶散或成碎粒，除不溶性包衣材料或破碎的胶囊壳外，应通过筛网。

测定时应使固体制剂在液体介质中，随着崩解仪器吊篮上下移动，发生崩解，以供试品通过筛网的时间来控制。

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药物分析教案

检查装置：崩解仪 检查法：温度：37±1℃

调节水位高度使吊篮上升时筛网在水面下25mm，下降时筛网距烧杯底部25mm， 速度：30～32次/分钟

除另外规定，一般取药品6片，按规定检查，应在15分钟内全部崩解，如有1片崩解不完全，应另取6片复试。

3、片剂的溶出度和含量均匀度检查 （二）、杂质检查

根据附加成分有无干扰，可分为 1、直接检查

2、消除干扰后检查：溶解过滤取滤液，离心沉淀取上清夜，用有机溶剂提取等。 五、含量测定 （一）、取样方法

一般取片剂20片，精密称定重量，除以骗数，计算平均片重(可用于片重差异限度检查)，再将20片研细，精密称定适量，按规定方法测定含量 （二）、含量测定方法 1、直接测定

赋形剂在片剂中的存在，对主药无影响，或主药含量较大，影响因素很小，可以忽略不计，则可采用直接测定方法。如：碘量法测定安乃近 2、赋形剂的干扰及排除

赋形剂的存在对主药测定有干扰时，应根据它们的性质和特点设法排除。 （1）、糖类的干扰及排除

赋形剂中如含有淀粉、糊精、蔗糖、乳糖，它们经水解后均能产生葡萄糖，葡萄糖为醛糖，可以被氧化剂氧化成葡萄糖酸。

CHOHCOHHOCHHCOHHCOHCH2OHCOOHHCOHHOCHHCOHHCOHCH2OH

葡萄糖 葡萄糖酸

为了排除强氧化剂（如高锰酸钾）在测定主药含量时的干扰，一般采用氧化性较低的氧化剂（如硫酸铈）作滴定剂。如硫酸亚铁片、富马酸亚铁片含量测定。 （2）、硬脂酸镁的干扰及排除

硬脂酸镁的镁离子对络合滴定有干扰，在非水滴定中，一般影响较小，但当主药含量较

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少时，而硬脂酸的量较多时，就会消耗高氯酸滴定液，使测定结果偏高。 消除方法：

A、经有机溶剂提取后排除干扰。

B、添加掩蔽剂排除干扰，一般常用掩蔽剂：草酸、硼酸和酒石酸，其中尤以酒石酸最佳。 （3）、滑石粉、淀粉的干扰及排除

赋形剂中如含有滑石粉、淀粉，因在水中不易溶解，而使溶液混浊，所以对比色法、比浊法、比旋度法都有影响，采用溶解滤除法或提取容量法除去干扰。 （4）、硫酸钙、碳酸钙的干扰及排除

由于钙离子的存在，在络合滴定测定含量时会有干扰，采用方法一般加入掩蔽剂或分离除去，或改用其他方法。 六、含量测定结果计算

一般多以“按标示量计算的百分含量”

按标示量计算的百分含量＝每片含量/标示量×100％

酒 酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒=A/E×1%×酒 酒酒酒酒100ml/10ml酒×酒酒 酒 酒酒100ml酒×酒酒酒酒酒酒酒酒×酒酒酒×100%

酒 酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒=

TFV×酒酒酒酒酒酒酒酒×酒酒酒×100%

第三节 注射剂分析

一、注射剂分析的基本步骤

首先观察注射剂的色泽和澄明度，然后进行鉴别试验、PH值检查、注射剂常规检查、含量测定 二、鉴别

分为直接鉴别和消除干扰后鉴别，基本同片剂。 三、注射剂的常规检查 （一）、一般检查：注射液的澄明度检查；注射液的装量限度检查；注射液的热原试验；注射液的无菌试验。 （二）、特殊检查

1、注射液中不溶性微粒的检查：用以检查静脉注射液中（装量100ml以上）中的不溶性微

粒。除另有规定外，每1ml中含10um以上的微粒不得超过20粒，含25um以上的微粒不得超过2粒。

2、少数以植物油为溶剂的注射液，还要检查植物油的碘值，酸值及皂化值。 四、含量测定

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药物分析教案 （一）、直接测定法

1、重量法，测定沉淀物的重量

2、旋光度法，如葡萄糖注射液含量测定 （二）、附加成分的干扰及排除

1、酸或碱 如用盐酸调节酸度，则不能用银量法

2、等渗溶液 一般以氯化钠调节渗透压，氯化钠存在，干扰测定 3、助溶剂 注射液中常添加助溶剂，帮助主药溶解。 4、水份 水份影响非水滴定

5、抗氧剂 常用抗氧剂：亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠和硫代硫酸钠

加入丙酮或甲醛消除 五、注射液含量测定计算 计算公式基本同片剂

第四节 复方制剂的含量分析

复方制剂的分析比原料药和单方制剂复杂，不仅要考虑辅料对主药的干扰，还要考虑主药之间的干扰。

复方制剂的含量测定，一般采用以下几种方法：

1、不经分离分别测定各成分：如主药之一有旋光性，可用旋光度测定，主药之一有紫外吸

收，可用紫外方法测定，又如葡萄糖氯化钠注射液。 2、经分离后分别测定含量 3、只测定主药成分

特别是中药复方制剂中，测定其中一味或几味主药成分 4、不测定含量 一般较少。

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