胃癌及癌前病变组织中IGF2的表达及意义

维普资讯 http://www.cqvip.com ・７００・　广　西　医　科　大　学　学　报ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＧＵＡＮＧＸＩ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ　２００７　Ｏｃｔ　２４（５）ＲＳＩ　胃癌及癌前病变组织中ＩＧＦ２的表达及意义　覃江梁增文黄振录　南宁５３００２１）　（广西壮族自治区人民医院消化内科摘要　目的：探讨胰岛素样生长因子２（ＩＧＦ２）在胃癌及癌前病变组织中的表达及意义。方法：应用免疫组织化学ＳＰ方法，对　４３例胃癌组织、１７例异型增生组织、１　５例肠上皮化生组织及４３例正常胃黏膜组织中ＩＧＦ２的表达进行检测。结果：免疫组化　结果显示，胃癌组ＩＧＦ２表达水平为０．８６５　１±０．０７６　２，异型增生组为０．７８４　２土０．０７１　８，肠化生组为０．５５３　８±０．０４８　７，正常　组织为０．２６４　１±０．０４２　５。胃癌组与正常对照组、癌前病变组比较，差异均有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１，Ｐ＜Ｏ．０５）。结论：ＩＧＦ２　过表达与胃癌发生和发展有关，可能是胃癌的早期分子标记。　关键词　胃癌；胰岛素样生长因子２；免疫组织化学　中国图书资料分类法分类号　Ｒ７３５．２　胃癌的发生是一个多阶段、多步骤渐进的过程，其发生、　ＩＧＦ２的棕黄色阳性表达颗粒的平均吸光度Ａ值。　发展与多种癌基因、抑癌基因的调控和表达、多种生长因子　的活性密切相关。胰岛素样生长因子２（ｉｎｓｕｌｉｎ—ｌｉｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　２，ＩＧＦ２）是一种有丝分裂因子，近年来研究发现，ＩＧＦ２　与多种肿瘤发生密切相关　］。目前ＩＧＦ２与胃癌关系的研究　１．３统计学分析：应用ＳＰＳＳ１０．０统计软件对数据进行方差　分析，结果以均数±标准差（　土Ｓ）表示，Ｐ＜Ｏ．０５为差异有　统计学意义。　少见报道。本研究应用ＳＰ免疫组化方法，通过检测胃癌及　癌前病变组织中ＩＧＦ２的表达，探讨其在胃癌发生中的作用。　２　结　果　ＩＧＦ２阳性表达定位于细胞质。在正常胃黏膜组织中，　ＩＧＦ２呈阴性或弱阳性表达，仅在少数腺上皮细胞胞质中见少　量浅淡棕黄色阳性表达（图１）。在肠上皮化生和异型增生组　１材料和方法　１．１　材料：收集２００４年６月至２００６年６月广西壮族自治区　人民医院手术切除并经病理证实的胃癌标本４３例，其中男　２８例，女１５例，年龄２７－－８２岁，中位年龄５６．５岁，以及距离　癌组织１０　ｃｍ以上的相对应正常胃黏膜组织４３例。在上述　病例癌旁组织中共检出肠化生组织１５例、异型增生组织１　７　例。所有标本均经１００　ｍｌ／Ｌ甲醛固定，常规石蜡包埋，３　ｍ　连续切片待用。主要试剂兔抗人ＩＧＦ２抗体和ＡＢＣ试剂盒　购自ｊＥ京中山生物技术有限公司　１．２方法：免疫组化染色采用ＳＰ法。石腊切片常规脱腊，　３０　ｍｌ／ＬＨ２Ｏ２甲醇溶液室温孵育１５　ｒａｉｎ，ＰＢＳ洗涤５　ｒａｉｎ×２　织中，ＩＧＦ２表达明显增多、增强，可在部分杯状细胞、不典型　增生细胞胞质中见有中等强度的阳性表达颗粒（图２）。在胃　癌组织中，ＩＧＦ２则呈强阳性表达，几乎所有癌变细胞胞质中　均见深染的棕黄色阳性表达颗粒（图３）。ＩＧＦ２的表达水平　随胃黏膜组织学形态的改变而呈增高趋势，表现为正常胃黏　膜＜肠上皮化生组＜异型增生组＜胃癌组，其变化趋势有显　著差异（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），见表１。　遍后，用０．０１　ｍｏｌ／Ｌ的柠檬酸缓冲液（ｐＨ６．０）加热至９２～　９６℃修复抗原１５　ｒａｉｎ，冷却后滴加正常兔血清封闭１０　ｒａｉｎ，　而后用ＩＧＦ２一抗４℃孵育过夜；次日取出切片以ＰＢＳ冲洗　后，再依次滴加生物素化二抗、链酶卵白素；最后ＤＡＢ显色，　苏木素复染　常规乙醇脱水、二甲苯透明、中性树胶封片保　存。光镜下观察并分析ＩＧＦ２表达情况。ＩＧＦ２抗体稀释度　为１：１００。用ＰＢＳ代替一抗作阴性对照。图象分析：用　ＨＰＩＡＳ－１０００型全自动医学图像彩色分析系统进行图像半定　量分析，每张切片随机选取５个视野，测定胃黏膜组织中　图１　ＩＧＦ２在正常胃组织中的表达　ＳＰ法×２００　＊基金项目：广西壮族自治区自然科学基金资助（桂科基０６３９０６８）　１病理科　收稿日期：２００７—０３—１０　维普资讯 http://www.cqvip.com

覃　江，等．胃癌及癌前病变组织中ＩＧＦ２的表达及意义　源ＩＧＦ２基因敲除降低ＩＧＦ２的产量后发现，腺瘤的数目和体　积都有所减少　］。　本实验结果显示，胃癌组织中ＩＧＦ２表达水平显著高于　正常胃黏膜组织（Ｐ＜Ｏ．００１），提示ＩＧＦ２的过表达亦可能在　胃癌的发生中起着重要作用。胃癌的发生很少直接从正常　胃黏膜上皮产生，在癌变之前多数经历较长的演变过程，即　由正常胃黏膜转变成胃癌前病变，部分再发展成胃癌。较为　公认的人肠型胃癌发生模式是Ｃｏｒｒｅａ提出的：“正常胃黏膜　一肠上皮化生一异型增生一胃癌，ｆ８３。目前普遍认为，胃黏　膜异型增生和大肠型肠上皮化生是胃癌癌前病变　］。本研　究中，在４３例胃癌旁组织中分别检出１７例异型增生和肠上　图２　ＩＧＦ２在胃癌前病变组织中的表达ＳＰ法×２００　皮化生１５例，检测结果显示，ＩＧＦ２的表达在肠上皮化生时已　开始增强，在异型增生时进一步升高，到胃癌时表达最为显　著，ＩＧＦ２的表达在正常胃黏膜、癌前病变组织、胃癌组织中呈　逐级递增的趋势，提示ＩＧＦ２的过表达可能促使病变细胞的　恶性转化，与胃癌发生的早期事件有关。ＩＧＦ２可能可作为胃　癌的一个早期分子标记，对胃癌的早期发现有诊断意义。　目前研究认为，印迹状态改变，主要是印迹丢失现象导　致父系等位基因表达的ＩＧＦ２基因转为双等位基因表达，基　因产物ＩＧＦ２因而成倍增加、过量表达＿】］。本研究结果表明，　胃癌前病变发展至胃癌的过程与ＩＧＦ２的过表达密切相关。　因此，对有高水平的ＩＧＦ２的肠化生和异型增生患者，应定期　复查、追踪随访。若能对其进行针对性的干预，有望阻抑癌　图３　ＩＧＦ２在胃癌组织中的表达ＳＰ法ｘ　２００　变的发生，最终达到一级预防的目的。　表１　ＩＧＦ２在胃癌及癌旁组织中的表达（平均吸　参　考　文　献　光度Ａ值，　土Ｓ）　１　Ｊｉｒｔｌｅ，ＲＬ．Ｇｅｎｏｍｉｃ　ｉｍｐｒｉｎｔｉｎｇ　ａｎｄ　ｃａｎｃｅｒ．Ｅｘｐ　Ｃｅｌｌ　Ｒｅｓ，１９９９，２４８（１）：１８—２４．　２　Ａｖｅｌｉｃ　Ｋ，Ｋｏｌａｋ　Ｔ，Ｋａｐｉｔａｎｏｖｉｃ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ：　ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　２（ＩＧＦ　２）ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅ—　ｃｅｐｔｏｒｓ（ＩＧＦ　１Ｒ　ａｎｄ　Ｍ６一Ｐ／ＩＧＦ　２Ｒ）．Ｊ　Ｐａｔｈｏｌ，２００３，　２０１（３）：４３０－４３８．　３　Ｍｕｌｌｅｒ　Ｓ，Ｚｉｒｋｅｌ　Ｄ，Ｗｅｓｔｐｈａｌ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｇｅｎｏｍｉｃ　ｉｍ—　注：　与其它各组比较，均Ｐ＜Ｏ．０１；　与肠上皮　ｐｒｉｎｔｉｎｇ　ｏｆ　ＩＧＦ２　ａｎｄ　Ｈ１９　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｍｅｎｉｎｇｉｏｍａｓ．Ｅｕｒ　Ｊ　化生组比较，Ｐ＜Ｏ．０１　Ｃａｎｃｅｒ，２０００，３６（５）：６５１－６５５．　３　讨　论　４　Ｃｕｉ　Ｈ，Ｃｒｕｚ　Ｃｏｒｒｅａ　Ｍ，Ｇａｒｄｉｅｌｌｏ　ＦＭ，ｅｔ　ａ１．Ｌｏｓｓ　ｏｆ　ＩＧＦ２　ｉｍｐｒｉｎｔｉｎｇ：ａ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｍａｒｋｅｒ　ｏｆ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ＩＧＦ２是由印迹基因ＩＧＦ２编码的６７个氨基酸组成的单　ｒｉｓｋ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００３，２９９：１　７５３—１　７５５．　链多肽，生理条件下主要由肝脏合成，可通过自分泌或旁分　５　张锋锐，何小兵，杨玉华，等．大肠癌中胰岛素样生长因　泌的方式作用于细胞表面的ＩＧＦ２受体（主要通过Ｉ型受体）　子２基因的印迹状态和表达．中华医学遗传学杂志，　而发挥其生物学效应［２］。ＩＧＦ２是一种重要的促胚胎细胞生　２００３，２０（１）：３１－３４．　长因子，也是一种促有丝分裂肽，具有促进细胞有丝分裂、胚　６　Ｍａｓａｋａｚｕ　Ｋ，Ｈｉｄｅｔｏｓｈｉ　Ｈ，Ｍｏｔｏｎｏｂ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ｆｒｅｑｕｅｎｔ　胎形成、产后生长发育等作用，生理条件下对胚胎的正常生　ｌｏｓｓ　ｏｆ　ｉｍｐｒｉｎｔｉｎｇ　ｏｆ　ＩＧＦ２　ａｎｄ　ＭＥＳＴ　ｉｎ　ｌｕｎｇ　ａｄｅｎｏｃａｒｃｉ—　长发育有重要作用，病理条件下能刺激肿瘤细胞的恶性增　ｎｏｍａ．Ｍｏ—ｌｅｃｕｌａｒＣａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ，２００１，３１：１８４—１９１．　殖　］。　７　Ｈａｓｓａｎ　ＡＢ，Ｈｏｗｅｌｌ　ＪＡ．Ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ＩＩ　近年来研究发现，在肝癌、肺癌、卵巢癌、结肠癌以及白　ｓｕｐｐｌｙ　ｍｏｄｉｆｉｅｓ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａ．１　ａｄｅｎｏｍａ　ｉｎ　ＡｐｃＭｉｎ／　血病等多种肿瘤中都出现了ＩＧＦ２过表达现象，提示ＩＧＦ２是　＋ｍｉｃｅ．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２０００，６０：１　０７０—１　０７６．　８　Ｃｏｒｒｅａ　Ｐ．Ａ　ｈｕｍａｎ　ｍｏｄｅｌ　ｏｆ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ．　肿瘤发生的相关因素＿５捌。ＩＧＦ２已被认为是许多肿瘤重要　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，１９８８，４８（１３）：３　５５４—３　５６０．　的自分泌生长因子，其过度表达已被证实有促进细胞增殖、　９　Ｈａｍｉｌｔｏｎ　ＳＲ，Ａａｈｏｎｅｎ　ＬＡ．Ｗｏｒｌｄ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ　恶性转化的作用。在对人类结肠多发性腺瘤性息肉病的动　ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｕｍｏｕｒｓ．Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ｇｅｎｅｔｉｃｓ　ｏｆ　物模型小鼠的研究中发现，促进ＩＧＦ２过表达可致结肠腺瘤　ｔｕｍｏｕｒｓ　ｏｆ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｓｙｓｔｅｍ．Ｌｙｏｎ：ＩＡＲＣ　Ｐｒｅｓｓ，２０００．　数量增加，体积增大，并促进了腺瘤的恶性转化。而通过父　２５３—２５５．