第5卷第3期 2003年9月
农药学学报.5 No.3Vol2003
西瓜种子带菌检测及杀菌剂消毒处理效果 吴学宏, 刘西莉, 刘鹏飞,,3 (中国农业大学,)
摘要:采用离体平皿法对来自新疆等4、分离纯化和鉴定,并测定了7。结果表明,种子表面携带的优.、根霉属Rhizopusspp.、曲霉属Aspergillusspp.、交链孢属 根霉属和曲霉属;不同Alterna.Fusariumspp.;种子内部寄藏真菌主要为青霉属、 品种之间种子表面携带真菌种类差异较大,种子内部寄藏真菌种类差异不明显;种壳带菌率一般高于种仁带菌率。15% ・霜・福悬浮种衣剂、福美双和代森锰锌对种子带菌消毒效果优于多菌灵、敌磺钠、 霉灵、拌种灵和甲霜灵。 关键词:西瓜;种子带菌;杀菌剂;消毒处理
中图分类号:S482.2;S436.42 文献标识码:A 文章编号:100827303(2003)0320039206
西瓜是我国重要的经济作物,近年来生产发展迅速,种植面积约占世界总面积的40%[1,2]。产前对种子进行保健处理是提高播种品质和防治西瓜种苗病害最简单、经济、有效的方法之一[3～5]。西瓜种子处理技术的开发和应用建立在对种子的带菌种类和健康状况以及种苗期主要种传和土传病害发生情况研究的基础之上。国内外有关学者在这方面进行的研究工作表明,印度栽培的主要西瓜品种种子传带的真菌种类为
Rhizoctoniaspp.,Fusariumspp.,Colletotrichumspp.,Alternariaspp.,Macrophominaphaseolina,Aspergillusniger,
[6],我国部分西瓜品种种子寄藏真菌主要为镰孢属
(FusariumPenicilliumspp.andRhizopusspp.
黑斑oxysporumf.sp.niveum,F.semitectum,F.equiseti,F.graminearum,F.cuneiforme)、 病菌Alternariacucumerium、根霉属Rhizopusspp.等[7～10
]。国内外的研究报道各有异同之处。本试验旨在对我国新疆、安徽、北京和福建等西瓜主产区栽培的14个品种进行种子带菌检测和杀菌剂消毒处理,据此筛选出合适的药剂,以期为生产中西瓜种子处理防治种传真菌病害提供理论依据和技术指导。
1 材料与方法 1.1 西瓜品种
西瓜品种共14个:火洲一号,早佳8424,郑杂9号(新疆新特丽种苗有限公司提供);金花宝(新疆新丰种子有限公司提供);黑蜜二号(新疆阜康市农业技术服务公司提供);兴农一号,京欣一号(北京航兴农业技术服务中心提供);特大红宝王(香港蔡兴利菜种行有限公司提供);新红宝,西农8号(安徽合肥丰乐种业有限责任公司提供);花龙,深新一号,裕龙17号,百龙(福建厦门市农龙种苗公司提供)。
:吴学宏(19722),男,湖北钟祥人,硕士,助理研究员,主要从事种子病理和药理学研究工作.基金项目:国家自然科学基金资助项目(30070864). 40农 药 学 学 报.5Vol 1.2 供试杀菌剂
50%福美双(thiram)WP、50%多菌灵(carbendazi70% 霉灵
(hymexazol)WP、m)WP、
70%代森锰锌(mancozeb)WP、70%敌磺钠(fenaminosulf)WP及35%甲霜灵
(metalaxyl)拌种剂均为市售;质量分数为1%和5%的NaClO(自行配制);30%拌种灵(iazol)种衣剂、15% ・霜・福悬浮种衣剂(hymexazol∶mth=)由中国农业大学种衣剂研究发展中心提供。 1.3 种子带菌检测[11～13]
1.3.1粒种子,放入100mL锥形瓶中,加入25mL10mL,以2000rmin的转速离心10min,弃上清液,再
[14]加入3mL浮载后吸取100ΛL加到直径为9cm的PDA平板上,涂匀,每
个处理4。相同操作条件下设无菌水空白对照。放入25～28℃温箱中黑暗条件下培养5d后观察,记录种子外部带菌种类和分离比例。
1.3.2 种子内部带菌检测 将每个品种的种子在5%NaClO溶液中浸泡5min,用无菌水冲洗3遍,取其中40粒种子将种壳和种仁解剖开,将种仁放置在1%NaClO溶液中浸泡3min,用无菌水冲洗3遍。将同一品种的整粒种子、种壳和种仁分别均匀摆放在直径为9cm的PDA平板上,每皿摆放10粒或10个组织块,每个处理4次重复。在25～28℃温箱中12h光照黑暗交替下培养5～7
d后检查,记录种子带菌情况、不同部位的真菌种类和分离频率。
1.4 种子带菌鉴定
将分离到的真菌分别进行纯化、镜检和转管保存。根据真菌培养性状和形态特征,参照文献[15,16]进行鉴定。
1.5 药剂消毒处理效果检测
供试西瓜种子分别进行以下处理:50%福美双WP、50%多菌灵WP、70% 霉灵WP和70%代森锰锌WP按药种质量比(下同)1∶200拌种;35%甲霜灵拌种剂按药种比1∶333拌种;70%敌磺钠WP按药种比1∶120拌种;30%拌种灵种衣剂按药种比1∶300包衣;15% ・霜・福种衣剂按照1∶30、1∶40和1∶50的药种比分别进行包衣。各处理种子均匀摆放在直径为9cm的PDA平板上,每皿10粒,每个处理4个重复,在25～28℃温箱中12h光照黑暗交替条件下进行培养,3～7d后记录种子带菌情况和药剂的消毒处理效果。2 结果与分析 2.1 西瓜种子外部带菌检测结果
不同品种西瓜种子外部携带的真菌差异较大(见表1),早佳8424、金花宝和兴农一号外部带菌率较高,达72%以上,种子表面携带的优势菌群主要为青霉属Penicilliumspp.、根霉属
曲霉属Aspergillusspp.和镰孢属Fusariumspp.。花龙、深新一号和百龙的种Rhizopusspp.、
子外部带菌率较低,为13%～14%,青霉属、镰孢属和根霉属为优势菌群。此外,郑杂9号、金花宝种子外部分别检测到丝核菌属Rhizoctoniaspp
.和毛霉属Mucorspp.。火洲一号、兴农一号、特大红宝王、花龙、深新一号5个品种的种子外部均携带镰孢属,郑杂9号、特大红宝王、京欣一号和裕龙17号的种子外部均携带交链孢属Alternariaspp.。
No.1吴学宏等:西瓜种子带菌检测及杀菌剂消毒处理效果41
Table1 Speciesandproportionofseed2bornefungionthesurfaceofwatermelonseeds
VarietyofwatermelonHuozhouyihaoZaojia8424ZhengzajiuhaoJinhuabaoXingnongyihaoTJingxinyihaoHeimierhaoXinhongbaoXinongbahaoHualongShenxinyihaoYulongshiqihaoBailong
Numberofculti24040404040404040404040
Numberofseed2232924282016201913142112 Speciesandproportionofseed2bornefungi(%)
seedswithPenici2Rhi2Fusa2Asper2Alter2OtherRateof
57.5a72.5a75.0a70.0a50.0b40.0b40.0b47.5b32.5c35.0c52.5b30.0c 66.7.23
11.1.860.675.016.7 ..—— 11.1
—— 5.56.1 —— 8.316.7 5.6 —
16.733.3 —— 16.659.1
—
16.740.977.818.24.550.0 ——————— 12.57.67.6 —
22.263.650.025.062.523.1 ———— 25.025.0 —— 18.245.5 ————— 23.1 —— 23.146.2 —
23.146.2 —— ——
Note:“—
”showsthatnofunguswasdetected.Sameletterinthesamecolumnmeansthatthe
differenceisnot significantatP0. 05
.Thesameasinthefollowingtables.level
2.2 种子内部带菌检测结果
结果(见表2、表3)表明,不同品种西瓜种子内部所带真菌种类差异不明显,种壳内青霉属、根霉属和曲霉属的分离频率较高,种仁上青霉属和曲霉属的分离频率较高,并且种壳的带菌率一般高于种仁的带菌率。火洲一号、早佳8424、
郑杂9号、金花宝、特大红宝王、新红宝和裕龙17
号7个品种的种壳内部带菌率均高于50%,而京欣一号、花龙、深新一号和百龙的种壳内部带菌率均低于30%。所有供试品种的种仁带菌率除黑蜜二号外,均低于30%,其中西农8号和花龙的种仁上未分离到真菌。
在火洲一号和黑蜜二号的种壳上仅分离到交链孢属,在火洲一号、金花宝、兴农一号和裕龙17号的种仁上仅分离到青霉属,在早佳8424、特大红宝王和黑蜜二号的种仁上均分离到镰孢属和交链孢属。 2.3 药剂对种子的消毒效果
结果(见表4)表明,福美双、代森锰锌和15% ・霜・福种衣剂用于西瓜种子处理具有良
好的表面消毒效果,优于多菌灵、甲霜灵、敌磺钠和次氯酸钠。经福美双和代森锰锌处理后种子带菌率小于15.0%,种子携带的真菌主要为曲霉属、青霉属和镰孢属。种衣剂按照1∶30、1∶40、1∶50的药种比包衣处理后种子的带菌率小于12.5%,种子携带的真菌主要为青霉属
和曲霉属。多菌灵、甲霜灵、敌磺钠处理后种子携带的真菌主要为根霉属、交链孢属和镰孢属,霉灵、拌种灵和次氯酸钠处理后种子携带的真菌主要为根霉属、曲霉属,其次为镰孢属。
42农 药 学 学 报.5Vol
Table2 Speciesandfrequencyofinternallyseed2bornefungi ofwatermelonseeds(hullofseed)
VarietyofwatermelonHuozhouyihaoZaojia8424ZhengzajiuhaoJinhuabaoXingnongyihaoTJingxinyihaoHeimierhaoXinhongbaoXinongbahaoHualongShenxinyihaoYulongshiqihaoBailong
Numberofculti2 Numberofseed2
Rateofseedswith 2(%)
Rhi2Asper2Alter2F2Penici2Other() 402255.0b
4040404040404040404040 2924201016201912122012
.a.040.0c50.0b25.0c40.0c50.0b47.5b30.0c30.0c50.0b30.0c ..4..060.0 9.127.6 .20.012.5
15.060.075.070.0 —
30.020.0 ————— 31.3
—13.375.0 70.030.0
—63.637.513.325.0——— 20.015.8 —
——4.2—————————— ——
84.216.750.060.0 — 10.0
—————— — 91.
716.720.066.7 ————— —
33.320.033.3 —
3 结论与讨论
1)对来自我国新疆、安徽、北京、福建等西瓜主要产区的14个西瓜主栽品种进行种子带菌
检测。结果表明,不同品种之间外部携带的真菌种类差异较大,而内部寄藏的真菌种类差异不明显。西瓜种子表面携带的真菌优势菌群主要为青霉属、根霉属、曲霉属、
交链孢属和镰孢属,早佳8424、金花宝和兴农一号外部带菌率较高,花龙、深新一号和百龙的种子外部带菌率较低。种子内部寄藏的真菌种类主要为青霉属、根霉属和曲霉属,并且种壳上的带菌率一般高于种仁上的带菌率。郑杂9号、金花宝种子外部分别检测到丝核菌属和毛霉属,在西农8号和花龙的种仁上未分离到真菌。 2)7种杀菌剂和1种种衣剂对西瓜种子都有一定的消毒效果,其中15% ・霜・福种衣剂、福美双和代森锰锌对种子表面消毒处理效果优于其他供试杀菌剂。种衣剂进行包衣处理后明显降低了种子的带菌率。内吸性杀菌剂多菌灵、 霉灵、甲霜灵等对种子内部寄藏的镰孢属和交链孢属有一定的消毒效果,可将其与保护性杀菌剂福美双和代森锰锌进行复配,从而更有效地防治种子传带的病害。
3)当前农业生产上用于西瓜种子处理的药剂主要有次氯酸钠、多菌灵、双效灵、异菌脲(iprodione)、五氯硝基苯(quintozene)、福美双、代森锰锌、甲霜灵、敌磺钠、 霉灵等单剂或几
种杀菌剂的混配制剂[1,8,9]。但它们都只是一种植保措施,不是综合性的良种包衣技术。我国已在粮、棉、油等作物上大面积推广使用种子包衣技术,但西瓜种子包衣的推广面积极小,其中一个重要原因是没有合适的种衣剂。本实验所用的15% ・霜・福悬浮种衣剂处理西瓜种子有较好的消毒效果,对西瓜种苗期病害能起到一定的防治效果,一定程度上解决了由于病害发生
No.1吴学宏等:西瓜种子带菌检测及杀菌剂消毒处理效果43
造成产量损失和品质下降的问题,为实现西瓜的稳产和增产以及提高西瓜品质奠定了基础。
Table3 Speciesandfrequencyofinternallyseed2bornefungiof watermelonseeds(kernelofseed)
VarietyofwatermelonHuozhouyihaoZaojia8424ZhengzajiuhaoJinhuabaoXingnongyihaoTedahongbaowangJingxinyihaoHeimierhaoXinhongbaoXinongbahaoHualongShenxinyihaoYulongshiqihaoNumber ofculti2vatedseeds
404040404040404040404040
Numberofseed2borneseeds 98119121100532
Rateofandp2bornefungi(%)seedswithAsp2Rhi2Alter2()riumzopusnaria.b527.5a22.5a20.0a27.5a22.5a30.0a27.5a0.0c0.0c11.3b7.5b5.0.09.1 —
100.0100.0—22.233.318.2———100.050.0
—72.772.7———33.325.018.2——100.0—50.0—9.1———81.8—16.763.6——————27.3———44.5———————9.1———18.2—25.0—————Table4 Disinfectioneffectofseveralfungicidesonwatermelonseeds (%)
Treatments
thiram76.9a81.5a82.9a88.9a73.9a75.0a96.8a88.0a77.8a85.7a94.7a96.8a96.03carbe2fena2
hyme2manco2meta2amicar2 nda2mino2NaClO
xazolzeblaxylthiazol1∶301∶40
zimsulf30.8b29.6b40.0b63.0b39.1b84.8a66.7b61.3b52.0b48.1b76.2a42.1b80.6a 80.8a51.9b91.4a55.6b43.5b63.6b95.8a87.1a52.0b70.4a84.2a 84.6a92.6a85.7a96.3a87.0a87.9a91.7a93.5a88.0a85.2a89.5a
34.6b29.6b42.9b37.0b52.2b75.8a66.7b67.7b56.0b59.3b31.6c
73.1a3.7c71.4a0.0c65.2b69.7b66.7b87.1a40.0c77.8a52.4b84.2a74.2a64.084.6a51.9b51.4b0.0c52.2b72.7b41.7c58.1b44.0c7.4c57.1b63.2b80.6a88.065.4b84.6a80.8a59.3b100.0a85.2a77.1a97.1a97.1a60.9b82.6a87.0a62.5b95.8a95.8a71.0b96.8a96.8a72.0a88.0a88.0a74.1a96.3a81.5a66.7b100.0a95.2a
1∶5084.6a92.6a97.1a95.7a95.8a96.8a84.0a88.9a85.7a
HuozhouyihaoZaojia8424ZhengzajiuhaoJinhuabaoXingnongyihaoJingxinyihaoHeimierhaoXinhongbaoXinongbahaoHualongShenxinyihaoYulongshiqihao3 63.0b100.0a100.0a92.6a72.7a93.9a100.0a100.0a Tedahongbaowang87.9a
95.2a100.0a61.9b90.3a100.0a71.0b
73.7a100.0a78.9a100.0a80.6a100.0a100.0a100.0a64.0100.0100.0100.088.0100.0100.072.0SCF:Seedcoatingformulationwithactiveingredientshymexazol,metalaxylandthiram. 44农 药 学 学 报.5Vol参考文献:
[1]中国农业科学院郑州果树研究所.中国西瓜甜瓜[M].北京:中国农业出版社,2000.[2]中国农业年鉴编委会.中国农业年鉴[M].北京:[3]李健强,沈其益.].,1994,10(6):16219.
[4]黎裕.种子处理的应用与进展[J].种子,. [5]王胜利.[J,1989,35(4):35.
[6]PushpaK,Borkar.onbornepathogensofpumpkin,cucumber,watermelon andmuJ].JofSandCrops,1999,9(2):2342238.
[7]陈熙,.西瓜叶枯病种子带菌及其传病作用的研究[J].中国蔬菜,1995,(4):123.
[8]程美仁.西瓜种子带菌检验方法,次氯酸钠消毒的效果[J].北方园艺,1995,1:32233. [9]王建明,张作刚,贺运春,等.西瓜种子带菌部位及药剂处理试验研究[J].中国农业大学学报,1998,3(增 刊):75277.
[10]鲁占魁,郭嘉义.籽瓜枯萎病种子带菌率及重茬土壤致病率的研究[J].甘肃农业科技,1998,2:44245.
[11]保尔・尼尔高.见:狄厚渤,李学书,朱之.译.种子病理学[M].北京:农业出版社,1987.587.
[12]AgarwalVK.Techniquesforthedetectionofseed2bornefungi[J].SeedResearch,1976,4:24231.
[13]王润初.种子带菌检测方法[J].河南科技.1989,(122):25226,29. [14]方中达.植病研究方法,第三版[M].北京:中国农业出版社,1998.46. [15]周与良,刑来君.真菌学[M].北京:高等教育出版社,1986.472. [16]魏景超.真菌鉴定手册[M].上海:上海科学技术出版社,1979.780. TestingofSeed-borneFungiofMajorWatermelon VarietiesinChinaandDisinfectionEffectof SeveralFungicidesonSeed-borneFungi
WUXue2hong, LIUXi2li, LIUPeng2fei, WANGHong2mei,
LIJian2qiang3(R&DCenterofSeedCoatingChemicals,ChinaAgriculturalUniversity,Beijing100094,China)
Abstract:Thedisinfectioneffectofseveralfungicidesonseed2bornefungiofwatermelonseedsweredeterminedbymeansofpetri2dishtesting.TheresultsshowedthatPeniclliumspp.,Rhizopusspp.Aspergillusspp.,Alternariaspp.andFusariumspp.werethemainseed2bornefungionthesurfaceof14majorwatermelonvarietiesfromXinjiang,Anhui,BeijingandFujianprovincesinChina;Peniclliumspp.,
.ThefungionthesurfaceRhizopusspp.,Asp
ergillusspp.representedthemaininternallyseed2bornefungi
ofseedweresignificantlydifferentfromeachother,buttheseed2bornefungiinsidetheseedshowednodifference.15%HMTSCF(hymexazol∶metalaxyl∶thiram=3∶2∶10),thiramandmancozebprovideda
.goodcontrolonseed2bornefungi
.fungicidesTheirinhibitingeffectwasmuchbetterthanthatofothertested Keywords:watermelon;seed2bornefungi;fungicide;disinfectioneffect
因篇幅问题不能全部显示，请点此查看更多更全内容