5 种银杏速溶茶饮料中茶多酚和黄酮类化合物含量的测定

分析检测Analysis and Testingdoi:10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2021.03.0595种银杏速溶茶饮料中茶多酚和黄酮类󰀡化合物含量的测定Determination󰀡of󰀡Tea󰀡Polyphenols󰀡and󰀡Flavonoids󰀡in󰀡Five󰀡Instant󰀡Ginkgo󰀡Tea󰀡Beverages◎ 孙　巍，方　辉（南通大学生命科学学院（海洋学院），江苏　南通　226001）(School of Life Sciences (School of Ocean Sciences), Nantong University, Nantong　226001, China)SUN Wei, FANG Hui摘　要：本文随机选取5种品牌的银杏速溶茶产品，依照GB/T 8313—2018对其中儿茶素含量进行HPLC检测分析，用无水乙醇对5种样品做超声波辅助提取。检测结果发现，5种银杏速溶茶的随机抽样测验均符合目前国家标准茶饮料茶多酚最低含量要求。本文通过参照茶饮料国家标准，在一定程度上分析5款泰州市售银杏茶饮料的品质，给消费者提供了参考。关键词：银杏速溶茶饮料；HPLC；茶多酚；黄酮类化合物Abstract：In this paper, five brands of Ginkgo instant tea products were randomly selected, and the catechin content was detected by HPLC according to GB/T 8313-2018. The five samples were extracted by ultrasonic assisted extraction with anhydrous ethanol. Through the test results, it was found that the random sampling tests of 5 kinds of ginkgo biloba instant provides consumers with references.中图分类号：O657.7tea all met the current national standard tea beverage minimum content of tea polyphenols. This article analyzes the quality of 5 ginkgo tea beverages sold in Taizhou to a certain extent by referring to the national standards of tea beverages, and Keywords：ginkgo instant tea beverage; HPLC; tea polyphenols; flavonoids银杏为银杏科银杏属[1]，是一种药食同源的植物。银杏黄酮可以清除自由基，对癌细胞的生长进行抑制，还能改善人体心脑器官循环，保卫人体心脑器官安全。茶多酚是茶叶中酚类化合物及其衍生物的总称，茶多酚的应用广泛，例如，将其作为保鲜剂，可以替换人工合成的抗氧化剂用来保鲜肉制品。银杏茶饮料中起降脂作用的药效活性成分为银杏黄酮和茶多酚。儿茶素是茶多酚的重要成分，占茶多酚总元素的20%[2]，本文选取泰州市售5款不同品牌银杏速溶茶产品，对其儿茶素、黄酮类物质进行检测。1　材料与方法1.1　材料与试剂无水乙醇，冰乙酸、甲醇、乙腈、儿茶素标准品（南京森贝伽生物科技有限公司）、芦丁对照品（上海哈灵生物科技有限公司）、5% NaNO2、5% Al（NO3）3、4% NaOH及纯水。泰州市售5款银杏速溶茶饮料标签如表1所示。作者简介：孙巍（1999—），男，本科在读；研究方向为食品营养。通信作者：方辉（1989—），男，博士，讲师；研究方向为玉米籽粒营养及抗逆性状。E-mail：fanghui8912 @126.com。202/现代食品XIANDAISHIPINCopyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.󰀡样品粉包质量/g配料银杏果、植脂末（果葡糖浆、精炼植物油、磷酸二氢钾、酪蛋白酸钠）、速溶红茶粉、乳清粉、白砂糖及食品添加剂（二氧化硅、食用香精）银杏果、植脂末、全脂奶粉、速溶红茶粉、白砂糖及食品添加剂(麦芽糊精、羟甲基纤维素钠）银杏果、植脂末、速溶红茶粉、白砂糖及食品添加剂（增稠剂）银杏果、植脂末、荞麦、枸杞粉、葛根粉及食品添加剂银杏果、植脂末、紫薯粉、冰糖及食品添加剂Analysis󰀡and󰀡Testing分析检测建议冲泡体积/mL产品质量标准表1　5款银杏速溶茶饮料的配料表及产品质量标准表品牌142240GB 7101—2015品牌230210Q/MABL 0001S—2012品牌3品牌4品牌5392928200210190Q/YLJY 0004S—2012Q/321283YQB03—2007Q/GLSW 0003S—20181.2　仪器与设备数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、Waters600型高效液相色谱仪（杭州瑞析科技有限公司）、控制器、氦气脱气系统、UV-9000S紫外可见分光光度计（广州瑞丰实验设备有限公司）及721可见分光光度计（上海光学仪器厂）。1.3　方法1.3.1　儿茶素含量的测定（1）样品预处理。参照GB 5009.3—2016测得含水率。准确称取银杏速溶茶预混粉包的粉末3 g于 100 mL锥形瓶，加60 mL无水乙醇，置于75 ℃水温的超声波仪器中，250 W超声浸提20 min，趁热抽滤，冷却后定容。（2）标准溶液的配制。分别准确称取表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素、表儿茶素、没食子儿茶素没食子酸酯及儿茶素标准品，配制成100 mg·L的标准母液。用HPLC外标法定量。（3）HPLC色谱条件。A相为0.2%乙酸水溶液，B相为乙腈，流速为1.0 mL·min-1，柱温25 ℃；梯度洗脱：A相梯度变化为0～5 min，93%；5～33 min， 93%→70%；33～38 min，70%→71%；38～46 min， 71%→24%；46～51 min，24%；51～52 min，24%→93%；52～60 min，93%。进样量为5 μL，检测波长280 nm，根据色谱峰的保留时间定性，辅以外标法峰面积定量。1.3.2　黄酮类物质含量的测定（1）绘制标准曲线的方法。取用适量的样品液，-1在5% NaNO2碱性条件中，经Al（NO3）3水解显色，以该溶液为参比溶液。取标准液于比色管，用水稀释，以试剂为参比，在400～680 nm测吸光度，发现510 nm波长吸收最大，故选510 nm做检测波长。分别量取芦丁（0.25 mg·mL-1）进行对照0 mL、 2 mL、4 mL、6 mL、8 mL、10 mL和12 mL，将量取溶液放入50 mL容量瓶内[3]，勾兑蒸馏水到18 mL，加入5% NaNO2 1 mL，静置5 min，加5% Al(NO3)3 1 mL，静置5 min，加4% NaOH 8 mL，用蒸馏水补足到刻度，静置。在510 nm波长处测吸光度。（2）测定黄酮类物质含量的方法。取茶粉末3 g于烧瓶中，加30倍量的乙醇（70%），80 ℃水浴回流，冷却[4]。用乙醇补足消减的重量，过滤后转移。取样品液1 mL放入50 mL容量瓶[5]，加入蒸馏水稀释至12 mL。加5% NaNO2 1 mL，静置5 min，加Al(NO3)3 1 mL，静置5 min，加4% NaOH 8 mL，蒸馏水稀释至刻度，静置，510 nm波长处测定。2　结果与分析2.1　儿茶素含量的测定结果2.1.1　高效液相色谱的定量标准方程儿茶素的标准曲线方程见表2。2.1.2　银杏茶饮料中儿茶素含量高效液相色谱对5种银杏速溶茶进行儿茶素含量测定，见图1。计算儿茶素类浓度和不同银杏茶中儿茶素的绝对总量，详见表3。XIANDAISHIPIN现代食品/203Copyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.分析检测Analysis and Testing表2　儿茶素的标准曲线方程表标准品EGCEC+CEGCGGCGECG线性方程Y=1 419.5x+10 511Y=5 509.9x+11 762Y=4 910.4x+3 913Y=9 427.2x-60 800Y=10 913x-313 100Y=14 122x-56 032相关系数0.992 30.996 20.998 20.999 70.998 60.999 8线性范围/μg·mL-120～39050～55010～45020～35040～60020～400注：表中x为物质含量，其单位μg·mL-1，Y为峰面积；EGC、EC、+C、EGCG、GCG和ECG分别为表没食子儿茶素、表儿茶素、儿茶素标准品、表没食子儿茶素没食子酸酯、没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯。图1　高效液相色谱叠加图表3　5款速溶银杏茶饮料中儿茶素含量表儿茶素EGC/mg·g-1+C/mg·g-1EC/mg·g-1EGCG/mg·g-1GCG/mg·g-1ECG/mg·g-1儿茶素浓度/mg·g-1儿茶素总量/（mg/杯）品牌10.0510.0040.0150.1980.2960.0830.647155.28品牌20.0470.0020.0130.1130.2910.0430.509106.89品牌30.0310.0010.0070.0810.1430.0210.28456.80品牌40.0500.0060.0160.0950.1850.0550.40785.47表4　芦丁对照品测定结果表测定样品空白12345芦丁质量浓度/mg·mL-100.0300.0450.0600.0750.090吸光度00.0090.0210.0340.0470.060品牌50.0770.0090.0690.2140.3170.1640.850161.502.2　黄酮类物质含量的测定结果2.2.1　标准曲线以芦丁质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，所得线性回归方程为y=0.859 3x-0.016 8，相关系数r=0.999 5。测定结果见表4。2.2.2　黄酮类物质含量黄酮含量的计算结果详见表5。204/现代食品XIANDAISHIPINCopyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.󰀡样品品牌1品牌2品牌3品牌4品牌5样品量/g2.9892.9353.0133.0513.072吸光度0.6460.6360.6490.6530.659样品总黄酮/%6.456.476.396.396.44Analysis󰀡and󰀡Testing分析检测平均值/%RSD/%表5　银杏速溶茶饮料的黄酮类含量测定结果表6.4280.5652.3　讨论5种样品的茶多酚和总黄酮含量如表6所示，变异系数如表7所示。表6　5款银杏速溶茶中茶多酚和总黄酮含量表样品品牌1品牌2品牌3品牌4品牌5含水率/%8.408.308.609.208.90总黄酮含量/%茶多酚含量/mg·kg-16.456.476.396.396.443 2352 5451 4202 0354 250最高，品牌3的茶多酚含量最低，综上所述，笔者认为品牌5为5种品牌中的高品质银杏茶饮料。3　结论有医学研究表明，当人体一次摄入茶多酚的剂量达到160 mg时，茶多酚可有效抑制亚硝化反应，产生保健效果，一次摄入480 mg时起到最大抑制作用。按照建议冲泡量，饮用一杯品牌5银杏速溶茶饮料所摄入的茶多酚含量可达到有效量。银杏黄酮对人体肝脏损伤具有较好的生理修复作用，由于人体不能直接合成黄酮类化合物，因此银杏速溶茶作为人体从外界获取黄酮类化合物的途径显得十分重要。银杏茶样品中总黄酮的含量最高为品牌5的6.47%，本文5种样品中的品牌5为5种品牌中的高品质银杏茶保健饮料。参考文献：[1]李月娣.银杏价值及其产业现状分析[J].长春大学学报，2017，27（2）：32-37.[2]蔡啸.茶多酚对体育运动员耐力既有氧训练的促进及提升[J].福建茶叶，2016，38（6）：21-22.[3]张然，徐燕杰，王晶，等.大孔吸附树脂纯化芡实叶中黄酮类物质[J].食品研究与开发，2013，34（19）：32-35.[4]周兰香，黄阿根，谢凯舟，等.分光光度法与HPLC法测定荷叶总黄酮的研究[J].中草药，2002（1）：37-39.[5]王秋亚，曹会兰，闫慧敏.紫外分光光度法测定艾叶中总黄酮含量[J].光谱实验室，2010，27（2）：591.表7　5款银杏速溶茶中茶多酚和总黄酮含量分析结果表样品含水率/%总黄酮含量/%茶多酚含量/mg·kg-1平均值8.686.4282 697标准差0.370.0361 094.7变异系数/%4.260.5640.59茶多酚含量平均值为2 697 mg·kg-1，变异系数为40.59%，数据之间离散程度高，表明不同品牌银杏速溶茶饮料之间茶多酚含量差异明显，茶饮料茶多酚含量差异会对茶饮料质量特性产生影响。国家市场监督管理总局要求茶多酚含量不得低于200 mg·kg-1，5种银杏速溶茶中茶多酚含量为1 420～4 250 mg·kg-1，测定结果表明，泰州市售5款银杏速溶茶中茶多酚的含量均能达到国标要求。经实验测定，含水率、总黄酮含量的平均值分别为8.68%、6.428%，变异系数均小于5%，说明在该5种银杏速溶茶中含水率、总黄酮含量差异不明显。实验结果表明，5款银杏速溶茶饮料的质量指标均符合相关标准，品牌5的茶多酚含量树立节粮意识，珍惜劳动成果。XIANDAISHIPIN现代食品/205Copyright©博看网 www.bookan.com.cn. 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