结核分枝杆菌诊断技术研究进展

中国冶金工业医学杂志　２０１４年第３１卷第５期　Ｃｈｉｎ　Ｍｅｄ　Ｊ　Ｍｅｔａｌｌ　Ｉｎｄｕｓ，Ｏｃｔｏｂｅｒ．２０１４，Ｖｏ１．３１　Ｎｏ．５　要方向，而上述的不足会在人们的努力下被克服，最终，ｉＰＳ细　ｆｒｏｍ　ｕｎｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｍｏｕｓｅ　ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　ｂｙ　Ｏｃｔ４／Ｓｏｘ２／　胞将为治愈人类许多疾病带来新的希望和契机。　参考文献　［１］Ｔａｋａｈａｓｈｉ　Ｋ，Ｙａｍａｎａｋａ　Ｓ．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｆｒｏｍ　ｍｏｕｓｅ　ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ　ａｎｄ　ａｄｕｌｔ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ　ｂｙ　ｄｅｆｉｎｅｄ　Ｍｙｃ／Ｋｌｆ４［Ｊ３．Ｃｅｌｌ　Ｒｅｓ，２００７，１７（１１）：９５９—９６２．　［８］Ｈａｎｎａ　Ｊ，Ｗｅｒｎｉｇ　Ｍ，Ｍａｒｋｏｕｌａｋｉ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｓｉｃｋｌｅ　ｃｅｌｌ　ａｎｅｍｉａ－ｍｏｕｓｅ　ｍｏｄｅｌ　ｗｉｔｈ　ｉＰＳ　ｃｅｌｌｓ　ｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ　ｓｋｉｎ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００７，３１８（５８）：１９２０—１９２３．　［９］　Ｍｉｃｈａｅｌ　Ｊ，Ｂｏｌａｎｄｌ，Ｊｅｎｎｉｆｅｒ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ａｄｕｌｔ　ｍｉｃｅ　ｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２００９，４６１（７２６０）：９１—　９４．　ｆａｅｔｏｒｓ［Ｊ￣．Ｃｅｌｌ，２００６，２６（４）：６６３—６７６．　Ｅｚ］Ｏｋｉｔａ　Ｋ，Ｉｃｈｉｓａｋａ　Ｔ，Ｙａｍａｎａｋａ　ｓ　Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｅｒｍｌｉｎｅ－ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｐｌｕｒｉｐｅｔｅｎｔ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２００７，４４８（７１５１）：３１３—　３１７．　Ｅｌｏ］Ｘｕ　Ｄ，Ａｌｉｐｉｏ　Ｚ，Ｆｉｎｋ　Ｌ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ　ｃｏｒｒｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｕｒｉｎｅ　ｈｅｍｏｐｈｉｌｉａ　Ａ　ｕｓｉｎｇ　ａｎ　ｉＰＳ　ｃｅｌｌ—ｂａｓｅｄ　ｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ，２００９，１０６（３）：８０８－８１３．　［３３　Ｙｕ　Ｊ，Ｖｏｄｙａｎｉｋ　Ｍ　Ａ，Ｓｍｕｇａ—Ｏｔｔｏ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎｄｕｃｅｄ　ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅｓ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒｏｍ　ｈｕｍａｎ　ｓｏｍａｔｉｃ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，　２００７，３１８（５８５８）：１９１７—１９２０．　［１１］Ｒａｙａ　Ａ，Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ—Ｐｉｚａ　Ｉ，Ｇｕｅｎｅｃｈｅａ　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｓｅａｓｅ—ｃｏｒｒｅｃｔｅｄ　ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ　ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｓ　ｆｒｏｍ　Ｆａｎｃｏｎｉ　ａｎａｅｍｉａ　ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｅ４３　Ｍａｈｅｒａｌｉ　Ｎ，Ｓｒｉｄｈａｒａｎ　Ｒ，Ｘｉｅ　Ｗ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｒｅｃｔｌｙ　ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　ｓｈｏｗ　ｇｌｏｂａｌ　ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ　ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ　ａｎｄ　ｗｉｄｅｓｐｒｅａｄ　ｐｌｕｒｉｐｏ－ｔｅｎｔ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ＇］．Ｎａｔｕｒｅ，２００９，４６０（７２５１）：５３—５９．　［１２］Ｗｅｒｎｉｇ　Ｍ，Ｚｈａｏ　ＪＰ，Ｐｒｕｓｚａｋ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｎｅｕｒｏｎｓ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒｏｍ　ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙ　ｉｎｔｅｇｒａｔｅ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ｆｅｔａｌ　ｂｒａｉｎ　ａｎｄ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｓｙｍｐｔｏｍｓ　ｏｆ　ｒａｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ　ｓ　ｔｉｓｓｕｅ　ｃｏｎｔｒ｜ｂｕｔｉ０ｎ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ　Ｓｔｅｍ　Ｃｅｌｌ，２００７，１（１）：５５—７０．　［５］Ｚｈａｏ　ＸＹ，Ｌｉ　Ｗ，Ｌｖ　ｚ，ｅｔ　ａ１．ｉＰＳ　ｃｅｉｌｓ　ｐｒｏｄｕｃｅ　ｖｉａｂｌｅ　ｍｉｃｅ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｅｔｒａｐｌｏｉｄ　ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２００９，４６１（７２６０）：８６—９Ｏ．　［６］Ｍｅｉｓｓｎｅｒ　Ａ，Ｗｅｍｉｇ　Ｍ，Ｊａｅｎｉｓｃｈ　Ｒ　Ｄｉｒｅｃｔ　ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ　ｏｆ　ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ　ｕｎｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　ｉｎｔｏ　ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｎａｔ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，　２００７，２５（１０）：１１７７—１１８１．　ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ，２００８，１０５（１５）：５８５６—５８６１．　［１３］　Ｎａｒａｚａｋｉ　Ｇ，Ｕｏｓａｋｉ　Ｈ，Ｔｅｒａｎｉｓｈｉ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｒｅｃｔｅｄ　ａｎｄ　ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ　ｃｅｌｌｓ　ｆｒｏｍ　ｍｏｕｓｅ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｐｌｕｒｉｐｏ－ｔｅｎｔ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００８，１１８（５）：４９８—５０６．　（收稿日期：２０１４－０４－２９）　［７３　Ｑｉｎ　Ｄ，Ｌｉ　Ｗ，Ｚｈａｎｇ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｒｅｃｔ　ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＥＳ－ｌｉｋｅ　ｃｅｌｌｓ　结核分枝杆菌诊断技术研究进展　腾宏琴　包钢集团第三职工医院检验科，内蒙古包头０１４０１０　中图分类号：Ｒ　５２　文献标志码：Ａ　文章编号：１００５—５４９５（２０１４）０５～０５１２—０３　结核分枝杆菌（ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ，ＭＴ）是一种　生长缓慢，抗酸阳性的棒状杆菌。它可侵犯全身各器官，从而　此外，在ＢＡＣＴＥＣ系统内加入Ｐ一硝基一ａ＿乙酰氨基一８一羟基苯丙　酮（简称ＮＡＰ）继续培养２～６天后，根据其生长指数还可初步　鉴别ＭＴ复合群和非结核分枝杆菌（简称ＮＴＭ），目前在国内　引发全身多系统疾病，以肺结核最为多见。结核分枝杆菌不　易杀灭，少量的结核分枝杆菌可长期潜伏在宿主体内，在一定　条件下又可以恢复为具有活力的原生结核杆菌，从而再次导　致结核病的发生　］。目前，全球大约有１／３的人感染ＭＴＢ，　外已成为结核病诊断的标准参照系统之一。ＢＡＣＴＥＣ—　ＴＢ９６０分枝杆菌全自动快速培养仪，功能与ＢＡＣＴＥＣ－ＴＢ４６０　相似，只是其又在培养管中加入含有ＲＵＴＨＥＮＩＵＭ的荧光　底物，检测标本经前处理接种于该培养管后，如有分枝杆菌存　在，其代谢产物可激发底物ＲＵＴＨＥＮＩＵＭ产生荧光，经扫描　其中５％～１Ｏ％的感染者最终发展成为结核病患者。我国是　全球结核病流行严重的２２个国家之一。因此，在结核病治疗　的初期，准确、快速、可靠的检测，对临床结核病的治疗具有不　可估量的重要意义。　１结核分枝杆菌细菌学检测　后可以自动显示出以生长指数（ＧＩ）为表示的测定结果。　１．２噬菌体药敏法　活的ＭＴ可以保护菌体内的噬菌体免　受噬菌体杀灭剂作用，从而将结核分枝杆菌与噬菌体共同孵　育。噬菌体侵入结核分枝杆菌后大量繁殖，结核分枝杆菌被　研究发现，结核杆菌繁殖由于受　１．１分枝杆菌快速培养法ＳＴＰＫ（Ｓｅｒ／ｔＨＲ蛋白激酶包括ＰｋｎＡ＼ＰＫｎＢ＼ＰＫｎｄ）的控制，　抗结核药物处理时，若结核分枝杆菌耐药，则细菌能存活，加　入噬菌体杀灭剂，位于菌体内部的噬菌体不能被杀死。因此　因其经常处于休眠状态和稳定期，因此生长较为缓慢。目前，　对结核分枝杆菌进行快速培养主要有ＢＡＣＴＥＣ－ＴＢ４６０分枝　杆菌快速培养仪和ＢＡｃＴＥＣ—ＴＢ　９６０分枝杆菌全自动快速培　对其进行再培养后，菌体会释放出噬菌体，从而在琼脂培养基　上有噬菌斑的出现。该法与传统药敏试验法符合率高，可对　标本直接进行检测，无需特殊仪器，只需３天时间，且操作简　单。　养仪这两种仪器。ＢＡＣＴＥＣ－ＴＢ４６０分枝杆菌快速培养仪是一　种专门针对结核杆菌生长缓慢而研发的仪器，它是以放射性　１４Ｃ棕榈酸为特殊碳源的液体培养基来培养结核分枝杆菌，　１．３　噬菌体生物发光法　将含虫荧光素酶表达基因Ｆ—ｆｌｕｘ　插入分枝杆菌噬菌体，当Ｆ－ｆｌｕｘ重组噬菌体进入相应的分枝　在培养过程中结核分枝杆菌消耗碳源，产生放射性ＣＯ。，其放　射性强度与ＭＴ的生长相关，检测标本中ＭＴ只需４～２５天。　杆菌体后，在活菌体内增殖，同时Ｆ－ｆｌｕｘ基因表达产生虫荧光　中国冶金工业医学杂志　２０１４年第３１卷第５期　Ｃｈｉｎ　Ｍｅｄ　Ｊ　Ｍｅｔａｌｌ　Ｉｎｄｕｓ，Ｏｃｔｏｂｅ　ｒ＿２０１４，Ｖ０１．３１　Ｎ０．５　素酶。重组噬菌体表达的虫荧光素酶在体外发光体系中与虫　荧光素及其他因子混合后，虫荧光素酶即可与荧光素作用而　发光，发光强度与荧光素酶的含量呈正比。从而定性和定量　地分析相应的分枝杆菌存活率及其数量。　２分子生物学检测方法　原识别也有差异，此外结核病患者对抗原的识别存在阶段特　异性，从而导致目前任何一个单一的抗原或商品化的组合抗　原检测试剂盒都无法检测出所有结核患者血清中的抗结核抗　体，结核患者的抗体反应是针对许多ＭＴ抗原的。因此，筛选　多个纯化的结核病的特异性抗原组成联合抗原是目前血清学　诊断的研究方向＿４］。　２．１　菌种鉴定法ＰＣＲ是一种根据ＤＮＡ复制原理而设计的　ＤＮＡ或ＲＮＡ体外扩增方法。研究人员根据ＭＴ的重复序　列、蛋白编码基因以及１６ＳｒＲＮＡ基因设计出多种特异引物，　３．１．２体液标本抗结核抗体诊断结核菌素和纯蛋白衍生　物（ＰＰＤ）皮肤试验是最常用、最简便的一种结核分枝杆菌感　通过体外扩增所产生的特异性片段即可简便、快速、灵敏、特　染诊断方法。ＰＰＤ是一种非常复杂的混合物，其包含多种分　异地从多种临床标本中检测出ＭＴ的ＤＮＡ，且只需１～２天　时间，但在检测过程中应注意假阳性和假阴性问题。目前已　有多种商品化的ＭＴ－ＰＣＲ试剂盒。　２．２　ＰＣＲ一直接测序鉴定法　标本的１６Ｓ　ｒＲＮＡ或６５０００（相　对分子质量）抗原基因可用分枝杆菌属特异的引物对其进行　ＰＣＲ特异性扩增后进行测定，比较核苷酸的差异性，从而鉴定　出菌种。目前该方法由于技术要求高，仪器特殊、昂贵，所以　难以推广。　２．３　ＰＣＲ－ＤＮＡ探针鉴定技术ＤＮＡ探针是一种能识别特　异核苷酸序列、带标记的一小段ＤＮＡ分子。分子杂交是其检　测的主要方法。目前，研究人员将ＤＮＡ探针和ＰＣＲ技术结　合，发明了多种ＭＴ　ＩＳ６１１０ＤＮＡ、１６Ｓ、１６Ｓ－２３Ｓ间隔区ｒＤＮＡ　片段探针以及寡核苷酸探针，建立了菌落杂交、斑点杂交、　Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、微孔板杂交和原位杂交等方法，检测的敏感度　和特异度都得到了显著提高。　２．４　ＰＣＲ一限制性片段长度多态性（ＰＣＲ—ＲＦＬＰ）鉴定法　ＰＣＲ－ＲＦＬＰ菌种鉴定法是以分枝杆菌属特异性引物、对标本　中分枝杆菌６５０００蛋白编码基因、１６Ｓ或１６—２３Ｓ　ｒＤＮＡ进行　体外扩增，然后用不同的限制性内切酶对扩增片段进行消化，　最后通过电泳分析酶切图谱对菌种进行鉴定。　２．５　ＰＣＲ基因芯片鉴定法　基因芯片技术是一种将大量核　酸分子以高密度微阵列方式固定在载体上，从而检测出带标　记的待测样品ＤＮＡ的方法。如果扩增产物与探针序列完全　匹配则结合较为牢固则杂交信号较强；反之，如果有单个或多　个碱基错配则信号较弱。这是一种通过比较是否有突变的探　针杂交信号得到结果的大规模分析遗传差异新方法　。　２．６随机扩增多态性ＤＮＡ（ｒａｎｄｏｍｌｙ　ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　ＤＮＡ，ＲＡＰＤ）分析　此项技术是利用一条人工合成的寡核苷　酸引物对整个ＤＮＡ链进行探察，于足够近的间距（２００～２０００　ｂｐ）内，在较低的温度下与匹配或部分匹配的退火位点结合，　从而扩增出多态的ＤＮＡ片段。如果ＤＮＡ链之间存在差异，　产生的ＤＮＡ片段数量及长度就会不同，经电泳将这些产物分　开后，可得到多态性很好的ＤＮＡ指纹图谱，进而可以分型鉴　定　。　３免疫学诊断研究　３．１体液免疫诊断　３．１．１体液标本抗结核抗原诊断　应用酶联免疫吸附测定　（ＥＬＡＳＡ）法检测患者血清中结核特异性抗体，尤其是对菌阴　肺结核、肺外结核、小儿结核病的诊断与鉴别具有重要意义。　但是由于结核病患者的免疫功能存在个体差异，其对ＭＴ抗　枝杆菌共同的抗原，ＰＰＤ皮试阳性并不能鉴别其是因为ＭＴ　复合群感染还是接触环境中ＮＴＭ或卡介苗接种后造成的致　敏，只能根据机体的反应强弱辅助诊断。目前国内、外学者通　过动物模型或临床试验研究纯化抗原、合成多肽和重组蛋白，　筛选致病性结核分枝杆菌表达而ＢＣＧ不表达的、诱导皮肤迟　发型变态反应（ＤＴＨ）的特异抗原，以期建立新的结核皮肤诊　断试剂。　３．２细胞免疫诊断　３．２．１双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测细胞因子水平　近年研究显　示活动性肺结核、结核性胸膜炎或脑膜炎患者血液或局部组　织的Ｔ淋巴细胞、单核细胞或巨噬细胞在ＭＴ抗原的激活下，　释放可溶性白细胞介素２（ＩＬ－２）受体、膜ＩＬ－２受体、　干扰素　（ＩＦＮ－７）、ａ一肿瘤坏死因子、ＩＬ－１８和ＩＬ－８的水平不同，与正常　人或非结核性疾病差异有显著性。　３．２．２　Ｔ一淋巴细胞增殖试验和Ｔ＿细胞亚群分析　ＭＴ特异　的蛋白抗原（如ＥＳＡＴ６、ＣＦＰ１０蛋白等）可刺激结核分枝杆菌　感染的人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）生成大量的ＩＦＮ一　。可　通过酶联免疫斑点试验（ＥｕｓＰ０Ｔ）法检测分泌ＩＦＮ－７的外周　血Ｔ淋巴细胞，从而建立新的灵敏度高、特异度强的诊断结核　分枝杆菌感染特异性方法＿５］。由于结核病患者细胞免疫功能　明显紊乱，其外周血ＣＤ　、ＣＤ　淋巴细胞下降，ＣＤ　Ｔ淋巴　细胞增高，ＣＤ　／ＣＤ卧比值降低，并伴有Ｔ细胞活化功能障　碍，尤其是对于活动性结核病患者更为显著，而且结核性胸腔　积液中淋巴细胞比例、ＣＤ　Ｔ淋巴细胞也显著升高。分析Ｔ　细胞亚群的变化有助于结核性和癌性胸腔积液的鉴别。　４色谱技术诊断研究　结核分枝杆菌细胞中各种组分及含量可以通过高效液相　色谱检测，可依据此对结核分枝杆菌分类进行鉴定，而且还可　以检测体液中分枝杆菌代谢产物，进行结核性脑膜炎和胸膜　炎的病原学诊断。　５结语　综上所述可见常规细菌学检查由于其直观、简便、价廉等　优点，仍将是重要的实验诊断手段。但是分子生物学技术的　迅猛发展，其在结核病的临床诊断目前在临床应用上也有所　突破，必将成为结核病诊断的里程碑。总之，随着结核病研究　的不断深入，结核病的诊断必将会得到不断发展和完善。　参考文献　ＦＩ］李恒德，左建宏，王麓山．结核分枝杆菌耐药机制研究进展［Ｊ］．　现代生物医学进展，２０１３，（１３）１１：２１７５—２１８０．　［２］张江峰，张亚丽，曾照芳．ＰＣＡ技术联合ＤＮＡ芯片检测结核分　中国冶金工业医学杂志２０１４年第３ｌ卷第５期Ｃｈｉｎ　Ｍｅｄ　Ｊ　Ｍｅｔａｌｌ　Ｉｎｄｕｓ，Ｏｃｔｏｂｅｒ．２０１４，Ｖｏ１．３ｌ　Ｎｏ．５　枝杆菌ｒｐｏＢ基因突变ＥＪ］．激光杂志，２０１３，２（３４）：９１—９４．　１－３３武晓林，方维焕，俞盈，等．结核分枝杆菌同源重组基因敲除系　统的构建和应用ＥＪ３．２０１２，５２（９）：１１５１－１１５９．　Ｅｓ］许文炯，王燕，石利民，等．酶联免疫斑点实验与蛋白芯片检测　结核分枝杆菌免疫应答的研究［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２０１３，３　（２３）：６７３－６７６．　［４］刘冰，陈华根．免疫学检测在结核病诊断中的应用［刀．检验医　学与临床，２０１３，１５（１０）：２０２７—２０２８．　（收稿日期：２０１４－０２－２６，修回２０１４－０３—１８）　桥本甲状腺炎综述　王云　马鞍山十七冶医院，安徽马鞍山２４３０００　中图分类号：Ｒ　５８１　文献标志码：Ａ　文章编号：１００５—５４９５（２０１４）０５一Ｏ５１４一Ｏ２　桥本甲状腺炎（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’Ｓ　ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ，ＨＴ），是甲状腺　肿型慢性淋巴细胞性甲状腺炎（ｃｈｒｏｎｉｃ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ　ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ），各年龄组均可发病，主要见于３Ｏ～５Ｏ岁；男女之　破坏。研究发现，逆转录病毒与自身免疫疾病存在密切关系。　某些革兰阴性球菌感染也伴有甲状腺自身抗体产生。已证　明，大肠埃希菌因产生硫脲类物质而具有致甲状腺肿作用，致　病性埃希菌存在于希腊缺碘区水中的含量明显高于非缺碘　区。（５）非含碘药物因素：锂剂用于长期抗精神病治疗时约１／　３病人发生锂相关性暂时性甲状腺功能减退，存在甲状腺自身　抗体者较无抗体者常见。ＩＦＮ—ａ治疗慢性病毒性肝炎及肿瘤　后约２Ｏ　出现甲状腺自身抗体，５　发生临床甲状腺功能减　退。（６）环境：某些环境因素，如煤的有机物污染（包括酚、硫　氢酸盐、间苯二酚等）常引起接触人群甲状腺自身抗体明显增　高。麦胶可能直接触发自身免疫过程。对肠病给予无麦胶饮　食，可有效减少慢性淋巴细胞性甲状腺炎甲状腺功能减退患　者甲状腺激素的替代剂量，同时ＴＰＯＡｂ进行性降低。　２诊断标准　比为１：４～２０；一般男性发病年龄高峰晚于女性１Ｏ～１５年，　起病隐匿，进展缓慢。　１病因　确切病因未阐明，目前研究认为与下列因素有关：（１）自　身免疫，一般认为，慢性淋巴细胞性甲状腺炎的发病是由于抑　制性Ｔ细胞功能特异性缺陷，辅助性Ｔ细胞功能相对增强，诱　发抗体依赖、细胞介导的细胞毒作用的免疫机制。桥本甲状　腺炎患者存在的最重要自身抗体为ＴＧＡＢ，ＴＰＯＡＢ。在疾病　早期阶段，ＴＧＡｂ、ＴＰＯＡｂ均可增高，后来ＴＧＡｂ可消失，　ＴＰ０Ａｂ可存在多年，ＴＧＡｂ、ＴＰ０Ａｂ是有细胞毒性的。经过　甲状腺激素的治疗，这些抗体大部分可以消失。（ｚ）碘摄人　量：在碘摄取最高地区发病率最高，如美国及日本。在低摄人　２．１诊断依据桥本甲状腺炎起病隐匿，进展缓慢，早期的　碘国家慢性淋巴细胞性甲状腺炎的发病率较低。自１９９５年，　我国实行全民食用加碘盐以来各地甲状腺疾病的发病率有明　显上升趋势，滕卫平等通过“碘致甲状腺疾病”流行病学调查　临床表现常不典型。甲状腺肿大呈弥漫性，分叶状或结节性　肿大，质地大多韧硬，与周围组织无粘连。常有咽部不适或轻　度咽下困难，有时有颈部压迫感。偶有局部疼痛与触痛［３　。　随病程延长，甲状腺组织破坏出现甲减。患者表现为怕冷、心　动过缓，便秘甚至黏液性水肿等典型症状及体征。其诊断要　点：（１）高发年龄在３０￣５０岁；（２）甲状腺中度肿大，质地坚硬　发现，碘过量导致自身免疫甲状腺炎显著增高。又如抗心律　失常药胺碘酮含碘量高（３７　），可诱发甲状腺功能减退，常发　生于初始治疗１８个月之中。有些在停药后数月发生。甲状　腺抗体阳性较阴性者患病率增高７倍　］。越来越多的研究表　明，碘摄取的增加可刺激人类及实验动物的自身免疫过程，引　起慢性淋巴细胞性甲状腺炎或Ｇｒａｖａｓ病的发生。给慢性淋　是桥本甲状腺炎首发症状［　；（３）甲状腺功能正常，ＴＰＯＡｂ和　ＴＧＡｂ滴度显著增高，是最有意义的诊断指标，５Ｏ　桥本甲状　腺炎病例出现甲减，血清ＦＴ　、ＴＴ　减低，ＴＳＨ显著增高。部　巴细胞性甲状腺炎所致甲状腺功能减退病人限碘后可使甲状　腺功能恢复正常。日本北部人群调查显示甲状腺抗体阳性患　分病例仅发生亚临床型甲减，即血清ＴＴ　、ＦＴ　正常，ＴＳＨ轻　度增高；（４）疾病晚期碘摄取率减低，甲状腺扫描分布不均，可　者，尿碘排泄率高于正常人群，在限碘后６～８周，高ＴＳＨ、高　ＴＰＯＡｂ及低ＦＴ４均明显好转＿２］。（３）遗传因素：目前致桥本　甲状腺炎的易感基因和遗传类型尚不清楚，多数研究者认为　本病是伴有不同外显率的多基因遗传，而不是由单基因遗传　因素对疾病的发生、发展起作用，大量流行病学证据表明本病　见“冷结节”。甲状腺细针穿刺（ＦＮＡＣ）活检有助于诊断的确　立。　２．２鉴别诊断（１）结节性甲状腺肿：有地区流行病史，甲状　腺功能正常，甲状腺自身抗体阴性或低滴度。ＦＮＡＣ检查有　助鉴别。桥本甲状腺炎显微镜下可见明显的淋巴细胞、浆细　胞浸润和纤维化，大多数病例有淋巴细胞形成，伴有生发中　心。结节性甲状腺肿则为增生的滤泡上皮细胞，没有淋巴细　与多基因遗传易感性有确切相关性。如本病有家族聚集倾　向；自身免疫性甲状腺功能减退症的一级亲属甲状腺自身抗　体的检出率明显高于一般人群。（４）感染：目前尚有感染学　胞浸润。（２）急性化脓性甲状腺炎：发病急，甲状腺肿痛常伴　有红肿，血白细胞及中性粒细胞增多，甲状腺激素测定正常。　局部触痛可有波动感，甲状腺穿刺可抽出脓液。（３）亚急性甲　说，慢性淋巴细胞甲状腺炎一旦感染病毒，可间接诱发甲状腺　细胞表达ＨＬＡ－ＤＲ，并引发一系列抗原产生、抗体形成及细胞