0.25 STC buffer(sucrose-Tirs-calcium buffer): 0.25M sucrose
50mM Tris-HCl(pH 9.0) 5mM CaCl2 20mM NH4Cl
1mM DTT(现用现加) 蛋白酶抑制剂
配好后加入0.2%（V/V）Triton-X-100
1 STC buffer 1M sucrose
50mM Tris-HCl(pH 9.0) 5mM CaCl2 20mM NH4Cl
1mM DTT(现用现加)
操作：
1、加入0.25STC(加入的体积根据细胞量)悬浮，使细胞破碎20min； 2、在2mlEP管中加入1ml 1STC，将悬液1ml缓慢加于其上，分成两层，离心1000rpm，6min，吸去上清，加0.25STC；
3、重复步骤2，离心10min。
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