1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。
2、组织培养实验室必要的设备有 超净工作台、 高压灭菌器 、 空调机 、 天平 、 显微镜 、 蒸馏水发生器等。
3、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的 碳源 ，而且还能维持 培养基渗透压
4、培养基灭菌一般在 108 kPa的压力下，锅内温度达 121 ℃ ，维持 20-30 min。 5、在离体叶培养中，6-BA和KT利于芽 的形成；2,4-D利于愈伤组织 的形成
6、在离体叶组织脱分化和再分化培养中，茎和芽的分化主要有4个途径：直接产生不定芽、由愈伤组织产生不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。 7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒 。 8、花药培养前的预处理:低温冷藏 是最常用的方法。
1、植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段 、 奠基阶段 和 快速发展和应用阶段 。 2、培养基最常用的碳源是 蔗糖，使用浓度在1%-5% 常用 3 %。
3、培养基的种类按其态相不同分为 固体培养基 与 液体培养基 ，其灭菌方法一般采用 湿热消毒 灭菌方法。
4、pH的大小会影响琼脂的凝固能力，一般当pH大于6.0时，培养基将会 变硬 ，低于5.0时，琼脂 不能很好地凝固 。
5、一般情况下，生长素/细胞分裂素的比值高，有利于 根的形成和愈伤组织 的形成；比值低，有利于 芽 的形成。
6、选择外植体时应选择 ①选择优良的种质、②选健壮的植株 、③选最适的时期 和④选取适宜的大小 。
7、花药和发粉培养的共同特点是利用花粉 (小孢子)染色体数目的单倍性，培育出单倍体植株。
8、原生质体的分离方法有机械分离法和酶法分离法。
填空题 2、培养基的主要成分包括 ①无机营养成分（大量元素、微量元素和铁盐） 、 ②有机营养成分（包括维生素、氨基酸等） 、 ③植物生长调节物质 、 ④碳水化合物 、 ⑤其它物质 。
3、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的 凝固剂和支持物 ，一般用量为 6-10g／L 之间。
4、一般情况下，生长素/细胞分裂素的比值高，有利于 根的形成和愈伤组织 的形成；比值低，有利于 芽 的形成。
5、试管苗的生态环境： 高温且恒温 、 高湿 、 弱光 、 无菌 。
6、愈伤组织的形态发生方式主要有 不定芽方式 和 胚状体 方式。 7、无病毒苗的保存分：隔离保存和长期保存两种方法。
8、压片染色法是检测划分发育时期的简便有效方法，常用染色剂为醋酸洋红。 三、单项选择题
1、1974年我国朱至清等设计了（ B ）培养基，目前广泛应用在花药培养中。 A、马铃薯-2号 B、N6 C、W14 D、c17 2、组培室应建立在安静、清洁，并且在该地长年主风向的（ A ）方向。 A、上风 B、下风 C、左风 D、右风 3、制作每升固体培养基常用琼脂的用量为（ B ）克。
A、4—6 B、6—10 C、10—15 D、15—20 4、下列培养类型不属于液体培养的是( D )
A、旋转培养 B、纸桥培养 C、振荡培养 D、看护培养
5 、进行茎尖培养脱毒时，通常以带 1-3 个幼叶原基的茎尖作外植体较合适。则茎尖的长度约为（ B ）。
A 、 0.1-0.3mm B 、 0.3-0.5mm C 、 0.4-0.6mm D 、 0.6-0.8mm 6、下列现象中不属于离体培养容易出现的三大问题的是（ C ）。 A、污染 B、褐变 C、黄化 D、玻璃化 7、超低温种质保存的温度为（ C ）。 A、0～15℃； B、-80℃； C、-196℃； D、-280℃ 8、在植物组织培养表面灭菌时，常用的酒精浓度为（ A ）。 A、70%-75% B、80%-85% C、90%-95% D、100%
9、一般来说，在愈伤组织培养时，幼年细胞和组织比成年细胞和组织（ B ）。 A、困难 B、容易 C、一样 D、不一定 10、利用花粉或花药培养，进行单倍体育种选育一个新品种只需（ C ）年。 A、1-3 B、2-4 C、3-5 D、4-6 1、细胞工程、（ B ）、酶工程、发酵工程是生物技术的主要范畴。 A、蛋白质工程 B、基因工程 C、微生物工程 D、生化工程 2、配制（ B ）溶液时应先用10%的HCl溶解，再加蒸馏水定容。 A、2,4-D B、BA C、GA3 D、IAA
3、炼苗的环境开始时和（ A ）相似，后期类似于田间栽培条件。 A、培养室条件 B、无菌界室条件 C、缓冲间条件 D、准备室条件 4、离体培养常用的诱导生根的生长调节物质主要是（ A ）。 A、生长素 B、细胞分裂素 C、脱落酸 D、乙烯 5、植物组织培养实验室需要定期用（ A ）进行熏蒸。
A、高锰酸钾和甲醛 B、酒精和洗液 C、高锰酸钾和酒精 D、高锰酸钾和洗液 6、进行无菌操作前，工作人员可以不必（ A ）。
A、洗脸 B、换拖鞋 C、穿工作服 D、洗手 7、电子天平的感量一般在（ C ）范围。
A、0.1g或0.01g B、0.01g或0.001g C、0.001g或0.0001g D、0.1g或0.0001g 8、进行干热灭菌时，应在150℃时保持（ B ）分钟。
A、30 B、60 C、90 D、120 9、适合双子叶植物花药培养的培养基是（ A ）。
A 、 MS 培养基 B 、 B 5 培养基 C 、 N 6 培养基 D 、 White 培养基 10、下列不属于原生质体培养的是（ D ）
A 、平板培养 B 、液体浅层培养 C 、悬滴培养 D 、糖培养 1、为了减少污染，一般选择培养材料的大小，在（ A ）之间。 A、0.1-0.5cm B、0.5-1.0cm C、1.0-1.5cm D、1.5-2.0cm 2、世界上首次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是（ B ）。 A、 Morel B、Haberlandt C、 Schleiden D、 White 3、在植物组织培养表面灭菌时，常用的氯化汞浓度为（ A ）。 A、0.1-1% B、0.2-2% C、0.3-3% D、0.4-4%
4 、在细胞悬浮液成批培养过程中，细胞数目会不断发生变化，其中细胞数目迅速增加，增长速率保持不变的是（ C ）。
A 、减慢期 B 、延迟期 C 、对数生长期 D 、静止期 5、下列不属于原生质体培养的是（ D ）
A 、平板培养 B 、液体浅层培养 C 、悬滴培养 D 、糖培养 6、在愈伤组织培养时，一般双子叶植物比单子叶植物诱导愈伤组织（ B ）。 A、困难 B、容易 C、一样 D、不一定 7、在进行花药和花粉培养时，最适宜的花粉发育时期是（B ）。 A 、成熟花粉粒 B 、单核花粉期 C 、二核花粉期 D 、三核花粉期 8、植物组织培养中大多数植物都适用的培养基是（ A ）培养基。
A、MS B、N6 C、White D、B5 9、下列现象中不属于离体培养容易出现的三大问题的是（ C ）。 A、污染 B、褐变 C、黄化 D、玻璃化
10、配制微量元素母液时，浓缩了200倍保存在1升容量瓶内，当制作4升培养基时，应取用铁盐母液（ D ）ml。
A、50 B、40 C、30 D、20
一、选择题
1．植物组织培养是指 （ ） A．离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织 B．愈伤组织培育成植株
C．离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体D．愈伤组织形成高度液泡化组织 2．植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是 （ ） A.植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁 B.细胞壁使原生质体失去活力
C.细胞壁阻碍了原生质体的融合 D.细胞壁不是原生质的组成部分 3．植物体细胞杂交的结果是 （ ）
A.产生杂种植株 B．产生杂种细胞 C．原生质体融合 D．形成愈伤组织
4．科学家把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合，培育出的驱蚊草含有香
茅醛，能散发出一种特殊的达到驱蚊且对人体无害的效果。下列关于驱蚊草培育的叙述中，错误的是 （ ） A．驱蚊草的培育属于细胞工程育种，其优点是能克服远源杂交不亲和的障碍
B．驱蚊草培育过程要用到纤维素酶果胶酶、PEG等试剂或离心、振动、电刺激等方法 C．驱蚊草培育过程是植物体细胞杂交，不同于植物组织培养无愈伤组织和试管苗形成 D．驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离 5．（2005，上海）将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是 （ ） A、具有完整细胞核的细胞 B、一定的营养物质和植物激素 C、离体状态 D、导入指定基因 6．植物体细胞杂交的目的中错误的是 （ ） A.把两个植物体的优良性状集中在杂种植株上 B.获得杂种植株 C.克服远源杂交不亲和的障碍 D.实现原生质体的融合 7．植物组织培养的用途中不正确的是 （ ） A.快速繁殖 B.生产新品种 C．生产生物碱 D．生产白细胞介素－2 8．A种植物的细胞和B种植物细胞的结构如右图所示（仅 显示细胞核），将A、B两种植物细胞去掉细胞壁后，诱导二者的原生质体融合，形成单核的杂种细
胞，若经过 组织培养后得到了杂种植株，则该杂种植株是（ ）
A．二倍体；基因型是DdYyRr B．三倍体；基因型是DdYyRr C．四倍体；基因型是DdYyRr D．四倍体；基因型是DDddYYyyRRrr
9．以下关于原生质的叙述，正确的是 （ ）
A、原生质泛指细胞内的基质 B、原生质就是细胞质
C、一个动物细胞就是一团原生质 D、细胞膜、细胞核和细胞壁是原生质
10．不能人工诱导原生质体融合的方法是 （ ）
A.振动 B.电刺激 C.PEG试剂 D．重压
11．植物细胞表现出全能性的必要条件是 （ ） A.给予适宜的营养和外界条件 B.导入其他植物细胞的基因
C.脱离母体后给予适宜营养和外界条件 D.将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞内 12．细胞具有全能性的原因是 A.生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能 B.生物体的每一个细胞都具有全能性
C.生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因 D.生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的
13．植物组织培养过程中的脱分化是指 A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B．未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程
C．植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程 D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程
14.下列植物细胞全能性最高的是 A.形成层细胞 B.韧皮部细胞 C.木质部细胞 D.叶肉细胞
15．植物组织培养过程的顺序是 ①离体的植物器官、组织或细胞 ②根、芽 ③愈伤组织 ④脱分化 ⑤再分化 ⑥植物体
A．①④③⑤②⑥ B．①④③②⑤⑥ C．①⑤④③②⑥ D．⑥①④③⑤② 16．（2005，上海）将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是 A．具有完整细胞核的细胞 B．一定的营养物质和植物激素 C．离体状态 D．导入指定基因
17．下列有关细胞工程的叙述不正确的是 A. 在细胞整体水平上定向改变遗传物质 B．在细胞器水平上定向改变遗传物质
C．在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物质 D．在细胞整体水平上获得细胞产品
18．下列细胞全能性最高的是 A．植物的卵细胞 B．植物的精子细胞
C．被子植物的受精卵 D．被子植物的的叶肉细胞 19．植物体细胞融合完成的标志是 （ ）
A、产生新的细胞壁 B、细胞膜发生融合 C、细胞膜发生融合 D、细胞膜发生融合
20.植物体细胞杂交的目的是 A.用酶解法去掉细胞壁分离出有活力的原生质体 B.以人工诱导法使两个不同植物的原生质体融合
C.用植物组织培养法培养融合的原生质体得到杂种植株 D.通过以上三者来完成
21.下列提法正确的是： A、原生质专指细胞质 B、人体内的水都属于原生质 C、细胞核不是原生质 D、一个动物细胞就是一团原生质
（ ） （ ） （ ） （ ） （ ）
（ ） （ ） （ ）
（ ）
22．（多选）有关原生质体的下列叙述中，正确的是
A．组成原生质体的主要生命物质是蛋白质和核酸
B．原生质体包括细胞膜、液泡膜及两者之间的原生质 C．被脱掉细胞壁的植物裸露细胞是原生质体 D．原生质体只能用于植物细胞工程
23．(2006，广雅中学考题)（多选）下图为植物组织培养过程示意图，则下列叙述正确的是
A．植物组织培养依据的生物学原理是细胞的全能性
B．③ ④过程是指植物的营养生长和生殖生长阶段
C．将①经脱分化培养成②时，再植上人造种皮即可获得人工种子
D．② ③的再分化过程中，诱导②生根的激素为细胞分裂素和生长素 二、非选择题
1．下图是植物组织培养的简略表示。据此回答： 脱分化 再分化
①——→②——→③——→④
（1）①表示 ，它能被培养成为④的根本原因是 。 （2）②表示 ，它与①相比分化程度 ，全能性 。 （3）若想制作人工种子，应该选用（填编号） 。
（4）若①是花药，则④是 ，继续对其使用 处理可获得 正常植株，该过程称为 。
（5）若①是胡萝卜根尖细胞，则培养成的④的叶片的颜色是 ，这说明根尖细胞 。
（6）若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物——紫草素，培养将进行到（填编号） 。
2．右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答： （1）步骤①是 ，最常用的方法是 。
（2）步骤③一般常用的化学试剂是 ，目的是 。
(3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是 ，其中步骤④相当于 ，步骤⑤相当于 。
（4）植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植株。使 能够在新的植物体上有所表现，其根本原因 。
（5）若远源杂交亲本A和B都是二倍体，则杂种植株为 倍体。
（6）从理论上讲，杂种植株的育性为 。若运用传统有性杂交方法能否实现？ ，原因是 。因此，这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于 。 （7）利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？为什么？ 。
创新应用训练 1．（2004，江苏）紫草素是紫草细胞的代谢产物，可作为生产治疗烫伤药物的原料。用组织
培养技术可以在生物反应器中通过培养紫草细胞生产紫草素。下图记录了生物反应器中
紫草细胞产量、紫草素产量随培养时间发生的变化。 （1）在生产前，需先加入紫草细胞作为反应器中的“种子”。这些“种子”是应用组织培
养技术，将紫草叶肉细胞经过________________________而获得的。这项技术的理论基础是_______________________。
（2）从图中可以看出：反应器中紫草细胞的生长呈现______________________________
规律；影响紫草素产量的因素是_____________________和________________________。 （3）在培养过程中，要不断通入无菌空气并进行搅拌的目的是_________________________
和_______________________________________________。
2.1.1 植物细胞工程的基本技术参考答案
一、选择题
CCACD DDCCD CCCAA DCCACD （AC） （ABD） 二、非选择题 1、（1）离体的植物器官、组织或细胞 植物的全能性 （2）愈伤组织 低 高
（3）③（4）单倍体植株 秋水仙素 纯合 单倍体育种 （5）绿色 含有与叶绿体形成相关的基因（6）② 2、（1）去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体 酶解法 （2）PEG 诱导不同植物体细胞的原生质体融合 （3）植物组织培养 脱分化 再分化
（4）远源杂交亲本的遗传特征 杂种植株获得双亲的遗传物质 （5）四
（6）可育 不能 因为不同种生物之间存在生殖隔离 克服远源杂交不亲和的障碍 （7）否 有性生殖的过程中进行减数分裂，才遵循孟德尔的遗传规律 三、应用创新
1、（1）脱分化（或脱分化形成愈伤组织） 细胞的全能性 （2）S型增长 细胞数量 细胞所处的生长期 （3）保证氧气供应充足 使细胞与培养液充分接触
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